發(fā)布時(shí)間：2018-05-01 19:59

  本文選題：功能性巰基化聚合物膠束 + 殼聚糖-維生素E琥珀酸酯-N-乙酰半胱氨酸��； 參考：《沈陽(yáng)藥科大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：目前,腫瘤的主要治療手段為化學(xué)療法。化療藥物由于溶解度低、膜透性差、體內(nèi)分布選擇性不好,易降解等問(wèn)題,使得臨床使用的大部分化療制劑為注射劑型。但是注射給藥刺激性大,患者順應(yīng)性差,因此開(kāi)發(fā)口服化療藥物傳遞系統(tǒng)對(duì)腫瘤的治療具有重要意義。 本文設(shè)計(jì)并構(gòu)建了功能性巰基化聚合物膠束,其具有增溶化療藥物、抑制P-gp、生物粘附及促進(jìn)滲透等多功能性,能顯著提高化療藥物的口服吸收。本文以紫杉醇(PTX)為模型藥物,以自合成的功能性兩親性共聚物為載體材料,制備紫杉醇納米膠束。在對(duì)功能性聚合物進(jìn)行合成、結(jié)構(gòu)確證及性質(zhì)研究的基礎(chǔ)上,對(duì)紫杉醇納米膠束及相應(yīng)制劑學(xué)性質(zhì)、生物粘附性質(zhì)、小腸吸收情況、吸收機(jī)制及體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)進(jìn)行了考察,同時(shí)對(duì)紫杉醇納米膠束的細(xì)胞水平轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制進(jìn)行了研究。 以維生素E琥珀酸酯(VES)為疏水內(nèi)核,以殼聚糖(CS)為親水主鏈,以N-乙酰半胱氨酸(NAC)為表面修飾基團(tuán),合成了不同巰基取代度的兩親性巰基化共聚物CS-VES-NAC-1,-2,-3和未巰基化兩親性共聚物CS-VES。采用IR、1H-NMR、TGA、EDS等手段對(duì)共聚物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確證。使用Ellman's試劑法測(cè)定了CS-VES-NAC系列共聚物的游離巰基含量分別為182.6、275.5、451.5μmol/g,溶脹性性良好。穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明CS-VES-NAC共聚物中游離巰基在不同溫度(4℃、室溫及37℃)和不同pH環(huán)境中(pH1.2HCl溶液、pH5.4PBS溶液及pH6.8PBS溶液)均具有較好的穩(wěn)定性,可用于載藥膠束的制備。 以巰基聚合物CS-VES-NAC為載體,采用探頭超聲法制備納米膠束。隨著巰基取代度的增加,CS-VES-NAC-1,-2,-3空白納米膠束粒徑逐漸降低,分別為240.0、228.2、192.2nm, Zeta電位也逐漸降低,分別為+59.4、+58.4、+51.9mv。以紫杉醇為模型藥物制備載藥膠束,考察不同載藥量對(duì)粒徑、Zeta電位的影響。載藥膠束粒徑范圍為180nm～250nm,包封率約為60%-80%,zeta電位均在+40mv以上。同時(shí),巰基取代度對(duì)膠束的粒徑及zeta電位也有影響,隨著巰基取代度的增加,粒徑及zeta電位均有下降趨勢(shì)。透射電鏡圖顯示載藥膠束呈球形,外觀圓整,粒徑分布均勻,有清晰的核-殼結(jié)構(gòu),平均粒徑約為200nm,與動(dòng)態(tài)光散射的測(cè)定結(jié)果基本一致。DSC、X-射線結(jié)果表明紫杉醇以無(wú)定型狀態(tài)存在于膠束內(nèi)核中。體外釋放研究表明載藥膠束緩釋作用明顯,可保證在生理狀態(tài)下紫杉醇在膠束內(nèi)核中穩(wěn)定存在,避免藥物提前泄漏。 以Ⅲ型粘蛋白為腸黏膜的體外模型,對(duì)納米膠束的生物粘附能力進(jìn)行考察。結(jié)果表明,CS-VES-NAC聚合物膠束能以二硫鍵共價(jià)結(jié)合的方式與粘蛋白進(jìn)行相互作用,明顯提高粘附性。采用原位單向在體腸灌流試驗(yàn)考察了膠束制劑的在體腸吸收情況。結(jié)果表明,膠束制劑的吸收速率常數(shù)Ka要高于紫杉醇溶液劑,其中吸收最好的是CS-VES-NAC-1膠束,在十二指腸段的吸收速率(Ka)是溶液劑的4.51倍。同時(shí),在十二指腸、空腸、回腸段,CS-VES-NAC系列膠束組的表觀滲透系數(shù)(Papp)也均高于溶液劑(p0.05)。CS-VES-NAC-1膠束在十二指腸段的Papp值是溶液劑的4.64倍。腸段攝取機(jī)制結(jié)果表明,網(wǎng)格蛋白途徑、小窩蛋白途徑、巨胞飲及非網(wǎng)格蛋白非小窩蛋白途徑均參與對(duì)納米粒的攝取。激光共聚焦顯微鏡結(jié)果表明,巰基化膠束經(jīng)口服給藥后,小腸膜滲透性比游離藥物組、CS-VES組均有提高,小腸中吸收最好部位是十二指腸段。 采用UPLC-MS/MS方法研究了PTX溶液劑及各膠束制劑的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)。各組制劑以十二指腸給藥的方式進(jìn)行,同時(shí)以PTX溶液劑靜脈注射為對(duì)照計(jì)算絕對(duì)生物利用度。結(jié)果表明,PTX溶液劑,CS-VES膠束及CS-VES-NAC-1,-2,-3膠束的絕對(duì)生物利用度分別為3.21%、3.39%、13.65%、13.33%、7.68%；CS-VES膠束及CS-VES-NAC-1,-2,-3膠束組的AUC0-24h分別是PTX-Sol對(duì)照組(十二指腸給藥)的1.06、4.25、4.15和2.39倍,t1/2分別是PTX-Sol對(duì)照組(十二指腸給藥)的1.33、4.31、1.78和1.25倍。藥動(dòng)學(xué)結(jié)果表明紫杉醇巰基化聚合物膠束能夠提高紫杉醇的血藥濃度,增加生物利用度,同時(shí)延長(zhǎng)其在血液中的循環(huán)時(shí)間。 以人結(jié)腸癌細(xì)胞Caco-2為腸吸收細(xì)胞模型,對(duì)納米膠束的細(xì)胞水平生物學(xué)機(jī)制進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,空白膠束的細(xì)胞毒性較低,載體材料安全性良好。CS-VES-NAC膠束通過(guò)生物粘附作用和促進(jìn)內(nèi)吞的方式增加PTX的細(xì)胞攝取。另外,CS-VES-NAC-1膠束能顯著增加PTX腸腔側(cè)到基底側(cè)的滲透性,并降低反方向的外排,將PTX的外排比率降低10倍(外排率為2.13)。聚合物膠束以能量依賴性的方式進(jìn)行跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn),其中網(wǎng)格蛋白途和小窩蛋白途徑均有參與。細(xì)胞攝取試驗(yàn)表明CS-VES和CS-VES-NAC-1載體材料具有P-gp的抑制作用,可以顯著降低細(xì)胞對(duì)PTX的外排。此外,CS-VES-NAC-1載體材料還可打開(kāi)細(xì)胞間緊密連接,增加細(xì)胞旁路轉(zhuǎn)運(yùn),使PTX溶液劑的膜滲透性提高了19.46倍,外排比率降低為0.75。表明CS-VES-NAC聚合物納米膠束可作為化療藥物的有效傳遞系統(tǒng)。
[Abstract]:Because of low solubility , poor membrane permeability , poor in vivo distribution , easy degradation and so on , most of the chemotherapeutic agents used in clinical use are injection . However , it is of great significance to develop oral chemotherapeutic drug delivery system for the treatment of tumor .

A functional sulfhydryl polymer micelle was designed and constructed . It has the functions of solubilizing chemotherapeutic drugs , inhibiting P - gp , bioadhesion and promoting osmosis , and can significantly improve the oral absorption of chemotherapeutic drugs .

CS - VES - NAC - 1 , -2 , -3 and CS - VES were synthesized by means of IR , 1H - NMR , TGA and EDS . The results showed that the free sulfhydryl groups in CS - VES - NAC copolymer were 182.6 , 275.5 , 451.5 渭mol / g , and the swelling property was good . The stability test showed that the free sulfydryl groups in CS - VES - NAC copolymer had better stability at different temperatures ( 4 鈩，

本文編號(hào)：1830843