本文選題：克利貝特 + 藥代動力學(xué)��； 參考：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：克利貝特是一種苯氧芳酸衍生物類調(diào)血脂藥物，其降脂作用較安全有效，臨床主治各種類型的高脂血癥，由日本住友公司研發(fā)，1981年首次在日本上市，收載于日本藥局方14版，降血脂作用在同樣情況下比氯貝丁脂高10倍。藥動學(xué)口服吸收好，并具有抗血栓作用，是廣譜的全身性脂質(zhì)調(diào)節(jié)劑。目前，我國尚無該產(chǎn)品的生產(chǎn)和供應(yīng)。 目的：目前關(guān)于克利貝特的人體藥代動力學(xué)研究鮮有報道。本研究擬采用高效液相色譜法(HPLC)建立檢測人血漿中克利貝特的方法，應(yīng)用于血漿中克利貝特的測定，計算相應(yīng)的藥代動力學(xué)參數(shù)。采用高效液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)建立檢測人尿樣中克利貝特的方法，并采用該方法測定尿樣中克利貝特的濃度，從而進(jìn)行克利貝特尿樣藥代動力學(xué)特征研究。我們將對中國健康受試者口服克利貝特片后的藥代動力學(xué)進(jìn)行研究，旨在為該藥在中國的臨床用藥提供依據(jù)。 方法： 第一部分建立HPLC檢測血漿中克利貝特方法并進(jìn)行方法學(xué)驗證。試驗步驟：精密量取血漿0.2mL，加入非諾貝特內(nèi)標(biāo)（100μg·mL-1）20μL，渦旋混勻。加入0.6mL乙腈：1mol·L-1鹽酸=(95:5)沉淀劑，渦旋3分鐘，將離心機(jī)轉(zhuǎn)速調(diào)至16000r min-1，離心10min，取上清液放置到自動進(jìn)樣器樣品瓶中，進(jìn)樣量為20μL。采用DIKMA Inspire C18(150mm×4.6mm I.D)色譜柱，流動相為乙腈-水溶液（73：27，v/v，含0.4%磷酸）；流速：1.0mL·min-1；柱溫：35°C。 第二部分建立LC-MS/MS檢測尿樣中克利貝特方法并進(jìn)行方法學(xué)驗證。試驗步驟：精密量取血漿0.2mL，加入非諾貝特內(nèi)標(biāo)（2.024μg·mL-1）30μL，渦旋混勻。加入0.6mL乙腈：1mol·L-1鹽酸=(95:5)沉淀劑，渦旋3分鐘，將離心機(jī)轉(zhuǎn)速調(diào)至16000r·min-1，離心10min，取上清液置到自動進(jìn)樣樣品瓶中，，進(jìn)樣量為5μL。采用DIKMA Inspire C18(150mm×4.6mm I.D)色譜柱，流動相為甲醇-水溶液（90：10，v/v，含0.1%甲酸，10mmol/L醋酸銨）；流速：0.6mL·min-1；柱溫：35°C。檢測離子：克利貝特m/z486.29→175.00,內(nèi)標(biāo)非諾貝特：m/z361.10→233.10；霧化氣流速：12L·min-1；干燥氣壓力：40psi；毛細(xì)管電壓：4KV；干燥器溫度：350°C；裂解電壓：克利貝特150V，非諾貝特120V；碰撞能：克利貝特28V，非諾貝特14V。 第三部分血漿中克利貝特單次給藥藥代動力學(xué)及飲食影響研究。共篩選出36名健康受試者，分為低劑量組單次服用克利貝特片200mg（1片）、中劑量組單次服用克利貝特片400mg（2片）和高劑量組單次服用克利貝特片600mg（3片），每組男女各半，各12人。健康受試者于早上空腹給藥前抽取空白血漿5ml，之后用250ml的溫開水送服克利貝特，為了防止藥物被稀釋，服藥以后2h內(nèi)不能飲水，在給藥0.5,1,2,3,4,5,6,8,12,24,36,48,60和72h分別采集靜脈血5ml，將采集出來的血液立刻置于抗凝試管中，將離心機(jī)轉(zhuǎn)速調(diào)至4000r·min-1，離心5min，離心后將所得血漿放在肝素抗凝試管中，于-80°C保存。中劑量組的12名受試者，采用標(biāo)準(zhǔn)兩階段自身對照試驗設(shè)計，隨機(jī)分為I、II兩組，每組男女各半，各6人。試驗分兩個階段：第一階段I組空腹10h口服克利貝特400mg，II組在高脂肪、高卡路里餐后口服克利貝特400mg，在給藥前抽取空白血5ml，給藥后0.5,1,2,3,4,5,6,8,12,24,36,48,60和72h分別采集靜脈血5ml，將采集出來的血液立刻置于抗凝試管中，將離心機(jī)轉(zhuǎn)速調(diào)至4000r·min-1，離心5min，離心后將所得血漿置肝素抗凝試管中，于-80°C保存。經(jīng)過一周清洗期兩組交換進(jìn)行第二階段試驗，I組餐后口服克利貝特400mg，II組空腹口服克利貝特400mg，其余同第一階段。 第四部分尿樣中克利貝特藥代動力學(xué)研究。低劑量組健康受試者在進(jìn)行血漿中藥代動力學(xué)研究的同時考察受試者服用克利貝特片后的尿藥排泄情況。給藥前收集一次空白尿樣，在給藥后0-2、2-4、4-6、6-8、8-12、12-24h、24-48h收集并記錄尿樣量，為了保證尿樣濃度的測定，每個時間段各留5ml尿樣于-80°C保存。 結(jié)果： 1.我們首次建立了快速、靈敏方便的HPLC方法來檢測血漿中克利貝特的濃度，建立的HPLC方法最低定量限為0.5μg·mL-1，線性范圍為0.5-32μg·mL-1，克利貝特低、中、高三種濃度的批內(nèi)精密度的RSD值均小于1.8%，而批間精密度RSD均小于5.7%；血漿中克利貝特的提取回收率分別為91.2%±1.5,90.7%±3.0,96.9%±1.5. 2.我們建立的尿樣中克利貝特LC-MS/MS檢測方法得到標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為0.1002-10.02μg·mL-1，最低定量限為0.1002μg·mL-1；克利貝特低、中、高三種濃度的準(zhǔn)確度和精密度均符合要求；尿樣中克利貝特提取回收率分別為92.0%±5.3,93.9%±1.7,93.7%±4.2； 3.36名健康受試者口服不同劑量克利貝特片(200、400、600) mg后，克利貝特片的體內(nèi)藥代動力學(xué)參數(shù)：tmax分別為2.75±0.62h，2.67±0.65h，3.25±0.87h；Cmax分別為11.17±1.23μg mL-1，21.91±2.66μg mL-1，26.21±3.28μg mL-1；t1/2分別為20.22±2.89h，18.22±2.71h，23.64±7.88h； AUC0-t分別為209.08±29.1μg h mL-1，378.13±89.65μg h mL-1，531.86±77.87μg h mL-1；CLz分別為865±106.6mL h-1，1029.03±242.31mL h-1，1039.72±128.54mL h-1；Vz分別為25138.13±4467.83mL，27088.63±7700.9mL，35412.94±12585.12mL。統(tǒng)計分析結(jié)果表明，不同劑量組的t1/2、CLz和Vz無顯著差異，三個劑量組的Cmax和AUC0-t與劑量間呈線性相關(guān)，表明在200~600mg劑量范圍內(nèi)，克利貝特片在健康人體內(nèi)藥代動力學(xué)為線性藥代動力學(xué)。中劑量組12名受試者單次餐后口服克利貝特片400mg，測得血漿中克利貝特的主要藥代動力學(xué)參數(shù)：t1/2為23.52±3.43h，AUC0-t為378.67±41.74μg h mL-1，tmax和Cmax分別為9.00±3.02h和13.13±1.09μg mL-1。餐后與空腹給藥相比，主要藥代動力學(xué)參數(shù)AUC無統(tǒng)計學(xué)差異、tmax明顯延遲，Cmax明顯降低，P0.05均具有統(tǒng)計學(xué)差異。 4.低劑量0～48h的克利貝特尿累積排泄率為0.34%。 結(jié)論： 1.我們首次建立了HPLC檢測血樣中克利貝特方法，按照相關(guān)方法學(xué)驗證要求對方法進(jìn)行驗證，驗證的項目均符合規(guī)定，該方法適用于克利貝特人體藥代動力學(xué)研究。 2.本試驗首次建立了LC-MS/MS檢測尿樣中克利貝特方法，按照相關(guān)方法學(xué)驗證要求對方法進(jìn)行驗證，驗證的項目均符合規(guī)定。 3.統(tǒng)計分析結(jié)果表明，不同劑量組的t1/2、CLz和Vz無顯著差異，三個劑量組的Cmax和AUC0-t與劑量間呈線性相關(guān)，表明在200~600mg劑量范圍內(nèi)，克利貝特片人體內(nèi)具有線性藥代動力學(xué)特征。低劑量0～48h的克利貝特尿累積排泄率為0.34%。餐后與空腹給藥相比，主要藥代動力學(xué)參數(shù)AUC無明顯變化、tmax明顯延遲，Cmax明顯降低，P0.05有統(tǒng)計差異。各劑量組男女受試者藥動學(xué)參數(shù)統(tǒng)計無性別差異。
[Abstract]:Clifbet is a kind of benzoyl acid derivative, its lipid lowering drug, which is more safe and effective in lowering lipid. It is developed by Sumitomo Co and was first listed in Japan in 1981. It was published in Japan for the first time in the 14 edition of Japanese drug administration. The effect of lowering blood lipid is 10 times higher than that of chlorbin fat under the same condition. Pharmacokinetics is taken orally. Good, and has anti thrombotic effect, is a broad spectrum of systemic lipid regulator. At present, there is no production and supply of this product in our country.
Objective: there are few reports on the pharmacokinetics of kli in human body. This study is to establish a high performance liquid chromatography (HPLC) method for the determination of kli bate in human plasma and apply it to the determination of clifbet in plasma and calculate the corresponding pharmacokinetic parameters. High performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) is used. To establish a method for detecting clifbett in human urine, and to determine the concentration of clifbet in urine samples by this method, so as to study the pharmacokinetics of clifbet. We will study the pharmacokinetics of the Chinese healthy subjects after oral clifbet tablets. The purpose is to provide the basis for the clinical use of the drug in China.
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本文編號：1797761