本文選題：AQP + 磷酸化��； 參考：《中國藥學(xué)雜志》2015年04期

【摘要】：目的探討蛋白激酶p38,蛋白激酶C對幾種哺乳動(dòng)物細(xì)胞中水通道蛋白9磷酸化的調(diào)控作用,以及這些蛋白因子對細(xì)胞中砷攝入含量的影響。方法采用免疫印跡法和免疫共沉淀技術(shù)分別檢測細(xì)胞株中p38,蛋白激酶C和水通道蛋白9表達(dá)水平及其磷酸化水平。電感藕合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)測定細(xì)胞內(nèi)砷含量。結(jié)果在ECV-304,AsRE,Hep G2和L-02細(xì)胞株中,p38蛋白及其磷酸化表達(dá)水平在砷的刺激下隨時(shí)間增加而有顯著上升,相同條件下蛋白激酶C末見明顯變化。當(dāng)抑制細(xì)胞中p38活性,除了L-02細(xì)胞中水通道蛋白9的磷酸化水平受到抑制外,其余細(xì)胞中水通道蛋白9的蛋白含量及磷酸化水平都未見明顯變化。砷含量也只在L-02細(xì)胞中看到有較顯著的下降。結(jié)論水通道蛋白9磷酸化水平影響砷進(jìn)入細(xì)胞的速度與含量,但不同的細(xì)胞中水通道蛋白9的磷酸化調(diào)控機(jī)制有所差異。p38蛋白激酶在正常肝細(xì)胞L-02中顯示對水通道蛋白9磷酸化有一定的調(diào)控作用,蛋白激酶C則在本實(shí)驗(yàn)條件下未見入調(diào)控砷的入胞機(jī)制。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of protein kinase p38 and protein kinase C on the phosphorylation of aquaporin 9 in several mammalian cells and the effect of these protein factors on arsenic uptake. Methods the expression and phosphorylation of p38 protein kinase C and aquaporin-9 were detected by Western blot and co-immunoprecipitation respectively. Inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS) was used to determine the content of arsenic in cells. Results the expression of p38 protein and its phosphorylation in ECV-304 AsREHep G2 and L-02 cells increased significantly with arsenic stimulation, and protein kinase C showed obvious changes at the end of the same condition. When the p38 activity was inhibited, the phosphorylation level of aquaporin 9 in L-02 cells was inhibited, but the protein content and phosphorylation level of aquaporin 9 in other cells did not change significantly. Arsenic content was also significantly decreased in L-02 cells. Conclusion the phosphorylation level of aquaporin 9 affects the rate and content of arsenic entering into cells. However, the phosphorylation mechanism of aquaporin 9 in different cells is different. P38 protein kinase has a certain role in regulating the phosphorylation of aquaporin 9 in normal hepatocytes L-02. Protein kinase C (PKC) did not show the mechanism of arsenic regulation in this experiment.
【作者單位】： 杭州師范大學(xué)健康管理學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)系;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81001227,30860241) 浙江省重點(diǎn)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(2011R50021) 浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動(dòng)計(jì)劃(新苗人才計(jì)劃)(2013R421040)
【分類號】：R965

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本文編號：1794148