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不同濃度腐胺對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-04-19 23:13

  本文選題:腐胺 + 增殖; 參考:《南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2015年05期


【摘要】:目的探討不同濃度腐胺對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞(human skin fibroblasts,HSF)增殖、遷移、凋亡的影響。方法將體外HSF分為腐胺組和對(duì)照組,以含腐胺濃度分別為0.5、1、5、10、50、100、500、1000μg/ml完全培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞設(shè)為腐胺組,不添加腐胺設(shè)為對(duì)照組。經(jīng)對(duì)照組及不同濃度腐胺組處理的HSF培養(yǎng)24 h后,再以四唑化合物電子耦聯(lián)顯色法(MTS法)測(cè)定細(xì)胞增殖能力(用吸光度值表示),Transwell遷移實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞的遷移能力,流式細(xì)胞技術(shù)(Flow Cytometry,FCM)Annexin V/PI標(biāo)記法測(cè)定細(xì)胞凋亡率。結(jié)果 (1)細(xì)胞增殖能力(MTS)測(cè)定結(jié)果顯示,0.5、1、5、10μg/ml腐胺組HSF的吸光度值較對(duì)照組升高(P0.01),并且1μg/ml時(shí)達(dá)峰值(0.754±0.024);500、1000μg/ml腐胺組HSF吸光度值較對(duì)照組降低(P0.01);50、100μg/ml腐胺組HSF的吸光度值與對(duì)照組無(wú)明顯差異(P0.05);(2)Transwell遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,1μg/ml腐胺組穿過(guò)微孔膜的細(xì)胞數(shù)目較對(duì)照組顯著增加(P0.01),且達(dá)到峰值309±21;50μg/ml及以上濃度腐胺組HSF穿過(guò)微孔膜的數(shù)目較對(duì)照組減少(P0.05);0.5、5、10μg/ml腐胺組HSF穿過(guò)微孔膜的細(xì)胞數(shù)目與對(duì)照組比較無(wú)明顯差異(P0.05);(3)流式細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示,0.5、1、5、10μg/ml腐胺組HSF凋亡率較對(duì)照組顯著降低(P0.05),而且在1μg/ml時(shí)細(xì)胞凋亡率達(dá)最低值(11.10±0.79)%;100μg/ml及以上濃度腐胺組細(xì)胞凋亡率較對(duì)照組顯著升高(P0.01),而且隨著濃度增加凋亡率逐漸升高;50μg/ml腐胺組與對(duì)照組比較細(xì)胞凋亡率無(wú)明顯差異(P0.05)。結(jié)論微量腐胺可維持細(xì)胞正常的遷移能力,顯著提高HSF的細(xì)胞增殖能力,而較高濃度的腐胺能顯著抑制HSF遷移與增殖,并誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡,提示不同濃度的腐胺會(huì)對(duì)創(chuàng)面愈合起到完全不同的作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of different concentrations of putrescine on the proliferation, migration and apoptosis of human skin fibroblast cells. Methods HSF in vitro was divided into putrescine group and control group. The cultured cells were divided into putrescine group and control group on 1 000 渭 g/ml culture medium containing putrescine. HSF treated with different concentrations of putrescine and control group were cultured for 24 h, and then the cell proliferation ability was measured by electron coupled chromogenic assay (MTS method). Flow Cytometry (FCM) Annexin V/PI labeling method was used to detect the apoptosis rate. Results the results of cell proliferation assay showed that the absorbance of HSF in 10 渭 g/ml putrescine group was higher than that in control group, and the peak value of HSF in 1 渭 g/ml group was 0.754 鹵0.024 ~ 500 渭 g/ml putrescine, which was lower than that in control group (P0.0150100 渭 g/ml putrescine group) and control group (P 0.0150100 渭 g/ml putrescine group). The absorbance value of HSF in P0.0150100 渭 g/ml putrescine group was lower than that in control group. The results of Transwell migration test showed that the number of cells passing through the micropore membrane in the 1 渭 g/ml putrescine group was significantly higher than that in the control group, and the number of HSF passing through the micropore membrane reached a peak value of 309 鹵21 50 渭 g/ml and more in the putrescine group than that in the control group. The number of HSF passing through the micropore membrane was less than that in the control group. There was no significant difference in the number of HSF cells passing through the micropore membrane compared with the control group. (P 0.05) the results of flow cytometry showed that the apoptosis rate of HSF in the group of 0. 5 渭 g/ml putrescine was significantly lower than that in the control group, and at 1 渭 g/ml the apoptotic rate reached the lowest value of 11. 10 鹵0. 79100 渭 g/ml and above. The apoptotic rate of putrescine group was significantly higher than that of the control group (P 0.01), and the apoptosis rate increased gradually with the increase of concentration of 50 渭 g/ml putrescine compared with the control group. There was no significant difference in apoptosis rate between the two groups. Conclusion Trace putrescine can maintain the normal migration ability of the cells and significantly improve the proliferation of HSF cells, while the higher concentration of putrescine can significantly inhibit the migration and proliferation of HSF, and induce cell apoptosis. It suggested that different concentrations of putrescine could play a completely different role in wound healing.
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬?gòu)V州市第一人民醫(yī)院燒傷外科;
【基金】:廣州市重大民生專(zhuān)項(xiàng)(201300000100)
【分類(lèi)號(hào)】:R96

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