本文選題：腰椎手術(shù)失敗綜合征 + 硬膜外纖維化��； 參考：《山東大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：近年來,隨著脊柱手術(shù)技術(shù)的進步,CT、MRI等影像診斷水平的提高,以及人們對高質(zhì)量生活的要求,腰椎減壓手術(shù)的患者日益增多。隨著腰椎手術(shù)的開展,腰椎手術(shù)失敗綜合征(failed back surgery syndrome,FBSS)廣泛出現(xiàn),其發(fā)生率高達5%-40%,嚴重影響了手術(shù)治療效果。其主要癥狀為腰椎管減壓術(shù)后出現(xiàn)的慢性神經(jīng)根性疼痛或腰腿部疼痛、無力、麻木等。引起腰椎手術(shù)失敗綜合征的原因多樣、復(fù)雜,但眾多研究者認為腰椎管減壓、椎板切除術(shù)后硬膜外纖維瘢痕組織粘連是重要原因之一。其機理為：椎板切除后,手術(shù)創(chuàng)傷導(dǎo)致局部炎癥反應(yīng),并形成血腫,在炎性因子的介導(dǎo)下,成纖維細胞增殖,膠原蛋白合成增加,在硬膜外手術(shù)區(qū)域形成纖維瘢痕,造成硬膜外纖維化(Epidural Fibrosis EF)。纖維瘢痕組織牽拉、擠壓硬脊膜、神經(jīng)根,并影響供血,導(dǎo)致臨床上出現(xiàn)腰腿痛等癥狀。 對于腰椎手術(shù)失敗綜合征患者的再次手術(shù)治療,醫(yī)學(xué)界的普遍認知是手術(shù)風(fēng)險大、獲益小。我們謹慎地在臨床選取一組FBSS病例,排除腰椎不穩(wěn)、腰椎間盤突出髓核摘除不徹底或術(shù)后復(fù)發(fā)等醫(yī)源性因素,通過CT、增強MRI初步證實FBSS是由于手術(shù)區(qū)域瘢痕組織增生、粘連、牽拉硬膜囊或神經(jīng)根引起。采取再次手術(shù)治療腰椎管減壓術(shù)后硬膜外瘢痕粘連引起的FBSS.8例患者,手術(shù)優(yōu)良率僅有50%,結(jié)果并不十分滿意。 因此,如果在術(shù)前、術(shù)中或者術(shù)后采取一定的措施或應(yīng)用某種藥物、材料,從而有效的避免硬膜外纖維瘢痕形成,預(yù)防神經(jīng)根粘連,進而減少腰椎手術(shù)失敗綜合征的發(fā)生,將比手術(shù)治療擁有更廣闊的前景,是脊柱外科領(lǐng)域重點研究的課題之一。 白藜蘆醇(3,5,4'-o-trihydroxystilbene)是一種存在于葡萄、紅葡萄酒、虎杖、花生、桑椹等植物中的生物性很強的天然多酚類物質(zhì)。既往研究表明,白藜蘆醇具有抗腫瘤、抗氧化和抗炎的性質(zhì),并且可以舒張血管,抑制血小板聚集。此外,國外前期研究表明,在動物實驗中,白藜蘆醇可以有效預(yù)防腹部、關(guān)節(jié)等外科手術(shù)后纖維組織的粘連。然而,其在抑制腰椎術(shù)后纖維瘢痕組織形成、粘連中的作用,尚沒有文獻報道。 本課題采用動物實驗的方法,通過建立大鼠腰椎板切除模型,首次研究白藜蘆醇是否能夠有效抑制纖維組織增生,預(yù)防腰椎術(shù)后瘢痕組織粘連,旨在探討白藜蘆醇抑制硬膜外纖維化的機制,為進一步研究腰椎手術(shù)失敗綜合征的發(fā)生機制及解決辦法提供試驗依據(jù)。 第一部分再次手術(shù)治療腰椎管減壓術(shù)后硬膜外瘢痕粘連引起的FBSS的臨床觀察 目的觀察手術(shù)治療腰椎管減壓術(shù)后硬膜外瘢痕粘連引起的FBSS的臨床效果 方法 1、對2005年1月-2012年12月之間60例FBSS患者按照設(shè)定條件進行篩選,選取符合研究條件的8例患者進行手術(shù)。 2、8例患者術(shù)前常規(guī)進行全面影像學(xué)檢查,包括X線片、CI、MRI。術(shù)前按照MMPI標(biāo)準(zhǔn),進行心理測試。經(jīng)過詳細的術(shù)前討論,制定周密的手術(shù)方案。 3、手術(shù)在全身麻醉下進行,用刮匙或神經(jīng)剝離子自瘢痕組織與正常組織交界處椎板邊緣,沿硬脊膜及神經(jīng)根走行方向順行刮除瘢痕組織。仔細操作,動作輕柔,徹底止血,避免損傷、過度干擾硬脊膜及神經(jīng)根。術(shù)中大體觀察瘢痕組織增生、粘連情況,并行HE染色。 4、術(shù)后采用Macnab療效判斷標(biāo)準(zhǔn),評判手術(shù)效果。 結(jié)果 1、再次手術(shù)與初次手術(shù)的手術(shù)時間、術(shù)中出血量、平均住院日有顯著性差異,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 2、術(shù)中觀察到手術(shù)區(qū)域硬膜外間隙解剖層次不清,大量致密的纖維瘢痕組織增生,與硬膜囊、神經(jīng)根粘連緊密,剝離困難。Rydell分級集中在Ⅱ～Ⅲ級。HE染色可見瘢痕組織內(nèi)大量纖維組織增生,纖維致密,炎性細胞浸潤。 3、全部患者隨訪12個月-36個月,平均19.8±8.6個月。采用Macnab療效判斷標(biāo)準(zhǔn),再次手術(shù)治療效果：優(yōu)2例,良2例,可3例,差1例,優(yōu)良率50%。 結(jié)論 1、腰椎管減壓術(shù)后硬膜外瘢痕粘連引起的FBSS再次手術(shù)時間、術(shù)中出血量、平均住院日均較初次手術(shù)明顯增加。 2、手術(shù)技術(shù)要求高,難度大,剝離困難,對神經(jīng)根及硬脊膜干擾較大。 3、再次手術(shù)治療腰椎管減壓術(shù)后硬膜外瘢痕粘連引起的FBSS結(jié)果并不十分理想。如果在術(shù)前、術(shù)中或者術(shù)后采取一定的措施或應(yīng)用某種藥物、材料,預(yù)防腰椎管減壓術(shù)后硬膜外瘢痕粘連的形成,比手術(shù)治療將有更廣闊的前景。 第二部分白藜蘆醇預(yù)防大鼠椎板切除術(shù)后硬膜外瘢痕粘連的實驗研究 目的探討白藜蘆醇抑制硬膜外纖維化的機制,為進一步研究腰椎手術(shù)失敗綜合征的發(fā)生機制及解決辦法提供試驗依據(jù)。 方法 1、選擇健康成年Wistar大鼠60只,隨機平均分為3組,白藜蘆醇藥物溶液組：腰椎板切除術(shù)后給予白藜蘆醇生理鹽水藥物溶液干預(yù)。生理鹽水對照組：術(shù)后給予生理鹽水溶液干預(yù)。單純椎板切除對照組：實驗動物僅行單純椎板切除術(shù)。 2、動物模型制備：10%水合氯醛腹腔內(nèi)注射麻醉后,在嚴格的無菌環(huán)境下,遵照之前的腰椎板切除術(shù)實驗?zāi)Ｐ瓦M行標(biāo)準(zhǔn)化手術(shù)。每只大鼠均在尾部獨立編號。手術(shù)取背側(cè)正中切口,長約2-3cm,逐層切開皮膚與淺筋膜,以1mm微型咬骨鉗去掉腰1棘突和椎板,骨窗約4mm×5mm,暴露腰1的硬脊膜。以冰生理鹽水沖洗傷口,充分止血,手術(shù)關(guān)閉傷口。 3、術(shù)后4周處死動物并取材,于3組動物中每組隨機抽取5只大鼠深度麻醉,原手術(shù)入路進入,行肉眼觀察硬膜外粘連情況、炎癥反應(yīng)情況、局部瘢痕增生情況,并行Rydell分級；每組隨機抽取5只大鼠處死,取硬膜外瘢痕組織行羥脯氨酸(hydroxyproline)含量分析；每組隨機取5只大鼠深度麻醉并處死,取腰1椎體(含硬膜外瘢痕組織),脫鈣處理,樣品行石蠟包埋并切片后,行免疫組化、蘇木精-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining, HE染色)、Masson染色觀察損傷局部組織瘢痕粘連情況、成纖維細胞增殖情況和波動蛋白表達情況；每組隨機取.5只大鼠深度麻醉并處死,取硬膜外瘢痕組織行實時定量PCR技術(shù)(Quantitative real-time PCR, RTPCR)對局部瘢痕組織中炎性因子(IL-6、TGF-β1)的表達情況進行檢測。 結(jié)果 1、術(shù)后各組大鼠正常飼喂,各組大鼠出現(xiàn)不同程度的體重下降,5d以后各組大鼠體重下降停止。術(shù)后連續(xù)3天肌肉注射抗生素預(yù)防手術(shù)部位感染,未見感染跡象。飼養(yǎng)期間,與對照組相比,白藜蘆醇藥物干預(yù)組動物無行為及進食異常,亦無感染跡象。 2、術(shù)后4周,每組大鼠隨機抽出5只做硬膜外瘢痕粘連情況的大體觀察：生理鹽水溶液對照組和單純椎板切除對照組的粘連程度較重,纖維組織增生嚴重,且呈致密的纖維性粘連,炎癥反應(yīng)較為劇烈。白藜蘆醇治療組的粘連明顯減輕,呈松散狀,硬膜外粘連呈薄膜樣弱粘連。 3、每組大鼠隨機抽出5只做羥脯氨酸含量檢測分析,繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,利用SPSS10軟件系統(tǒng)回歸出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：C=5.6795×ABS-0.0233。同單純損傷對照組(31.32±4.72)相比,生理鹽水溶液組(48.92±3.54)無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),白藜蘆醇藥物溶液組(54.17±4.39)的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 4、HE染色及Masson染色：生理鹽水溶液對照組和單純椎板切除對照組可見濃厚而大量致密的膠原纖維形成,與硬膜明顯粘連,并伴有不成熟的纖維細胞。白藜蘆醇溶液治療組可見較薄而松散的膠原纖維存在,未見緊密粘連形成。 5、石蠟切片免疫組化染色：生理鹽水溶液對照組和單純椎板切除對照組可見濃厚而大量致密的膠原纖維,可見大量的vimentin陽性細胞存在；白藜蘆醇藥物溶液組可見較薄而松散的膠原纖維存在,vimentin陽性細胞數(shù)量明顯少。行光密度半定量結(jié)果表明：白藜蘆醇藥物溶液治療組(27.17±19.28)、生理鹽水對照組(42.17±22.44)、單純椎板切除對照組(43.62±23.15),其中生理鹽水對照組同單純椎板切除對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),白藜蘆醇藥物溶液組同單純椎板切除對照組比較具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。 6、炎性因子Real-time PCR檢測結(jié)果：硬膜外瘢痕組織炎性因子IL-6和TGF-β1的Real-time PCR檢測結(jié)果可見：同單純椎板切除對照組相比,生理鹽水對照組無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),白藜蘆醇治療組差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 1、白藜蘆醇藥物溶液具有抑制成纖維細胞的增殖、降低膠原合成,抑制脯氨酸羥化酶活性,抑制炎性因子合成,產(chǎn)生抗纖維化、抗瘢痕、抗炎的作用。 2、白藜蘆醇藥物溶液抑制硬膜外纖維化的作用機制是通過調(diào)低炎性因子IL-6和TGF-β1的表達水平及減少羥脯氨酸沉積來實現(xiàn)的,其效果滿意。 3、本研究證實了組織的瘢痕化程度與羥脯氨酸的含量成正比,并根據(jù)分析羥脯氨酸含量對組織的瘢痕化程度進行定量評估,提高了實驗的準(zhǔn)確性。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R965

【參考文獻】

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1 姚中強,于孟學(xué),韓淑玲;非甾體抗炎藥[J];北京醫(yī)學(xué);2005年05期

2 曹治東;李邦春;董浦江;茍景躍;胡建華;田開熙;晏偉;;漢防己甲素預(yù)防椎板切除術(shù)后硬膜外粘連的實驗研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2008年11期

3 賈勇;關(guān)玉成;范相成;梁景灝;趙晨光;馮毅;汪偉基;;保留黃韌帶椎板切除術(shù)預(yù)防硬膜粘連的臨床分析[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年19期

4 韓婷,宓鶴鳴;姜黃的化學(xué)成分及藥理活性研究進展[J];解放軍藥學(xué)學(xué)報;2001年02期

5 陳文娟,陳燕;姜黃素對惡性腫瘤細胞的調(diào)控[J];臨床血液學(xué)雜志;1999年05期

6 胡曉龍;胡大海;韓勇彬;蔡維霞;白曉智;楊崇志;計鵬;;姜黃素對瘢痕疙瘩成纖維細胞膠原合成的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2008年46期

7 劉立岷;宋躍明;段宏;丁永利;盧冰;;Effect of polylactic acid glue in preventing epidural scar adhesion after laminectomy in rabbits[J];Chinese Journal of Traumatology;2006年03期

8 徐泉;周衛(wèi);孔煥宇;李莉;章永東;張兆杰;劉燦;王榮國;;三七透明質(zhì)酸鈉凝膠對家兔椎板切除術(shù)后硬膜外瘢痕中膠原成分的影響[J];中國骨傷;2010年04期

9 周剛;牛建昭;王繼峰;陳偉濤;劉同祥;李銀生;李澤華;;姜黃素抗肺纖維化大鼠自由基損傷作用的實驗研究[J];中國中藥雜志;2006年08期

10 邱貴興,孫世荃;同種異體骨植入材料的臨床應(yīng)用[J];中華骨科雜志;2004年10期

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本文編號：1755584