本文選題：羧酸酯酶 + BODIPY母核�。� 參考：《藥學學報》2017年01期

【摘要】：羧酸酯酶1(carboxylesterase 1,CE1)是哺乳動物體內(nèi)分布的一種重要的絲氨酸水解酶,廣泛參與多種內(nèi)外源性酯類化合物(包括膽固醇酯等內(nèi)源物,以及酯類藥物及殺蟲劑等外源物)的水解代謝。本研究基于人羧酸酯酶1(hCE1)偏好底物的結(jié)構(gòu)特征,選取8-羧酸-BODIPY為熒光母核,設(shè)計合成了4種BODIPY-8-羧酸酯衍生物,進而通過單酶篩選和酶抑制實驗考察了hCE1催化4種酯類底物的特異性。研究發(fā)現(xiàn),BODIPY-8-羧酸酯的醇基部分越小,hCE1對底物的選擇性越高,BODIPY-8-羧酸甲酯(BCM)和BODIPY-8-羧酸乙酯(BCE)均可以作為hCE1的特異性熒光探針底物。在此基礎(chǔ)上,選擇了水解速率更快的BCM為hCE1探針底物,進一步考察了BCM在人肝微粒體(HLM)和hCE1單酶中的水解動力學,并借助該底物開展了hCE1抑制劑的高效表征研究。研究發(fā)現(xiàn)BCM在HLM和hCE1中的酶動力學行為及K_m值非常接近,表明hCE1是HLM中參與BCM水解的主要代謝酶。此外,抑制劑表征實驗表明BCM可用于hCE1抑制劑的高效篩選與評價,且可用HLM代替hCE1單酶進行酶抑制劑的篩選與評價。
[Abstract]:Carboxylesterase (1(carboxylesterase 1) is an important serine hydrolase distributed in mammals. It is widely involved in the hydrolysis and metabolism of many endogenous esters, including cholesterol esters, esters and pesticides.Based on the structure characteristics of human carboxylesterase 1hCE1, four kinds of BODIPY-8carboxylate derivatives were designed and synthesized by selecting 8-carboxylic acid -BODIPY as fluorescent parent nucleus.The specificity of four esters catalyzed by hCE1 was investigated by single enzyme screening and enzyme inhibition experiments.It is found that the smaller the alcohol base portion of BODIPY-8carboxylate is, the higher the selectivity of BCM-BODIPY-8-carboxylate methyl ester (BCM-1) and the carboxylate ethyl ester BODIPY-8-carboxylate (hCE1) can be used as the specific fluorescent probe substrates of hCE1.It was found that the kinetic behavior of BCM in HLM and hCE1 was very close to K _ S _ m, indicating that hCE1 was the main metabolic enzyme involved in BCM hydrolysis in HLM.In addition, BCM can be used in the screening and evaluation of hCE1 inhibitors, and HLM can be used to screen and evaluate enzyme inhibitors instead of hCE1.
【作者單位】： 大連理工大學精細化工國家重點實驗室;中國科學院大連化學物理研究所;大連醫(yī)科大學;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81302793,81473181,21572029) 精細化工國家重點實驗室資助項目(KF1504;KF1408)
【分類號】：R963

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