HIF-1α、ROCK-2、FoxM1在醋酸鉛誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷中的表達(dá)變化
本文選題:醋酸鉛 切入點(diǎn):PC細(xì)胞 出處:《中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)》2015年11期
【摘要】:目的探討低氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、Rho關(guān)聯(lián)卷曲螺旋蛋白激酶-2(Rho associated coiled coil forming protein kinase-2,ROCK-2)、叉頭蛋白M1(forkhead box protein M1,Fox M1)在醋酸鉛[Pb(Ac)_2]誘導(dǎo)大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞損傷中的表達(dá)和意義。方法將PC12細(xì)胞暴露于不同濃度的Pb(Ac)_2(100、200、400μmol·L~(-1))24 h以誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生損傷。采用噻唑藍(lán)比色法檢測(cè)細(xì)胞的存活率,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)的變化,乳酸脫氫酶漏出率檢測(cè)法測(cè)定細(xì)胞損傷程度,采用試劑盒檢測(cè)丙二醛(malondialdehvde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平,Hoechst 33342單熒光染色法觀察細(xì)胞凋亡,免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞HIF-1α、ROCK-2、Fox M1、淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia,Bcl-2)和Bcl-2相關(guān)蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表達(dá)。結(jié)果 MTT實(shí)驗(yàn)顯示Pb(Ac)_2對(duì)PC12細(xì)胞具有明顯抑制作用并呈劑量依賴性,與對(duì)照組相比,Pb(Ac)_2可增加細(xì)胞內(nèi)LDH漏出率,升高M(jìn)DA含量,降低SOD含量,誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡。此外,Pb(Ac)_2上調(diào)細(xì)胞HIF-1α、ROCK-2的表達(dá),下調(diào)Fox M1的表達(dá),提高Bax/Bcl-2的表達(dá)比例。結(jié)論 Pb(Ac)_2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞發(fā)生凋亡可能與HIF-1α、ROCK-2、FoxM 1的表達(dá)以及自由基損傷有關(guān)。
[Abstract]:Methods PC12 cells were exposed to different concentrations of Pb(Ac)_2(100200400 渭 mol L ~ (-1) for 24 h to induce cell damage.The survival rate of cells was measured by thiazolyl blue colorimetry, the morphological changes of cells were observed by inverted microscope, and the damage degree of cells was measured by lactate dehydrogenase leakage rate assay.In addition, PbAK can up-regulate the expression of HIF-1 偽 -roCK-2, down-regulate the expression of Fox M1, and increase the expression of Bax/Bcl-2.Conclusion the apoptosis of PC12 cells induced by Pb(Ac)_2 may be related to the expression of HIF-1 偽 -ROCK-2 and the damage of free radical.
【作者單位】: 江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No 81300059) 江蘇大學(xué)高級(jí)人才基金項(xiàng)目(No 08JDG005,11JDG092)
【分類號(hào)】:R96
【參考文獻(xiàn)】
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