本文選題：E.coli　切入點：SOS應(yīng)答　出處：《中國科學(xué):生命科學(xué)》2015年05期

【摘要】：通過敲除SOS應(yīng)答啟動蛋白基因rec A,探討SOS應(yīng)答對E.coli恩諾沙星抗藥性的影響,并體外評價Rec A抑制劑和恩諾沙星聯(lián)用對細(xì)菌協(xié)同抑制作用的影響.利用Red重組系統(tǒng),構(gòu)建E.coli ATCC 25922的rec A缺失菌株E.coli ATCC 25922/?rec A;在恩諾沙星壓力下,利用熒光定量PCR測定SOS應(yīng)答系統(tǒng)相關(guān)基因rec A和umu C表達量的變化.用微量肉湯稀釋法測定恩諾沙星等常用抗生素對兩個菌株的MIC變化;利用梯度平板法測定恩諾沙星對兩個菌株抗藥性變異的影響;合成Rec A抑制劑,并評估其與恩諾沙星聯(lián)合抑制E.coli生長及其抗藥性的作用.結(jié)果表明,E.coli ATCC 25922/?rec A菌株對恩諾沙星的最低抑菌濃度值降低至原始菌株的1/8;經(jīng)藥物處理后,在梯度平板上,rec A缺失菌株較野生型不易產(chǎn)生抗藥性;熒光定量PCR表明,rec A缺失菌株或在Rec A抑制劑作用下,SOS應(yīng)答系統(tǒng)受到一定的抑制.敲除rec A,使菌株對恩諾沙星的抗藥性和抗藥率均明顯降低;Rec A抑制劑在一定程度上能抑制SOS應(yīng)答,起到協(xié)同抑菌作用.
[Abstract]:By knockout the SOS response promoter gene rec A, the effect of SOS response on E.coli enrofloxacin resistance was investigated, and the effect of Rec A inhibitor and enrofloxacin combined with enrofloxacin on bacterial co-inhibition was evaluated in vitro. Red recombinant system was used. To construct E.coli ATCC 25922% of the rec A deletion strain of E.coli ATCC 25922? Under the pressure of enrofloxacin, the expression changes of rec A and umu C genes related to SOS response system were detected by fluorescence quantitative PCR. The MIC changes of enrofloxacin and other commonly used antibiotics to two strains were determined by broth dilution method. The effect of enrofloxacin on the variation of drug resistance of two strains was determined by gradient plate method. Rec A inhibitor was synthesized, and the inhibitory effect of enrofloxacin combined with enrofloxacin on the growth and drug resistance of E.coli was evaluated. The results showed that E.coli ATCC 25922%? The minimum inhibitory concentration of rec A to enrofloxacin decreased to 1 / 8 of the original strain. Fluorescence quantitative PCR showed that the Rec A deficient strain or the Rec A inhibitor inhibited the response system to a certain extent. Knockout of rec A significantly reduced the resistance to enrofloxacin and the resistance rate of the strain to enrofloxacin in a certain process. Can inhibit the SOS response, Play a synergistic bacteriostatic effect.
【作者單位】： 山東大學(xué)農(nóng)學(xué)院;山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所;山東省科學(xué)院新材料研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號:81271886) 山東省科技攻關(guān)計劃(批準(zhǔn)號:2012GGC02012) 山東省自然科學(xué)基金青年基金(批準(zhǔn)號:ZR2013CQ037) 國家科技重大專項(批準(zhǔn)號:2013ZX10004217-003) 山東省農(nóng)業(yè)重大應(yīng)用技術(shù)創(chuàng)新課題資助
【分類號】：R96

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本文編號：1664641