在ox-LDL致內(nèi)皮細胞損傷中HSP22的保護作用及他汀的干預(yù)作用
發(fā)布時間:2018-03-09 23:07
本文選題:HSP22 切入點:HUVECs 出處:《南昌大學(xué)》2014年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的: 研究熱休克蛋白22(HSP22)在ox-LDL致人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)損傷中的作用及他汀的干預(yù)作用,并探討其機制。 方法: 實驗分為三組:正常對照組、空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染對照組(con組)、shRNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組(shRNA組), con組在HUVECs中加入Lipo與空質(zhì)粒(pGcsi-U6/Neo/GFp/shRNA),shRNA組在HUVECs中加入Lipo及shRNA質(zhì)粒(pGcsi-U6/Neo/GFp/shRNA/HSP22)。成功轉(zhuǎn)染后,各組分四個亞組:對照組、ox-LDL組、他汀組、他汀+ox-LDL組。采用MTT、Westernblot篩選合適的ox-LDL及阿托伐他汀干預(yù)濃度與時間。觀察ox-LDL誘導(dǎo)環(huán)境下HSP22的表達情況,ELISA檢測TNF-α表達情況,Western blot檢測eNOS、p38MAPK、erk、p-erk表達情況。 結(jié)果: 1、ox-LDL及阿托伐他汀合適的干預(yù)時間與濃度: (1)選定160μg/mlox-LDL干預(yù)48h時,HSP22表達最高(P0.01),并對內(nèi)皮細胞有明顯抑制作用(P0.05)。 (2)選定40μg/ml阿托伐他汀干預(yù)48h時,HSP22表達最低(P0.01),且對內(nèi)皮細胞有明顯促進作用(P0.05)。 2、HSP22蛋白的表達:在相同干預(yù)條件下,,shRNA組HSP22蛋白表達明顯低于正常對照組與con組(P0.01)。在各大組中,ox-LDL組HSP22表達均明顯高于對照組及ox-LDL+他汀組(P0.01)。 3、p38MAPK的表達:在相同干預(yù)條件下,shRNA組p38MAPK表達明顯高于正常對照組與con組(P0.01)。在各大組中,ox-LDL組p38MAPK表達均高于對照組及ox-LDL+他汀組(P0.01)。 4、erk、p-erk的表達:在相同干預(yù)條件下,shRNA組erk、p-erk表達均低于正常對照組與con組(P0.01)。在各大組中,ox-LDL組erk、p-erk表達均高于對照組及ox-LDL+他汀組(P0.01)。 5、TNF-α的表達:在相同干預(yù)條件下,shRNA組TNF-α表達顯著高于正常對照組與con組(P0.01)。在各大組中,ox-LDL組TNF-α表達均明顯高于對照組及ox-LDL+他汀組(P0.01)。 6、eNOS的表達:在相同干預(yù)條件下,shRNA組eNOS表達明顯低于正常對照組與con組(P0.01)。在各大組中,ox-LDL組eNOS表達均顯著低于對照組及ox-LDL+他汀組(P0.01)。 結(jié)論: 1、ox-LDL損傷HUVECs可誘導(dǎo)HSP22表達。 2、在ox-LDL誘導(dǎo)環(huán)境下HSP22的保護作用可能與下調(diào)p38MAPK、上調(diào)erk抗凋亡有關(guān),與TNF-α抗炎有關(guān),與eNOS改善內(nèi)皮功能有關(guān)。 3、在ox-LDL誘導(dǎo)環(huán)境下他汀的保護作用可能與下調(diào)p38MAPK、erk、TNF-α抗炎有關(guān),與eNOS改善內(nèi)皮功能有關(guān)。 4、他汀的保護作用可能與HSP22無關(guān)。
[Abstract]:Objective:
To investigate the role of heat shock protein 22 (HSP22) in the injury of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) induced by ox-LDL and the intervention of statins, and to explore its mechanism.
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本文編號:1590669
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