本文選題：吡唑　切入點(diǎn)：BRAF~(V600E)　出處：《南京大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：吡唑環(huán)是一類非常重要的含氮雜環(huán),吡唑類雜環(huán)衍生物具有廣泛的生物活性。在醫(yī)藥領(lǐng)域,吡唑類衍生物對(duì)許多疾病具有治療作用,研究表明吡唑類化合物具有抗癌、殺菌、抑菌、消炎、止痛等藥理活性。在農(nóng)藥領(lǐng)域,吡唑類化合物具有殺菌、殺蟲和除草活性。MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路是生物體內(nèi)重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之一,在真核生物細(xì)胞的生長,增值,存活和分化過程中發(fā)揮著重要的作用。細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的過度激活與腫瘤的發(fā)生有關(guān)。RAF激酶在MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路起著重要的作用。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中RAF家族包括ARAF, BRAF和CRAF三個(gè)成員。大約8%的人類腫瘤發(fā)生BRAF突變,BRAF絕大多數(shù)的突變形式為BRAFV600E突變,主要發(fā)生于黑色素瘤、甲狀腺癌和結(jié)腸癌中。因此,BRApV600E成為了當(dāng)今抗腫瘤藥物研發(fā)的熱門靶標(biāo)。BRAFV600E抑制劑的基本結(jié)構(gòu)包含一個(gè)氫鍵供體,通常是吡唑,吡啶或咪唑的雜環(huán)和取代的芳族基團(tuán)與疏水口袋相互作用。為了獲得一個(gè)更好的具有氫鍵和疏水作用的合適長度基團(tuán),我們合成了一系列(1,3-二苯基-1H-吡唑-4-基)甲基苯甲酸酯衍生物。體外測試目標(biāo)化合物對(duì)A375和WM266.4的抗增殖活性,實(shí)驗(yàn)表明,大部分化合物低毒并具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性,其中化合物10a活性最強(qiáng),其對(duì)A375和WM266.4的IC50分別為IC50=1.36μM,0.94μM(陽性對(duì)照vemurafenib對(duì)A375和WM266.4的IC50分別為0.20μM和0.06μM)。體外測試化合物的BRAFV600E抑制活性,化合物10a的BRAFV600E抑制活性依然最好。為進(jìn)一步探討目標(biāo)化合物可能作用機(jī)制,進(jìn)行了計(jì)算機(jī)模擬對(duì)接研究,研究表明化合物10a緊緊的嵌入到蛋白的活性結(jié)合口袋。這說明化合物10a可能是很好有研究前景的以BRAFV600E為靶點(diǎn)的抗癌先導(dǎo)化合物。為了進(jìn)一步確定所得衍生物的結(jié)構(gòu),我們培養(yǎng)出其中產(chǎn)物9c的單晶,用單晶X射線衍射技術(shù)測定了它的晶體結(jié)構(gòu)。極光激酶是一類高度保守的絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶,在細(xì)胞有絲分裂過程中有著重要的作用。在哺乳動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)有三種極光激酶：極光激酶A,極光激酶B和極光激酶C。極光激酶A在細(xì)胞中的異常表達(dá)會(huì)導(dǎo)致中心體擴(kuò)增,干擾極光激酶A的功能會(huì)引起中心體功能缺陷,星體微管長度縮短,不能形成紡錘體,進(jìn)而影響有絲分裂。研究證實(shí),Aurora A在大多數(shù)惡性腫瘤中均高表達(dá),如乳腺癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和甲狀腺癌等。因此,有針對(duì)性地抑制極光激酶A已經(jīng)成為癌癥治療的一個(gè)具有吸引力的治療發(fā)展策略,已有超過10個(gè)極光激酶抑制劑進(jìn)入早期臨床評(píng)估。研究發(fā)現(xiàn)的激光激酶抑制劑的主要活性骨架分為四個(gè)部分A-D即(A)含有1,4,5,6.四氫吡咯并[3,4-c]吡唑核心：(B)含有吡咯并[2,3-b]嘧啶核心： (c)含有喹啉的核心和(D)含有的2=苯胺基-二氨基嘧啶核心。基于上述我們合成了一系列二芳基吡唑苯甲酰胺類衍生物,并對(duì)其進(jìn)行了生物活性性評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)表明,人部分化合物具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性,其中化合物10e活性最強(qiáng),其對(duì)HCT116和MCF.7的IC50分別為0.39±0.06μM和0.46±0.04μM,(陽性對(duì)照VX-680對(duì)HCT116和MCF-7的IC50分別為0.30±0.03μM和0.38±0.02μM)。體外抗Aurora-A試驗(yàn)表明10e具有最強(qiáng)的蛋白激酶抑制活性(IC50=0.16±0.03 μM)。計(jì)算機(jī)模擬對(duì)接研究表明化合物10e緊緊的嵌入到蛋白的活性結(jié)合u袋。Weston blot實(shí)驗(yàn)表明10e對(duì)HCT116具有良好的腫瘤抑制活性。由此推測,化合物10e可能是一類具有較好研究前景的以Aurora A為抗腫瘤靶點(diǎn)的先導(dǎo)化合物
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R914.5

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本文編號(hào)：1573251