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在東方擬無枝酸菌中建立I-SceI內(nèi)切酶介導(dǎo)的無標(biāo)記敲除系統(tǒng)

發(fā)布時(shí)間:2018-03-04 12:51

  本文選題:I-SceI內(nèi)切酶 切入點(diǎn):東方擬無枝酸菌 出處:《中國抗生素雜志》2015年05期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的在東方擬無枝酸菌中建立由I-Sce I介導(dǎo)的無標(biāo)記高效重組系統(tǒng)。方法首先構(gòu)建可用于東方擬無枝酸菌的I-Sce I操作盒,通過敲除多烯類化合物ECO-0501合成相關(guān)基因hem A2,比較操作盒使用前后獲得hem A2基因雙交換突變株的效率。結(jié)果在沒有引入I-Sce I的情況下,隨機(jī)重組的發(fā)生幾率僅約2%,而導(dǎo)入后,由于I-Sce I酶對(duì)引入DNA位點(diǎn)的雙鏈切割,導(dǎo)致雙交換重組的發(fā)生率提高至90%以上。結(jié)論 I-Sce I系統(tǒng)是一種可用于東方擬無枝酸菌無標(biāo)記遺傳操作的有效工具。
[Abstract]:Objective to establish a highly efficient and unlabeled recombinant system mediated by I-Sce I in Dendrolimus orientalis. Methods the I-Sce I operating box was constructed. By knockout the polyene compound ECO-0501 synthesis related gene hem A2, the efficiency of the double exchange mutant of hem A2 gene was compared before and after the operation box was used. Results without the introduction of I-Sce I, the probability of random recombination was only about 2%, but after the introduction, Due to the double strand cleavage of I-Sce I enzyme introducing DNA site, the rate of double exchange recombination increased to more than 90%. Conclusion I-Sce I system is an effective tool for unlabeled genetic manipulation of dendritic bacteria in the East.
【作者單位】: 上海交通大學(xué)藥學(xué)院;上海來益生物藥物研究開發(fā)中心有限責(zé)任公司;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.81202440)
【分類號(hào)】:R914.5

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

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3 盧志國;汪建峰;蒙海林;熊智強(qiáng);王勇;;合成生物學(xué)與天然產(chǎn)物開發(fā)[J];生命科學(xué);2011年09期

4 谷燕燕;耿偉濤;宋存江;;鏈霉菌無痕敲除方法研究進(jìn)展[J];生物工程學(xué)報(bào);2013年08期

5 顧陽;楊晟;姜衛(wèi)紅;;產(chǎn)溶劑梭菌分子遺傳操作技術(shù)研究進(jìn)展[J];生物工程學(xué)報(bào);2013年08期

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1 申洋;參與ECO-0501生物合成的基因orf4,,orf27功能的研究及產(chǎn)去甲ECO-0501工程菌的構(gòu)建[D];華東理工大學(xué);2012年

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2 李霞;黃色粘球菌DK1622基因組島的必需性分析及其在細(xì)胞群體行為中的作用研究[D];山東大學(xué);2012年

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4 張雪玉;枯草芽孢桿菌基因組最小化的初步研究[D];天津大學(xué);2013年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 張桂敏,周秀芬,鄧子新,莊永紅;將透明顫菌血紅蛋白基因(vgb)轉(zhuǎn)移到鏈霉菌染色體整合載體的構(gòu)建[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年06期



本文編號(hào):1565730

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