發(fā)布時間：2018-01-13 03:00

  本文關鍵詞：葉柄粘球菌STXZ77的分離鑒定及抗腫瘤活性　出處：《中國生物工程雜志》2016年11期 　論文類型：期刊論文

  更多相關文章： 粘細菌 STXZ 篩選 純化 抗腫瘤

【摘要】：目的:從土樣中分離純化粘細菌,對其進行鑒定與歸類,以豐富粘細菌菌種資源,并對其進行抗腫瘤活性初步研究,為抗腫瘤藥物開發(fā)奠定基礎。方法:采用滅活大腸桿菌誘導法,從土樣中分離純化粘細菌,結合形態(tài)觀察、生理生化特征及16S rRNA基因序列同源性分析進行菌株鑒定;向發(fā)酵液上清中加入XAD-16大孔吸附樹脂提取發(fā)酵產(chǎn)物粗提物,CCK-8法進行體外抗腫瘤活性研究;RP-HPLC分離抗腫瘤活性組分,LC-MS/MS分析其分子質(zhì)量。結果:分離并鑒定了STXZ77菌株,命名為Myxococcus stipitatus STXZ77。該菌株的發(fā)酵產(chǎn)物XAD-16樹脂粗提物對小鼠黑色素瘤細胞B16、小鼠乳腺癌細胞4T1、人肝癌細胞SMMC-7721、人宮頸癌細胞He La、人結腸癌細胞SW480等多種腫瘤細胞具有較好的細胞毒性,作用24h的IC_(50)值分別為5.34μg/ml、13.50μg/ml、11.93μg/ml、28.70μg/ml、48.09μg/ml,而對正常細胞人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞HUVEC的毒性較小,IC_(50)值為17.09μg/ml,小于B16、4T1及SMMC-7721的細胞毒性。RP-HPLC分離得到抗腫瘤活性組分AP-C,質(zhì)譜分析其分子質(zhì)量為422.99m/z。結論:從土樣中分離得到粘細菌Myxococcus stipitatus STXZ77,從該菌中分離得到抗腫瘤活性組分AP-C,具有開發(fā)成抗腫瘤藥物的潛在價值。
[Abstract]:Objective: to isolate and purify myxobacteria from soil samples, identify and classify myxobacteria in order to enrich the resources of myxobacteria and study their antitumor activity. Methods: inactivated Escherichia coli induction method was used to isolate and purify myxobacteria from soil samples and observe their morphology. Physiological and biochemical characteristics and homology analysis of 16s rRNA gene sequence were used to identify the strain. In vitro antitumor activity was studied by adding XAD-16 macroporous adsorption resin to the supernatant of fermentation broth to extract the crude extract of fermentation product (CCK-8). RP-HPLC was used to isolate the antitumor active component LC-MS / MS to analyze its molecular weight. Results: STXZ77 strains were isolated and identified. The strain was named Myxococcus stipitatus STXZ77.The fermentation product of this strain, XAD-16 resin crude extract, was applied to murine melanoma cell B16. Many kinds of tumor cells, such as mouse breast cancer cell 4T 1, human liver cancer cell SMMC-7721, human cervical cancer cell he Laand human colon cancer cell SW480, have good cytotoxicity. The ICP 50 values of the cells exposed for 24 hours were 5.34 渭 g / ml, 13.50 渭 g / ml, 11.93 渭 g / ml, 28.70 渭 g / ml, respectively. 48.09 渭 g / ml, and the toxicity of HUVEC to human umbilical vein endothelial cells was 17.09 渭 g / ml, less than B16. 4Cytotoxicity of T1 and SMMC-7721. RP-HPLC was used to isolate anti-tumor active component AP-C. The molecular weight of the product was 422.99m / z. Conclusion: Myxococcus stipitatus STXZ77 was isolated from soil samples. The antitumor active component AP-C was isolated from the strain, which has the potential value of developing antitumor drugs.
【作者單位】： 湖南師范大學生命科學學院微生物分子生物學國家重點實驗室培育基地;
【基金】：國家“973”計劃(2012CB722301) 國家“863”計劃(2011AA10A203) 湖南省生物發(fā)育工程及新產(chǎn)品研發(fā)協(xié)同創(chuàng)新中心項目(20134486)資助項目
【分類號】：R96;R914
【正文快照】： *國家“973”計劃(2012CB722301),國家“863”計劃(2011AA10A203),湖南省生物發(fā)育工程及新產(chǎn)品研發(fā)協(xié)同創(chuàng)新中心項目(20134486)資助項目粘細菌(Myxobacteria)是一類桿狀、可滑行、具有復雜多細胞行為的革蘭氏陰性菌,能夠形成多細胞的子實體和抗逆性的粘孢子。粘細菌屬于變形桿

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本文編號：1417135