本文關(guān)鍵詞：新型凝膠純化凝血酶原復(fù)合物的工藝探討

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【摘要】：目的探索新型凝膠Capto DEAE離子交換柱層析純化凝血酶原復(fù)合物的工藝條件。方法健康人混血漿經(jīng)離心去除冷沉淀后,采用DEAE-Sephadex A-50凝膠進(jìn)行吸附,經(jīng)洗滌、洗脫得到洗脫液;將得到的洗脫液超濾脫鹽后,再通過Capto DEAE凝膠柱純化,制備凝血酶原復(fù)合物(prothrombin complex concentrates,PCC)。測(cè)定PCC中凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ及抗凝蛋白C的活性并計(jì)算收率;采用Bradford法測(cè)定PCC蛋白濃度,再根據(jù)測(cè)定的4種凝血因子和蛋白C的活性,計(jì)算有效成分的比活;以此分析所選工藝條件下Capto凝膠對(duì)PCC的純化效果。結(jié)果不同實(shí)驗(yàn)方案下,所得制品中FⅡ、FⅨ、FⅩ收率和純度均較高,且該3種凝血因子均衡度較好;但FⅦ收率和純度均較低;其中A方案下PCC收率和純度較好,即Capto DEAE凝膠體系平衡液、洗滌液、洗脫液中檸檬酸鈉、Na Cl、p H分別為0.020~0.028 mol/L、0.10~0.15 mol/L、6.9~7.2;0.012~0.020 mol/L、0.10~0.15 mol/L、6.9~7.2;0.005~0.012 mol/L、2.4 mol/L、7.2~7.5時(shí),FⅨ收率為(74.40±10.89)%,比活為(3.31±0.31)IU/mg,抗凝蛋白C的收率和比活均較高。結(jié)論采用DEAE-Sephadex A-50批式吸附及Capto DEAE柱層析相結(jié)合的新方法制備PCC,在所選擇條件下,PCC制品的純度為2.17~3.31 IU/mg,遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)工藝制得的產(chǎn)品,此為高品質(zhì)PCC的制備提供了新的方法。
【作者單位】： 四川大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院;中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院輸血研究所;
【基金】：四川省科技支撐計(jì)劃(2014SZ0123)
【分類號(hào)】：R943
【正文快照】： (1.College of Chemical Engineering,Sichuan University,Chengdu 610065,China;2.Institute of Blood Transfusion,Chinese Academy of Medical Science,Chengdu 610052,China)人凝血酶原復(fù)合物(prothrombin complex concentrates,PCC)是從健康人混合血漿分離制備的血液制品

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1 熊瑩;趙紅衛(wèi);徐琦;何琦;方為茂;;大孔陰離子交換樹脂從血漿中分離凝血酶原復(fù)合物[J];中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志;2009年05期

2 ;[J];;年期

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本文編號(hào)：1307692