本文關(guān)鍵詞：1-苯基-2-硫脲抑制flk1型斑馬魚黑色素生成的最佳濃度

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【摘要】：【目的】探討1-苯基-2-硫脲(PTU)對(duì)抑制血管熒光轉(zhuǎn)基因型flk1斑馬魚黑色素生成的能力,探索在不影響斑馬魚正常生長發(fā)育條件下,能保持斑馬魚透明性的最佳濃度�！痉椒ā坑�0.0125~1.0 mmol/L濃度區(qū)間的PTU與24 hpf(hours post fertilization)斑馬魚胚胎共同孵育,觀測(cè)PTU抑制黑色素生成情況,通過觀察斑馬魚形態(tài)學(xué)變化、記錄80 hpf后的孵化率和死亡率、測(cè)量心率和靜脈竇-動(dòng)脈球間距等生理學(xué)變化,評(píng)價(jià)PTU處理對(duì)斑馬魚生長發(fā)育的影響。【結(jié)果】隨著PTU濃度的增加,黑色素抑制能力增強(qiáng),毒性逐漸增加,表現(xiàn)為斑馬魚死亡率增加、孵化率下降、心率下降、靜脈竇-動(dòng)脈球之間的距離增大。濃度為0.0125-0.025 mmol/L的PTU對(duì)斑馬魚活性基本無影響,濃度≥0.05 mmol/L的PTU能完全抑制黑色素的生成。當(dāng)PTU濃度為0.025 mmol/L時(shí),生成的黑色素不影響斑馬魚血管觀察,當(dāng)PTU濃度為0.05 mmol/L時(shí),斑馬魚的心率和靜脈竇-動(dòng)脈球間距基本不受影響。【結(jié)論】對(duì)于72 hpf前的flk1型斑馬魚實(shí)驗(yàn),應(yīng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)要求,在濃度≤0.05 mmol/L范圍內(nèi)選擇適當(dāng)?shù)腜TU濃度,使黑色素的生成既不影響實(shí)驗(yàn)觀察和信號(hào)檢測(cè),同時(shí)對(duì)生長發(fā)育的影響減至最小。
【作者單位】： 中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院衛(wèi)生部輔助循環(huán)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81371665;81571015) 廣東省科技計(jì)劃國際合作項(xiàng)目(2013B051000017)
【分類號(hào)】：R965
【正文快照】： 斑馬魚是一種高度發(fā)達(dá)的脊椎模式生物,與人類在發(fā)育過程、器官構(gòu)造、疾病生理和基因序列等方面高度相似,因此被廣泛用于現(xiàn)代遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、藥物研發(fā)/篩選和人類疾病模型等研究領(lǐng)域[1-3]。斑馬魚用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的主要優(yōu)勢(shì)為:體積小、飼養(yǎng)成本低、生殖周期短、繁殖

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1 常嘉;陸亮;王慶利;常艷;馬t，

本文編號(hào)：1236665