本文關(guān)鍵詞：二甲雙胍對LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞趨化因子表達(dá)的調(diào)節(jié)及其機(jī)制的探討

  更多相關(guān)文章： 二甲雙胍 AMPK NF-κB 巨噬細(xì)胞 趨化因子

【摘要】：背景與目的:炎癥反應(yīng)參與多種疾病的發(fā)生發(fā)展,包括自身免疫性疾病、糖尿病、心血管疾病、腫瘤等。免疫細(xì)胞的招募和活化在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用,巨噬細(xì)胞作為抵御外界刺激的第一道防線,是機(jī)體固有免疫的重要組成細(xì)胞。巨噬細(xì)胞激活后分泌大量趨化因子,趨化因子表達(dá)和功能異常與自身免疫性疾病、感染性疾病、糖尿病和腫瘤等炎癥相關(guān)疾病密切相關(guān)。其中CC類和CXC類趨化因子是最主要的趨化因子家族,在調(diào)節(jié)炎癥細(xì)胞和免疫細(xì)胞趨化遷移中發(fā)揮關(guān)鍵作用。大量研究表明臨床上治療糖尿病的常用藥AMPK激活劑二甲雙胍,具有明顯的不依賴于降糖作用的抗炎效應(yīng),并且活化AMPK可以抑制NF-κB信號通路從而下調(diào)TNF-α等炎癥因子。但是,迄今為止,AMPK是否影響趨化因子及其機(jī)制未見報道。本研究旨在觀察AMPK激活劑二甲雙胍對LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞趨化因子CCL2、CXCL10、CXCL11表達(dá)水平的影響及其機(jī)制。方法:1、分別觀察LPS和二甲雙胍對趨化因子表達(dá)的影響。不同濃度LPS處理巨噬細(xì)胞不同時間后,利用蛋白免疫印跡法檢測細(xì)胞內(nèi)CXCL10、CXCL11的表達(dá)水平和AMPK磷酸化程度;二甲雙胍處理細(xì)胞不同時間后,采用q RT-PCR檢測CCL2、CXCL10、CXCL11 m RNA的表達(dá)水平,從而確定藥物劑量和處理時間。2、觀察AMPK激活劑二甲雙胍對LPS誘導(dǎo)的趨化因子m RNA水平的影響。實(shí)驗(yàn)分組:空白對照組、二甲雙胍組、LPS組、LPS+二甲雙胍組。RAW264.7巨噬細(xì)胞匯合度達(dá)到70%后,換成正常培養(yǎng)液或含有相應(yīng)藥物的培養(yǎng)液,處理相應(yīng)時間后采用q RT-PCR檢測CCL2、CXCL10、CXCL11m RNA表達(dá)情況。3、觀察AMPK抑制劑Compound C與二甲雙胍共孵育對LPS誘導(dǎo)的趨化因子m RNA水平的影響,實(shí)驗(yàn)分組:空白對照組、二甲雙胍組、LPS組、LPS+二甲雙胍組、LPS+二甲雙胍+Compound C組。RAW264.7巨噬細(xì)胞匯合度達(dá)到70%后,換成正常培養(yǎng)液或含有相應(yīng)藥物的培養(yǎng)液培養(yǎng),處理相應(yīng)時間后采用q RT-PCR檢測CCL2、CXCL10、CXCL11m RNA表達(dá)水平。4、觀察Compound C與AMPK激活劑AICAR共孵育對LPS誘導(dǎo)的趨化因子m RNA水平的影響,實(shí)驗(yàn)分組:空白對照組、AICAR組、LPS組、LPS+AICAR組、LPS+AICAR+Compound C組。RAW264.7巨噬細(xì)胞匯合度達(dá)到70%后,換成正常培養(yǎng)液或含有相應(yīng)藥物的培養(yǎng)液培養(yǎng),處理相應(yīng)時間后采用q RT-PCR檢測CCL2、CXCL10、CXCL11 m RNA表達(dá)量。5、觀察二甲雙胍對AMPK、NF-κB信號分子的影響。采用免疫蛋白印跡檢測細(xì)胞內(nèi)AMPK和ACC的磷酸化程度及NF-κB p65和IκB磷酸化水平。結(jié)果:1、LPS呈劑量和時間依賴性地誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞表達(dá)CXCL10、CXCL11。2、二甲雙胍呈時間依賴性地下調(diào)RAW264.7細(xì)胞CCL2、CXCL10、CXCL11m RNA表達(dá)水平。3、二甲雙胍能夠抑制LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞CCL2、CXCL10、CXCL11m RNA表達(dá)水平,并且AMPK抑制劑Compound C能夠逆轉(zhuǎn)二甲雙胍的作用。4、AICAR抑制LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞CCL2、CXCL10、CXCL11 m RNA表達(dá)水平,但是,AMPK抑制劑Compound C不能逆轉(zhuǎn)AICAR的作用。5、二甲雙胍明顯激活A(yù)MPK并抑制LPS誘導(dǎo)的IκB和p65(Ser536)磷酸化,但不影響p65(Ser276)磷酸化。結(jié)論:二甲雙胍抑制LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞表達(dá)趨化因子CCL2、CXCL10和CXCL11,此效應(yīng)很可能通過干預(yù)AMPK/NF-κB信號通路實(shí)現(xiàn)。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R96

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 成杰;蔡明江;賈永莉;尹照華;;二甲雙胍的應(yīng)用現(xiàn)狀調(diào)查[J];實(shí)用糖尿病雜志;2005年06期

2 潘明政;;二甲雙胍傷腎嗎[J];醫(yī)藥與保健;2008年11期

3 衡先培;;二甲雙胍的臨床應(yīng)用[J];中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥;2006年02期

4 H.Mehnert,邵丙揚(yáng);二甲雙胍在糖尿病治療中的地位[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;1999年02期

5 王煜;;二甲雙胍的臨床應(yīng)用療效評析[J];藥品評價;2012年10期

6 伍曉玲,梁常禧,羅碧云;諾和靈與甲雙胍強(qiáng)化治療2型糖尿病22例效果觀察及護(hù)理[J];右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2002年04期

7 陳凌;二甲雙胍的臨床應(yīng)用體會[J];山東醫(yī)藥;1994年06期

8 趙紅玲;張雪坤;;二甲雙胍的降糖外作用研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐;2011年16期

9 ;古老的藥物 嶄新的應(yīng)用[J];科技傳播;2011年17期

10 鄭媛媛;;甲雙胍通過改變微生物葉酸和甲硫氨酸的代謝延緩秀麗隱桿線蟲的衰老[J];中國病理生理雜志;2013年10期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 侯沃霖;張丹丹;劉芳;陸蔚;殷峻;李鳴;盧逢娣;包玉倩;賈偉平;;二甲雙胍可降低女性2型糖尿病患者的血清CA125水平[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

2 朱云云;馮怡;沈嵐;王彬;阮克峰;從文娟;;二甲雙胍預(yù)防2型糖尿病的尿液代謝組學(xué)研究[A];2012年中國藥學(xué)大會暨第十二屆中國藥師周論文集[C];2012年

3 安慧杰;魏蕊;楊進(jìn);王廣;洪天配;;二甲雙胍促進(jìn)血管內(nèi)皮一氧化氮合酶復(fù)偶聯(lián)的作用及其機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

4 杜云波;趙英萍;;二甲雙胍致糖尿病乳酸性酸中毒12例的臨床分析[A];中國病理生理學(xué)會危重病醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會第八屆全國大會暨中華呼吸病學(xué)會呼吸生理和重癥監(jiān)護(hù)學(xué)組年會論文集[C];2008年

5 郭力;李顯筑;王梅;;二甲雙胍對糖尿病患者心血管危險因素的影響及其機(jī)理探討[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

6 張丹丹;劉芳;唐峻嶺;鄭泰山;陸慧娟;謝君;盧逢娣;包玉倩;賈偉平;;2型糖尿病患者血清CA199水平的性別差異及二甲雙胍對其影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

7 吳加華;周嘉強(qiáng);;二甲雙胍對葡萄糖-6-磷酸酶基因表達(dá)的抑制作用及其機(jī)制[A];2013年（第三屆）中國藥物毒理學(xué)年會暨藥物非臨床安全性評價研究論壇論文摘要[C];2013年

8 吳加華;周嘉強(qiáng);;二甲雙胍對葡萄糖-6-磷酸酶基因表達(dá)的抑制作用及其機(jī)制[A];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

9 王述進(jìn);;二甲雙胍對2型糖尿病患者血清c反應(yīng)蛋白水平的影響[A];全國首屆代謝綜合征的基礎(chǔ)與臨床專題學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

10 安慧杰;劉金波;柯靜;王廣;洪天配;;二甲雙胍逆轉(zhuǎn)波動性高糖誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)的機(jī)制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十一次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 秦家珍;服二甲雙胍監(jiān)測腎功能[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2007年

2 健康時報實(shí)習(xí)記者 井超;緩釋降糖藥別掰開吃[N];健康時報;2009年

3 錢榮立;二甲雙胍不是減肥藥[N];健康報;2003年

4 王欣;二甲雙胍的臨床新用[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

5 彥珉;二甲雙胍的“后現(xiàn)代生活”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2008年

6 徐述湘;50年應(yīng)用 二甲雙胍成為降糖經(jīng)典藥物[N];中國醫(yī)藥報;2008年

7 章潮忠 袁克儉;“老當(dāng)益壯”的二甲雙胍[N];健康報;2006年

8 韓詠霞;五種情況慎用二甲雙胍[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2008年

9 裘影萍;特殊人群慎服二甲雙胍[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2009年

10 健康時報記者 戴志悅;服二甲雙胍別喝酸奶[N];健康時報;2009年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姚新明;二甲雙胍對糖尿病腎臟疾病的保護(hù)作用及機(jī)制探討[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

2 許國順;二甲雙胍對造血免疫系統(tǒng)輻射損傷防護(hù)作用及分子機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

3 汪莉;二甲雙胍對奧氮平致精神分裂癥體重增加者肝臟脂肪含量的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 劉瑛;二甲雙胍通過mTOR信號通路對Hacat角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的影響[D];山東大學(xué);2015年

5 趙彬;二甲雙胍調(diào)節(jié)腦膠質(zhì)瘤周圍腦水腫的機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2016年

6 韋德華;p53、線粒體基因多態(tài)性與二甲雙胍輔助卵巢癌化療增敏關(guān)系研究[D];鄭州大學(xué);2016年

7 張艷飛;二甲雙胍對2型糖尿病合并結(jié)直腸癌患者預(yù)后的影響及其機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

8 張濤;二甲雙胍對膀胱癌的抑制作用及其機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2014年

9 李偉寧;二甲雙胍對HaCaT細(xì)胞增殖信號通路及豚鼠耳銀屑病模型影響研究[D];山東大學(xué);2014年

10 黃為;二甲雙胍對膽管癌細(xì)胞株RBE的作用及其機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王靜璐;二甲雙胍通過調(diào)節(jié)EGFR信號通路抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖的研究[D];鄭州大學(xué);2015年

2 侯敬天;二甲雙胍對3T3-L1脂肪細(xì)胞v-SNAREs表達(dá)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

3 李慧穎;二甲雙胍經(jīng)由11β-HSD1調(diào)節(jié)人外周血淋巴細(xì)胞GLUT-4的表達(dá)[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

4 楊霞;二甲雙胍在3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)過程中對v-SNAREs蛋白家族mRNA表達(dá)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

5 劉澤菁;SLC22A1、SLC22A4基因多態(tài)性與2型糖尿病患者二甲雙胍療效的相關(guān)性研究[D];蘭州大學(xué);2016年

6 李鋒林;二甲雙胍延長線蟲壽命及其作用機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2015年

7 陳恒;基于UPLC/Q-TOF-MS的血清代謝組學(xué)技術(shù)研究二甲雙胍對健康人體的作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

8 簡遜;噻唑烷二酮與二甲雙胍治療多囊卵巢綜合癥的療效和安全性的Meta分析[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

9 程菲菲;PCOS患者血清VEGF-B的變化及二甲雙胍治療的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

10 趙黎;二甲雙胍在肺癌的預(yù)防及治療中的作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

，

本文編號：1208612