本文關(guān)鍵詞：儲存血小板中血小板微粒的來源、制備及功能初探

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【摘要】：目的從手工濃縮血小板中制備血小板微粒(PMP),并探索PMP的止凝血功能及來源。方法取常規(guī)儲存第1、3、5、7、9、11天的濃縮血小板,流式細(xì)胞儀檢測CD61抗體標(biāo)記的樣本中PMP含量。低速離心(20℃ 2500×g、30min)儲存第1、8、15、22、29天的濃縮血小板,下層沉淀用于檢測離心對血小板CD62p及磷脂酰絲氨酸(PS)表達(dá)的影響；上層液高速離心(20 ℃,15000×g、45min)獲得PMP。對離心獲取的PMP顆粒理化性質(zhì)和功能進(jìn)行檢測,包括：顆粒大小、膜表面蛋白受體和PS、凝血酶生成能力。PMP的來源研究采取分析儲存血小板生理狀態(tài)的方法：取儲存第0、1、3、5、7、9、11天的濃縮血小板,以CD62p作為血小板活化狀態(tài)指標(biāo)、以△Ψm和PS作為血小板凋亡狀態(tài)指標(biāo),利用流式細(xì)胞儀檢測血小板各項指標(biāo)的表達(dá)。結(jié)果常規(guī)儲存9天起濃縮血小板中PMP含量顯著增加,且離心剪切力對其獲取無影響；制備儲存第9天的PMP,經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)其大小不均一,表面含有GPIba (CD42b)、GPⅡb-Ⅲa (CD41/CD61)、P-選擇素(CD62p)以及PS,具有體外促進(jìn)凝血酶生成的功能；此外,血小板活化與凋亡指標(biāo)檢測發(fā)現(xiàn),儲存5天后的血小板開始進(jìn)入了高度活化和凋亡狀態(tài)。結(jié)論儲存9天的濃縮血小板開始顯著釋放PMP,可通過離心方法直接獲��；制備的PMP表面保留了與止凝血功能相關(guān)的糖蛋白和PS,表現(xiàn)出止血功能；這種具止凝血功能的PMP來源于發(fā)生高度活化和凋亡的血小板。
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R977.8

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1208508