本文關(guān)鍵詞：停流熒光法研究牛血清白蛋白和葉酸反應(yīng)動力學(xué)

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【摘要】：葉酸屬于B族維生素,作為生物體內(nèi)轉(zhuǎn)移一碳單位酶系中的輔酶,與其他維生素相互作用,共同維持體內(nèi)紅細胞的穩(wěn)定,對氨基酸之間的轉(zhuǎn)化、細胞的分裂生長,蛋白質(zhì)合成的反應(yīng)都有重要意義。藥物半衰期、峰濃度和反應(yīng)速度常數(shù)是研究藥代動力學(xué)的重要參數(shù),實驗運用熒光分光光度計和停流光譜分析儀研究了仿生環(huán)境下牛血清白蛋白和葉酸反應(yīng)的動力學(xué)參數(shù),為葉酸相關(guān)的藥物代謝參數(shù)提供參考。結(jié)果表明:利用Stern-Volmer方程處理熒光猝滅實驗數(shù)據(jù),得到25,30和37℃下葉酸對牛血清白蛋白內(nèi)源熒光的靜態(tài)猝滅常數(shù)分別為2.455×10~(10),4.900×10~(10)和6.427×10~(10) L·mol~(-1)·s~(-1);動力學(xué)反應(yīng)速率常數(shù)的計算結(jié)果表明不同溫度、pH值和緩沖介質(zhì)下BSA和葉酸反應(yīng)的速率常數(shù)都大于100mol·L~(-1)·s~(-1),闡明了BSA與葉酸之間的猝滅機理是通過形成復(fù)合物的靜態(tài)猝滅過程;生理溫度下,牛血清白蛋白濃度與其初始濃度滿足二級反應(yīng)公式,相關(guān)系數(shù)為0.998 7,藥代半衰期t_(1/2)為0.059s;反應(yīng)的表觀速率常數(shù)隨著葉酸濃度的增加呈線性增加趨勢,且葉酸催化牛血清白蛋白熒光猝滅的速率常數(shù)k_(cat)=3.174×10~5 mol·L~(-1)·s~(-1)。此外還測定了不同緩沖介質(zhì)下牛血清白蛋白與葉酸相互作用的表觀速率常數(shù)和反應(yīng)速率常數(shù),以此來探討生理介質(zhì)對于二者反應(yīng)的影響,為確定臨床用藥方案、預(yù)測藥物的療效和毒性以及合理用藥有著重要意義。
【作者單位】： 北京工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與生物工程學(xué)院;包頭出入境檢驗檢疫局;中國檢驗檢疫科學(xué)研究院;
【基金】：北京市教育委員會科技計劃面上項目(KM201210005032) 北京市自然科學(xué)基金項目(2102005)資助
【分類號】：R961;O657.3
【正文快照】： 引言葉酸是一種水溶性維生素,它能傳遞一碳基團(甲基或甲酰)給脫氧尿苷酸,使之變?yōu)槊撗跣剀账?進而合成DNA。葉酸的缺少會增加未成熟細胞量,使白血球減少,從而導(dǎo)致紅血球的異常,引起貧血、心臟病、老年性癡呆及胎兒神經(jīng)軟管缺陷等疾病[1-3]。葉酸進入機體后,和各種生物分子結(jié)

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本文編號：1139185