1株殼聚糖酶產(chǎn)生菌的鑒定和產(chǎn)酶條件優(yōu)化
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【摘要】:目的對產(chǎn)殼聚糖酶菌株Y116進(jìn)行菌種鑒定,并提高菌株Y116殼聚糖酶的產(chǎn)量。方法對產(chǎn)殼聚糖酶菌株Y116進(jìn)行了形態(tài)學(xué)觀察、生理生化特征鑒定和16SrDNA序列同源性分析;采用單因素法和響應(yīng)面法,對菌株Y116產(chǎn)酶的培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果及結(jié)論菌株Y116歸屬于芽孢桿菌屬(Bacillus sp.)。單因素實(shí)驗(yàn)中,酶活力達(dá)到最高值時各因素的數(shù)值分別為:乳糖35g/L,豆餅粉30g/L,Mg~(2+)2mmol/L,NaCl 5g/L,初始pH 5.0,接種量5%,培養(yǎng)溫度30℃和發(fā)酵時間96h。利用Plackett-Burman(PB)設(shè)計(jì)對影響殼聚糖酶產(chǎn)量的8個主要因素進(jìn)行評價,確定了豆餅粉濃度、初始pH和Mg~(2+)濃度是影響菌株產(chǎn)酶量的3個主要因素;利用中心組合設(shè)計(jì)(CCD)及響應(yīng)面分析,最終得到3個主要因素的最優(yōu)值:豆餅粉濃度39.43g/L,pH 5.94,Mg~(2+)濃度2.05mmol/L,酶活力比優(yōu)化前提高了5倍。復(fù)使用10次后,其相對酶活仍為42.3%,說明具有良好的批次操作穩(wěn)定性。該酶經(jīng)過固定化后熱穩(wěn)定性和pH穩(wěn)定性均得到了提高。
【作者單位】: 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部海洋漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室青島市海洋酶工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;上海海洋大學(xué)食品學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 海洋芽孢桿菌 殼聚糖酶 鑒定 產(chǎn)酶條件優(yōu)化 響應(yīng)面
【基金】:國家自然科學(xué)基金-聯(lián)合基金項(xiàng)目(U1406402-5) 國際科技合作與交流專項(xiàng)(2014DFG30890)資助
【分類號】:R915
【正文快照】: 殼聚糖(Chitosan,CTS)學(xué)名為聚(1,4)-2-氨基-2-脫氧-β-D-葡萄糖,屬于為數(shù)不多的堿性多糖,商業(yè)應(yīng)用廣泛[1],其應(yīng)用價值在醫(yī)藥、功能材料、食品和飼料等領(lǐng)域得到市場認(rèn)可[2]。分子質(zhì)量大、水溶性差、在人體內(nèi)不易吸收等缺點(diǎn),使得殼聚糖的應(yīng)用受到一定限制[3]。殼寡糖為殼聚糖的
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