本文關(guān)鍵詞：一種新的粒毛盤菌黑色素結(jié)構(gòu)、修飾及活性研究

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【摘要】：本研究利用粒毛盤菌YM226,經(jīng)深層發(fā)酵、黑色素提取及純化,獲得其胞內(nèi)均一性黑色素(LM)。通過(guò)元素分析,紫外-可見(jiàn)吸收光譜,紅外光譜,電子自旋共振譜,質(zhì)譜及1D、2D核磁共振譜得出了LM可能的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明LM具有真菌黑色素的典型結(jié)構(gòu)特征,是一種真黑色素。使用D-氨基葡萄糖對(duì)LM進(jìn)行分子修飾,制備了LM的D-氨基葡萄糖衍生物(GLM),并在小鼠模型中研究了LM和GLM對(duì)急性酒精性肝損傷的保護(hù)作用。與模型組相比,LM和GLM預(yù)處理組小鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Alanine Aminotransferase, ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspertate Aminotransferase, AST)含量顯著降低,肝臟中細(xì)胞色素P4502E1 (CYP2E1)合成明顯受到抑制,抗氧化酶活性顯著較高。此外,LM和GLM預(yù)處理可以有效降低模型小鼠肝臟核轉(zhuǎn)錄因子kappa B (NF-κB)和NF-κB激活相關(guān)細(xì)胞因子,白介素-6(Interleukin-6, IL-6)、腫瘤壞死因子-a(Tumor Necrosis Factor-alpha, TNF-a)和單核細(xì)胞趨化蛋白-1(Monocyte Chemotactic Protein-1, MCP-1)水平以及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(Inducible Nitric Oxide Synthase, iNOS)和環(huán)氧化酶-2(Cyclooxygenase-2, COX-2)活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明LM和GLM可以通過(guò)降低酒精誘導(dǎo)的急性肝的氧化和免疫應(yīng)激對(duì)肝臟起保護(hù)作用,可用于急性酒精性肝損傷的預(yù)防。通過(guò)給予低鐵飲食建立缺鐵性貧血(Iron Deficiency Anemia, IDA)小鼠模型,并比較了補(bǔ)充黑色素-鐵復(fù)合物(LM-Fe)和無(wú)機(jī)鐵(FeSO4、FeCl3)對(duì)IDA小鼠的保護(hù)作用。LM-Fe和無(wú)機(jī)鐵均能劑量依賴性地提高IDA小鼠血清血紅蛋白(Haemoglobin, Hb)、血清鐵(Serum Iron, SI)和血清鐵蛋白(Serum Ferritin,SF)水平,降低總鐵結(jié)合力(Total Iron-Binding Capacity, TIBC).與補(bǔ)充無(wú)機(jī)鐵相比,補(bǔ)充LM-Fe能顯著增加IDA小鼠血清超氧化物歧化酶(Superoxidase Dismutase, SOD)、過(guò)氧化氫酶(Catalase, CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(Glutathione Peroxidase, GSH-Px)活性。此外,與無(wú)機(jī)鐵組相比,LM-Fe組小鼠血清腫瘤壞死因子(Tumour Necrosis Factor-a, TNF-a)、白細(xì)胞介素-1(Interleukin-1β, IL-1β)和白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6, IL-6)明顯下降,而白細(xì)胞介素-2 (Interleukin-2, IL-2)水平顯著升高。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與無(wú)機(jī)鐵相比,LM-Fe可以更有效地改善IDA小鼠貧血癥狀、提高其血清抗氧化酶活性并改善其免疫功能紊亂,可以作為多功能的鐵強(qiáng)化劑用于改善和治療IDA。
【關(guān)鍵詞】：粒毛盤菌黑色素 結(jié)構(gòu) 氨基葡萄糖修飾 酒精性肝損傷 缺鐵性貧血
【學(xué)位授予單位】：合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R915
【目錄】：

• 致謝7-8
• 摘要8-9
• ABSTRACT9-16
• 第一章 緒論16-26
• 1.1 黑色素概述16-23
• 1.1.1 黑色素資源16
• 1.1.2 黑色素分類16-17
• 1.1.3 黑色素結(jié)構(gòu)解析17-19
• 1.1.4 黑色素合成途徑19-20
• 1.1.5 黑色素的生物學(xué)功能20-21
• 1.1.6 黑色素特性及應(yīng)用21-23
• 1.2 粒毛盤菌黑色素研究狀況23-24
• 1.3 本課題研究的內(nèi)容及意義24-26
• 第二章 粒毛盤菌YM226胞內(nèi)均一性黑色素結(jié)構(gòu)解析26-32
• 2.1 引言26
• 2.2 材料與儀器26-27
• 2.2.1 菌株及材料26
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑26
• 2.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器26-27
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法27
• 2.3.1 元素分析27
• 2.3.2 紫外-可見(jiàn)光譜、紅外光譜和電子自旋共振譜分析27
• 2.3.3 核磁分析27
• 2.3.4 質(zhì)譜分析27
• 2.4 結(jié)果27-30
• 2.4.1 LM元素分析結(jié)果27
• 2.4.2 LM紫外-可見(jiàn)吸收光譜27-28
• 2.4.3 LM紅外光譜28
• 2.4.4 LM電子自旋共振光譜28-29
• 2.4.5 LM核磁共振分析結(jié)果29-30
• 2.4.6 LM質(zhì)譜分析結(jié)果30
• 2.5 討論30-31
• 2.6 本章小結(jié)31-32
• 第三章 LM的分子修飾及其抗急性酒精性肝損傷活性32-41
• 3.1 引言32
• 3.2 材料32-33
• 3.2.1 粒毛盤菌黑色素32
• 3.2.2 試劑及藥品32-33
• 3.2.3 儀器及設(shè)備33
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法33-35
• 3.3.1 LM的氨基葡萄糖修飾33
• 3.3.2 LM及GLM的水溶解度測(cè)定33-34
• 3.3.3 GLM的結(jié)構(gòu)驗(yàn)證34
• 3.3.4 動(dòng)物分組和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)34
• 3.3.5 生化檢測(cè)34
• 3.3.6 組織學(xué)分析34
• 3.3.7 統(tǒng)計(jì)分析34-35
• 3.4 結(jié)果35-39
• 3.4.1 黑色素衍生物的結(jié)構(gòu)驗(yàn)證35-36
• 3.4.2 LM和GLM預(yù)處理對(duì)血清ALT和AST含量的影響36
• 3.4.3 LM和GLM預(yù)處理對(duì)肝臟氧化應(yīng)激的影響36-37
• 3.4.4 LM和GLM預(yù)處理對(duì)肝臟炎性應(yīng)激的影響37
• 3.4.5 LM和GLM預(yù)處理對(duì)肝臟顯微結(jié)構(gòu)變化的影響37-39
• 3.5 討論39-40
• 3.6 本章小結(jié)40-41
• 第四章 LM-Fe復(fù)合物對(duì)缺鐵性貧血小鼠的恢復(fù)作用41-50
• 4.1 引言41
• 4.2 材料41-42
• 4.2.1 粒毛盤菌黑色素41
• 4.2.2 試劑及藥品41-42
• 4.2.3 儀器及設(shè)備42
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法42-44
• 4.3.1 粒毛盤菌黑色素鐵的制備及表征42-43
• 4.3.2 動(dòng)物及分組43
• 4.3.3 樣品收集43
• 4.3.4 血液指標(biāo)測(cè)定43
• 4.3.5 肝臟和脾臟中鐵含量測(cè)定43
• 4.3.6 血清抗氧化指標(biāo)及細(xì)胞因子生產(chǎn)測(cè)定43-44
• 4.3.7 統(tǒng)計(jì)分析44
• 4.4 結(jié)果44-47
• 4.4.1 LM-Fe的結(jié)構(gòu)表征44
• 4.4.2 LM-Fe對(duì)缺鐵性貧血小鼠器官指數(shù)的影響44-45
• 4.4.3 LM-Fe對(duì)缺鐵性貧血小鼠血清Hb、SI、TIBC和SF水平的影響45-46
• 4.4.4 LM-Fe對(duì)缺鐵性貧血小鼠肝臟和脾臟中鐵含量的影響46
• 4.4.5 LM-Fe對(duì)缺鐵性貧血小鼠血液生化指標(biāo)及抗氧化酶活性的影響46-47
• 4.4.6 LM-Fe對(duì)缺鐵性貧血小鼠血清細(xì)胞因子含量的影響47
• 4.5 討論47-49
• 4.6 本章小結(jié)49-50
• 第五章 結(jié)論和展望50-51
• 5.1 結(jié)論50
• 5.2 展望50
• 5.3 創(chuàng)新點(diǎn)50-51
• 參考文獻(xiàn)51-66
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及申報(bào)的專利66-67

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