本文關(guān)鍵詞：重組人胰高血糖素樣肽-1類似物的分離純化和鑒定

  更多相關(guān)文章： 重組人胰高血糖素樣肽- 融合蛋白 純化 生物學(xué)活性

【摘要】：將合成的人胰高血糖素樣肽-1[recombinant human glucagon-like peptide-1(7~37),rhGLP-1]類似物基因插入到原核表達(dá)質(zhì)粒pGEX-4T-3中,構(gòu)建成rhGLP-1類似物與谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(glutathione-S-transferases,GST)的融合表達(dá)載體pGEX-rhGLP-1類似物,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)獲得重組菌株。IPTG誘導(dǎo)表達(dá)的菌體經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)破碎后,離心收集包涵體,經(jīng)尿素變性、Glutathione-Sepharose 4B親和層析、腸激酶酶切、SP-Sepharose FF層析和反相層析RP-C18脫鹽后凍干,得到純度大于96%的rhGLP-1類似物,經(jīng)質(zhì)譜測(cè)定,分子量與理論值一致。生物學(xué)活性分析表明,rhGLP-1類似物具有促進(jìn)表達(dá)有GLP-1受體的HEK293細(xì)胞c AMP增加的活性。
【作者單位】： 廣東東陽(yáng)光藥業(yè)有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 重組人胰高血糖素樣肽- 融合蛋白 純化 生物學(xué)活性
【基金】：廣東省引進(jìn)創(chuàng)新科研團(tuán)隊(duì)計(jì)劃資助項(xiàng)目(201101Y0104990178)
【分類號(hào)】：R914
【正文快照】： 人胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)是一種生理性肽類腸道激素,胰高血糖素原在腸粘膜L細(xì)胞內(nèi)被酶解為含37個(gè)氨基酸殘基的GLP-1(1~37)。GLP-1(l~37)不具有生物活性,需進(jìn)一步水解切除N末端6個(gè)氨基酸殘基后成為具有生物學(xué)活性的GLP-1(7~37),在攝入葡萄糖或進(jìn)食數(shù)分鐘后釋放[1]。GLP-1的主

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 袁其曉;一種口服有效的促黃體生成激素釋放激素的類似物[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)參考資料.計(jì)劃生育婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè);1977年03期

2 褚季瑜,丁捷飛,劉寅曾,朱寶亭,褚云鴻;LHRH類似物的設(shè)計(jì)和合成[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);1989年02期

3 Michael PC;朱敏;;促性腺激素釋放激素及其類似物[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(內(nèi)分泌學(xué)分冊(cè));1992年01期

4 劉巍;;拉響生物類似物警報(bào)[J];中國(guó)醫(yī)院院長(zhǎng);2011年13期

5 ;R-和S-氟西汀、去甲氟西汀及類似物的合成[J];國(guó)外醫(yī)藥.合成藥.生化藥.制劑分冊(cè);1996年03期

6 ;維生素E類似物具有抗癌作用[J];醫(yī)藥與保健;2008年08期

7 郭紅宇,高云荷;GnRH類似物的研究進(jìn)展[J];中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志;2005年11期

8 袁其曉,樊慶華;促黃體素釋放激素類似物對(duì)大鼠和小鼠妊娠的影響[J];生理學(xué)報(bào);1978年02期

9 孫濱源,田桂玲,葉蘊(yùn)華;生長(zhǎng)激素釋放抑制因子類似物的研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;1998年06期

10 韓德艷,白志平,陳慧蘭;分子模擬計(jì)算研究輔酶B_(12)及其類似物光解產(chǎn)生的自由基加合物與β-環(huán)糊精的作用[J];無(wú)機(jī)化學(xué)學(xué)報(bào);1999年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉一陽(yáng);張旭輝;陶春蘭;張福甲;張浩力;;可溶性并五苯類似物的合成及性質(zhì)表征[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第二十五屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集（上冊(cè)）[C];2006年

2 陳新月;;核苷(酸)類似物經(jīng)治患者治療新思路[A];第7屆全國(guó)疑難及重癥肝病大會(huì)論文集[C];2013年

3 宋亞攀;孫麗萍;宋洛文;楊利國(guó);;GnRH類似物及其在動(dòng)物繁殖上的應(yīng)用[A];中國(guó)奶業(yè)協(xié)會(huì)第24次繁殖學(xué)術(shù)年會(huì)暨國(guó)家奶牛/肉牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系第一屆全國(guó)牛病防治學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

4 黃志榮;;四種核苷酸類似物的療效與耐藥處理[A];傳染病診治高峰論壇暨2007年浙江省感染病學(xué)、肝病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

5 李平利;王鳳山;;肝素類似物合成方法的研究進(jìn)展[A];山東省藥學(xué)會(huì)2010年生化與生物技術(shù)藥物學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

6 徐國(guó)興;鄭連友;黨群;柏旭;;Eudistomin Y_1類似物的全合成[A];2010施慧達(dá)杯第十屆全國(guó)青年藥學(xué)工作者最新科研成果交流會(huì)論文集[C];2010年

7 萬(wàn)謨彬;;核苷(酸)類似物的妊娠安全性和臨床研究進(jìn)展[A];第二屆全國(guó)病毒性肝炎慢性化重癥化基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

8 樓晨光;高麗梅;宋丹青;;胸苷酸合成酶抑制劑—Nolatrexed及其類似物的設(shè)計(jì)與合成[A];第四屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

9 郭亞兵;;核苷(酸)類似物及新的抗病毒方法的探索[A];廣東省肝臟病學(xué)會(huì)2007年年會(huì)論文集[C];2007年

10 唐紅;粱凌波;陳蘭蘭;陳恩強(qiáng);;220例核苷(酸)類似物治療失敗慢性乙型肝炎患者耐藥相關(guān)突變分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十六次全國(guó)病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 本報(bào)記者 黃靜芝;生物類似物研發(fā)除障[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2013年

2 本報(bào)記者 項(xiàng)錚;專家呼吁盡快出臺(tái)生物類似物法規(guī)[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

3 黃靜芝;生物類似物研發(fā)除障 打響馬拉松硬仗[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2013年

4 駐滬記者 康義瑤;生物類似物安全性研究升溫[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2011年

5 本報(bào)記者 裘炯華;建立生物類似物監(jiān)管體系有利創(chuàng)新[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2013年

6 ;維生素E類似物可抗癌[N];人民日?qǐng)?bào);2008年

7 蘇嶺 盛德國(guó)際律師事務(wù)所生命科學(xué)戰(zhàn)略顧問(wèn) 中國(guó)藥科大學(xué)國(guó)家藥物政策與醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)研究中心研究員 藥物信息協(xié)會(huì)(DIA)全球理事會(huì)前任主席;2013生物類似物全球同此涼熱[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2014年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張軼俊;穩(wěn)定高表達(dá)對(duì)核苷（酸）類似物耐藥HBV毒株肝癌細(xì)胞系的建立[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

2 邢燕紅;松香衍生物具有不同抗腫瘤機(jī)制以及含Map的內(nèi)嗎啡肽類似物不引起細(xì)胞耐受和依賴[D];蘭州大學(xué);2013年

3 王曉平;一、一種半胱氨酸改造的MLIF類似物對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用的研究 二、蘭州地區(qū)健康成人脈沖振蕩肺功能正常值的分析研究[D];蘭州大學(xué);2016年

4 李夏;神經(jīng)酰胺類似物抑制腫瘤相關(guān)的免疫抑制細(xì)胞的分子機(jī)制[D];浙江大學(xué);2016年

5 王碩;兩種多肽類藥物結(jié)構(gòu)的譜學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2011年

6 趙琳琳;胰高血糖素樣肽-1及其長(zhǎng)效類似物的研究[D];華中科技大學(xué);2013年

7 蔣翔銳;新型土震素B類似物的合成及其生物活性研究[D];浙江大學(xué);2005年

8 吳曉琰;重組Exendin-4類似物EW的克隆、表達(dá)、純化及生物活性研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

9 王洋;全碳C環(huán)DCK類似物的設(shè)計(jì)、合成及生物活性研究[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

10 陶虎;活性多肽類似物的設(shè)計(jì)、制備和功能研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王丹;內(nèi)嗎啡肽-1及其類似物構(gòu)效關(guān)系研究[D];蘭州大學(xué);2015年

2 俞舒;不同核苷（酸）類似物治療慢乙肝病人的療效比較：頭對(duì)頭研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

3 刁玉祥;與CPPs偶聯(lián)的新型EM-1類似物的設(shè)計(jì)及阿片活性研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2015年

4 吳登;肝病一號(hào)方治療核苷（酸）類似物耐藥乙肝患者30例的臨床觀察和探討[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2015年

5 曹冰;新疆地區(qū)漢族人群轉(zhuǎn)錄因子7類似物2基因多態(tài)性與2型糖尿病的相關(guān)性研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

6 梁媛;多位點(diǎn)修飾設(shè)計(jì)的內(nèi)嗎啡肽-1的類似物及其鎮(zhèn)痛活性研究[D];蘭州大學(xué);2012年

7 柳朔怡;乙型肝炎病毒臨床分離株核苷（酸）類似物基因耐藥性的分子流行病學(xué)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

8 孫娜;克力托辛類似物關(guān)鍵中間體的合成研究[D];天津大學(xué);2014年

9 陳偉;(+)-Pochonicine及其類似物的合成[D];江西師范大學(xué);2014年

10 桑誼荃;胰高血糖樣肽-1類似物對(duì)前列腺癌（LNCaP）及乳腺癌（MCF-7）細(xì)胞株增殖作用的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

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