本文關鍵詞：宛氏擬青霉菌甲醛脫氫酶的分離純化及酶學性質

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【摘要】：[目的]以甲醛降解菌宛氏擬青霉菌F1-23為實驗菌株,分離純化得到甲醛脫氫酶的酶液,并考察其酶學性質。[方法]從液體培養(yǎng)液中收集菌體,通過細胞粉碎,采用(NH4)2SO4沉淀、透析、DFAE-Sepharose離子交換層析及Superdex-200凝膠過濾層析,純化得到電泳純的FADH。[結果]該酶的分子量約為112.81 k Da;亞基分子量分別為65k Da和42 k Da;純酶液活力為336.10 U/mg,較純化前提高了4.02倍。對該酶的酶學性質分析結果表明,該酶最適反應溫度為37℃,在25~45℃時穩(wěn)定性很好;最適反應p H為8.0,在p H 6.5~8.0范圍內酶活力較為穩(wěn)定。底物特異性研究表明FADH最適底物為甲醛,相對偏好短鏈醛類。金屬離子對酶活性的影響試驗表明,Zn~(2+)、Mn~(2+)、Ag~+、Fe~(3+)和Hg~(2+)幾乎完全抑制FADH酶活力;Ca~(2+)對酶活有促進作用。純酶液在4℃環(huán)境下,在24h內可保存78%的活性。[結論]FADH結構較為特殊,且活性較大,為后期表達和深入研究其生物學功能提供理論和數(shù)據(jù)支持。
【作者單位】： 常熟理工學院生物與食品工程學院;
【關鍵詞】： 宛氏擬青霉菌 甲醛脫氫酶 分離純化 酶學性質
【基金】：常熟理工學院2016屆畢業(yè)論文重點資助課題
【分類號】：R915
【正文快照】： 甲醛是一種能與核酸、蛋白質以及脂類產生非特異性反應的活潑化合物,對所有生物都具有很高毒性[1-2]。為了防止甲醛對生物體的致死以及突變作用,生物體已建立了多種修復機制,使之能在含甲醛的環(huán)境中更好地生存,其中谷胱甘肽(GSH)依賴型的甲醛氧化途徑就是微生物中廣泛存在的一

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本文編號：1030126