本文關(guān)鍵詞：aFGF通過MAPK通路對抗慶大霉素誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細胞損傷的機制

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【摘要】：目的：體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞,使用藥物進行干預(yù),觀察酸性成纖維細胞生長因子(acidicfibroblastgrowthfactor,aFGF)對抗慶大霉素對海馬星形膠質(zhì)細胞毒性作用的MAPK (mitogen-activated protein kinase, MAPK)信號通路中的P38、細胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)1、ERK2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)1、JNK2的表達情況,探討aFGF保護受損的海馬星形膠質(zhì)細胞可能的機制。方法：選取出生24h內(nèi)的SD乳鼠用機械分離法完整的取出海馬組織,經(jīng)剪碎、消化、離心處理后得到星形膠質(zhì)細胞置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)孵育,膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫熒光染色方法對傳至第三代的細胞進行鑒定,純度95%可用于實驗研究。在96孔培養(yǎng)板上接種細胞,置孵箱內(nèi)培育3天后進行實驗操作。實驗分為3組：a.對照組：正常培養(yǎng)；b.損傷組(GM組)：2.Og/LGM培養(yǎng)24h;c.細胞生長因子保護組(aFGF+GM):加入4.25ug/L的aFGF作用24h后再加入2.0g/LGM培養(yǎng)24h。Western Blot檢測MAPK信號通路中的P38、ERK1、ERK2、JNK1、JNK2的表達情況。結(jié)果：(1)細胞形態(tài)學(xué)觀察：光鏡下可見對照組細胞胞體發(fā)出較多長且有分支的突起,呈形態(tài)多樣的梭形、多邊形交織排列的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),折光性強,輪廓清晰；損傷組在光鏡下可見部分細胞皺縮成團,胞體突起連接中斷有些甚至出現(xiàn)細胞脫落的現(xiàn)象,細胞的正常結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)顆粒、空泡；保護組可見細胞呈現(xiàn)比較清晰的輪廓,胞體皺縮和突起回縮均減弱,細胞逐漸均勻分布不再聚集在一起,細胞脫落情況減輕,連接的突起出現(xiàn)中斷的現(xiàn)象減弱,胞質(zhì)內(nèi)顆粒和空泡的數(shù)目減少。(2)Western Blot檢測蛋白表達：損傷組與對照組進行比較,損傷組ERK1的表達升高(P0.05)保護組與損傷組進行比較：P38的表達增加(P0.05),ERK1表達下降(P0.05)；其余各組進行比較P0.05,無統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論：(1)慶大霉素可能通過激活ERK1途徑對海馬星形膠質(zhì)細胞產(chǎn)生毒性作用。(2)aFGF能夠保護慶大霉素損傷的星形膠質(zhì)細胞。(3)MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可能在aFGF對慶大霉素誘導(dǎo)的海馬星形膠質(zhì)細胞的保護作用過程中起作用,通過P38和ERK1信號分子進行表達。而aFGF對抗慶大霉素誘導(dǎo)的海馬星形膠質(zhì)細胞的損傷機制可能與ERK2、JNK1/2信號分子無關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：aFGF MAPK 星形膠質(zhì)細胞 保護 機制
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R96
【目錄】：

• 個人簡歷3-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 材料與方法12-30
• 結(jié)果30-36
• 討論36-44
• 小結(jié)44-45
• 參考文獻45-52
• 英文縮略詞索引52-54
• 綜述54-76
• 參考文獻68-76
• 致謝76-78
• 碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文78

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