本文關(guān)鍵詞：老年人血清對人臍靜脈內(nèi)皮細胞功能的影響

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【摘要】：目的:以人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)為實驗材料,以健康老年人及老年高血壓患者血清作為損傷因素,建立反映健康老年人及老年高血壓患者特點的內(nèi)皮細胞損傷模型,采用MTT比色法檢測不同處理組血清對血管內(nèi)皮細胞增殖的的影響,通過測定各組內(nèi)皮細胞中一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、活性氧(ROS)的變化,探討老年人血清對人臍靜脈內(nèi)皮細胞功能的影響。方法:取南昌大學第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科新生兒臍帶提取人臍靜脈內(nèi)皮細胞并鑒定,培養(yǎng)3-5代待用,收集健康青年人、正常老年人、老年高血壓患者血清各20份,實驗按空白對照組、正常青年組、正常老年組、老年高血壓組分組,空白組只加培養(yǎng)基,不加血清,各組分別與人臍靜脈內(nèi)皮細胞孵育,在不同時間段收集細胞上清液及細胞,采用MTT方法檢測各組血清對內(nèi)皮細胞增殖情況的影響,采用氧化還原方法檢測各組細胞上清液NO含量,酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測ET-1含量,流式細胞儀檢測各組細胞內(nèi)ROS釋放量,采用統(tǒng)計學方法處理數(shù)據(jù)結(jié)果,比較各組結(jié)果有無差別。結(jié)果:1.各組細胞在不同時間段細胞增殖活力也無統(tǒng)計學差異(P0.05)。在同一時間點,健康青年組、健康老年組及老年高血壓組細胞增殖活力在統(tǒng)計學上無顯著差異(P0.05),空白對照組與其他三組細胞增殖活力在統(tǒng)計學上均有顯著差異(P0.05);2.各處理組血清與內(nèi)皮細胞孵育12h、24h后,在同一時間點,健康青年組、健康老年組、老年高血壓組內(nèi)皮細胞釋放NO均呈梯度降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.01),各組內(nèi)皮細胞培養(yǎng)24h NO釋放量比12h NO釋放量增加,但差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);3.各實驗組血清與內(nèi)皮細胞孵育12h、24h后,在同一時間點,健康青年組、健康老年組、老年高血壓組內(nèi)皮細胞釋放ET-1均呈梯度增高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.01),各組內(nèi)皮細胞培養(yǎng)24h ET-1釋放量比12h ET-1釋放量增加,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.01);4.各實驗組血清與內(nèi)皮細胞孵育培養(yǎng)12h、24h后,在同一時間點,健康青年組、健康老年組、老年高血壓組內(nèi)皮細胞內(nèi)活性氧平均熒光強度呈升高趨勢,健康老年組血清及老年高血壓血清增加內(nèi)皮細胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生。結(jié)論:健康老年人及老年高血壓患者血清對人臍靜脈內(nèi)皮細胞功能具有損傷作用,可以減少血管內(nèi)皮細胞分泌NO,促進ET-1合成及ROS生成,但對血管內(nèi)皮細胞增殖情況影響不大。
【關(guān)鍵詞】：健康老年人 老年高血壓患者 人臍靜脈內(nèi)皮細胞 一氧化氮 內(nèi)皮素-1 活性氧
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R544.1
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 主要縮略詞中英文對照表9-10
• 第1章 前言10-12
• 第2章 材料與方法12-19
• 2.1 材料12-13
• 2.1.1 臍靜脈12
• 2.1.2 主要試驗儀器12
• 2.1.3 主要實驗試劑12-13
• 2.2 試驗方法13-19
• 2.2.1 人臍靜脈內(nèi)皮細胞原代培養(yǎng)13
• 2.2.2 原代臍靜脈內(nèi)皮細胞的鑒定13-14
• 2.2.3 臍靜脈內(nèi)皮細胞的傳代培養(yǎng)14-15
• 2.2.4 研究對象及血清收集15
• 2.2.5 內(nèi)皮細胞增殖活性檢測15-16
• 2.2.6 NO及ET-1 的檢測16-19
• 第3章 結(jié)果19-25
• 3.1 人臍靜脈內(nèi)皮細胞形態(tài)觀察19
• 3.2 人臍靜脈內(nèi)皮細胞的鑒定19-20
• 3.3 不同處理組對內(nèi)皮細胞增殖活性的影響20-21
• 3.4 不同處理組對內(nèi)皮細胞分泌NO的影響21-22
• 3.5 不同處理組對內(nèi)皮細胞分泌ET-1 的影響22-23
• 3.6 不同處理組對內(nèi)皮細胞內(nèi)活性氧水平影響23-25
• 第4章 討論25-29
• 4.1 各組血管內(nèi)皮細胞增殖無明顯差異25-26
• 4.2 NO下降26
• 4.3 ET-1 升高26-27
• 4.4 ROS增加27-28
• 4.5 老年高血壓與內(nèi)皮細胞功能障礙28-29
• 第5章 結(jié)語29-30
• 致謝30-31
• 參考文獻31-33
• 綜述33-42
• 參考文獻39-42

【參考文獻】

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本文編號：598078