本文關鍵詞：17β-雌二醇及其代謝產(chǎn)物2-甲氧基雌二醇與慢性低氧性肺動脈高壓大鼠體內(nèi)內(nèi)皮素-1及其受體關系的研究

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【摘要】：目的:肺動脈高壓(pulmonary artery hrpertension,PAH)是以肺血管內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞增生遷移,凋亡抵抗,逐漸導致以肺血管血管壁增厚及血管腔狹窄甚至阻塞為特征的肺血管重構(gòu)性疾病[1]。內(nèi)皮素-l(endothelin-l,ET-l)是最近探究相對較多的可能與肺血管再建緊密相關的一類強縮血管肽類,研究發(fā)現(xiàn)它在PAH患者肺動脈中濃度明顯上升,且與PAH的嚴重程度和預后關系緊密,合成和分泌ET-1的主要為肺血管內(nèi)皮細胞,其次為肺血管平滑肌細胞(Smooth muscle cell,SMC)。ET-1作用于血管內(nèi)皮細胞和SMC的方式為經(jīng)ETAR或ETBR通過旁分泌或自分泌,從而共同調(diào)節(jié)血管的收縮和舒張。雌激素(Estradiol,E2)能夠使各類不利因素對肺血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞結(jié)構(gòu)的損害明顯減輕,能夠改善血管壁重建以及使血管舒張。從而發(fā)揮其在肺血管系統(tǒng)中的護衛(wèi)作用,但其機制至今還未明確。在這項研究中,通過對低氧性肺動脈高壓大鼠模型的建立,了解內(nèi)皮素1及其受體在肺組織中的缺氧條件下的表達變化,探討內(nèi)皮素-1、內(nèi)皮素受體在缺氧性肺動脈高壓病發(fā)過程當中的功用以及雌激素及其代謝產(chǎn)物2-甲氧基雌二醇(2-Methoxyextradiol,2ME)對內(nèi)皮素-1、內(nèi)皮素受體的影響。方法:1缺氧性肺動脈高壓大鼠模型的建立及分組:選用隨機數(shù)字法將大鼠隨機分為A假手術(shù)組B去勢+E2組C去勢+2ME組D去勢組E假手術(shù)+低氧組F去勢+低氧+E2組G去勢+低氧+2ME組H去勢+低氧組A組、E組打開腹腔找到卵巢后不做處理,直接還納縫合。B組C組F組G組,打開腹腔,沿輸卵管找到卵巢,切除雙側(cè)卵巢后,分別給予E2 20μg/kg/d、2-甲氧基雌二醇240μg/kg/d皮下注射。D組、H組,沿輸卵管找到卵巢,行雙側(cè)卵巢切除。將E組、F組、G組、H組大鼠放于常壓低氧艙內(nèi),用鈉石灰和無水cacl2吸取過剩的CO2和H2O,保持二氧化碳濃度小于0.5%,維持箱內(nèi)氧濃度為(10±0.5)%,每日連續(xù)缺氧氧24h,共8周。各組大鼠均在行手術(shù)后,常氧條件下適應性飼養(yǎng)一周,再放入設置環(huán)境中飼養(yǎng)。2低氧性大鼠肺動脈高壓變化:低氧8周后,用右心導管法測量大鼠平均肺動脈壓力(mean pulmonary artery pressure,m PAP),稱量法獲得右心室肥厚指數(shù)(right ventricule hypertrophy index,RVHI),HE染色法觀察肺小動脈重構(gòu)(hypoxic pulmonary artery remodeling,HPSR)。3采用RT-PCR法檢測肺組織中ETAR、ETBR m RNA的表達:4采用放射免疫法測定各組大鼠肺組織內(nèi)ET-1的含量。結(jié)果:1各組大鼠一般狀況:造模8周后,低氧環(huán)境下的大鼠出現(xiàn)鼠毛顏色暗淡、雙眼虹膜較常氧組變暗發(fā)紅、呼吸窘迫、進食急驟減少,隨著在低氧條件下放置時間的增長,大鼠活動度逐步減少,最后以安靜休息為主要表現(xiàn),未見死亡。與假手術(shù)組相比,假手術(shù)+低氧組及去勢+低氧組大鼠體重增長顯著減慢;去勢+低氧E2組、去勢+低氧+2ME組大鼠體重增長速度緩慢;去勢+E2組、去勢+2ME組、去勢組大鼠體重無明顯變化。2各組大鼠肺小動脈、m PAP及右心室形態(tài)學變化:光鏡下,A組大鼠肺動脈血管內(nèi)皮細胞連續(xù)扁平,分布、厚薄、尺寸較一致,并沒有內(nèi)皮細胞腫脹和壞死,肺動脈壁結(jié)構(gòu)正常;H組大鼠肺內(nèi)血管壁顯著變厚,肺小動脈中膜SMC數(shù)目增加,中膜(PAMT)變厚,管腔增厚程度最為顯著,甚至部分出現(xiàn)塌陷;F組、G組大鼠肺血管管壁的結(jié)構(gòu)改變介于E組和H組之間;B組、C組、D組大鼠肺血管管壁的結(jié)構(gòu)大致正常。與A組相比,H組m PAP升高最為明顯,F組、G組m PAP顯著升高,介于H組和E組之間,且F組和G組間m PAP水平差異無統(tǒng)計學意義;B組、C組和D組的m PAP均無明顯變化。RVHI值的變化同m PAP的變化。3各組大鼠肺組織中ET-1的含量:與假手術(shù)組相比,假手術(shù)+低氧組和去勢+低氧組大鼠ET-1水平顯著升高,去勢+低氧組更甚;去勢+低氧+E2組、去勢+低氧+2ME組ET-1水平明顯升高,介于假手術(shù)+低氧組及去勢+低氧組之間,且去勢+低氧+E2組較去勢+低氧+2ME組升高更為明顯;去勢組、去勢+E2組、去勢+2ME組ET-1水平亦有所升高,但升高幅度不及其各自低氧對照組,且去勢+E2組較去勢+2ME組升高更為明顯。4各組肺組織中ETAR的表達:與假手術(shù)組相比,假手術(shù)+低氧組和去勢+低氧組大鼠ETAR水平顯著升高,去勢+低氧組更甚;去勢+低氧+E2組、去勢+低氧+2ME組ETAR水平明顯升高,介于假手術(shù)+低氧組及去勢+低氧組之間,且兩組間差異無統(tǒng)計學意義;去勢組、去勢+E2組、去勢+2ME組ETAR水平亦有所升高,但升高幅度不及其各自低氧對照組,且去勢+E2組與去勢+2ME組間無明顯差異。5各組肺組織中ETBR的表達:與假手術(shù)組相比,假手術(shù)+低氧組和去勢+低氧組大鼠ETBR水平顯著降低,去勢+低氧組更甚;去勢+低氧+E2組、去勢+低氧+2ME組ETBR水平明顯降低,介于假手術(shù)+低氧組及去勢+低氧組之間,且兩組間差異無統(tǒng)計學意義;去勢組、去勢+E2組、去勢+2ME組ETBR水平亦有所降低,但降低幅度不及其各自低氧對照組,且去勢+E2組與去勢+2ME組間無明顯差異。結(jié)論:1低氧情況下,大鼠肺組織內(nèi)ET-1及ETARm RNA含量明顯增加,而ETBR m RNA含量明顯下降。2肺組織內(nèi)ET-1、ETAR表達升高及ETBR表達下降對低氧性肺動脈高壓的形成發(fā)揮了重要的作用。3 E2及其代謝產(chǎn)物2ME均可抑制大鼠肺組織的ET-1表達、減少ETAR表達,增加ETBR的表達,從而增加ETBR介導的擴血管效應,以及肺血管對ET-1的反應,緩解肺動脈高壓。4 2ME抑制ET-1釋放的能力顯著高于E2,但對ETAR ETBR含量的影響二者相差不大。
【關鍵詞】：內(nèi)皮素-1 內(nèi)皮素受體 2-甲氧基雌二醇 雌激素 低氧 大鼠 肺動脈高壓
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R544.1
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-18
• 結(jié)果18-21
• 附圖21-26
• 附表26-27
• 討論27-29
• 結(jié)論29
• 參考文獻29-34
• 綜述 內(nèi)皮素-1 及其受體與低氧性肺動脈高壓關系研究進展34-47
• 參考文獻40-47
• 致謝47-48
• 個人簡歷48

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 尹清茹,劉恒亮;厄貝沙坦對高血壓患者纖溶活性內(nèi)皮素一氧化氮降鈣素基因相關肽的影響[J];中國臨床保健雜志;2005年02期

2 張海濤,吳清玉;內(nèi)皮素的臨床研究進展[J];心血管病學進展;1999年03期

3 孫波,劉文利;右心導管測定大鼠肺動脈壓的實驗方法[J];中國醫(yī)學科學院學報;1984年06期

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本文編號：535166