[目 的]比較風(fēng)濕性二尖瓣狹窄(RMS)患者與二尖瓣脫垂患者病變瓣膜IL-35表達(dá)量是否存在差異,并進(jìn)一步分析不同病變程度的風(fēng)濕性二尖瓣狹窄與IL-35之間存在的相關(guān)關(guān)系。比較同等濃度IL-35條件下對(duì)風(fēng)濕性二尖瓣狹窄患者來源及健康對(duì)照組來源的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)進(jìn)行刺激是否存在不同的效果。明確IL-35與風(fēng)濕性二尖瓣狹窄病變瓣膜狹窄程度的相關(guān)性,初步探索IL-35的生物學(xué)作用之一刺激自分泌的作用。[方 法]1、收集以二尖瓣狹窄為主的風(fēng)濕性二尖瓣狹窄患者病變瓣膜組織,根據(jù)二尖瓣狹窄程度分為中度、重度二尖瓣狹窄兩組及以二尖瓣脫垂患者病變瓣膜組織為對(duì)照組,分別為10例中度二尖瓣狹窄患者、12例重度二尖瓣狹窄患者、5例二尖瓣脫垂患者。其中,所有患者均行二尖瓣瓣膜置換手術(shù)。通過蛋白印跡法測定瓣膜組織中IL-35的相對(duì)表達(dá)量。2、收集RMS患者來源的PBMC及健康志愿者來源的PBMC,IL-35體外刺激PBMC獲得最佳的刺激條件200ng/mLIL-35刺激48h,并在此條件下,刺激不同來源的PBMC,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)測定刺激后PBMC胞內(nèi)IL-35的表達(dá)量。[結(jié) 果]1、在瓣膜組織...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖３．ＩＬ－１２家族的成員及各自的組成的亞基及信號(hào)傳導(dǎo)通路（修改自ＣｈｏｉＪ??ｅｔａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ?ｒｅｖｉｅｗｓ?ｉｎ?ａｌｌｅｒｇｙ＆?ｉｍｍｕｎｏｌｏｙ（２０１５）?４９?（３）：３２７－３３２）?〇??

ａｒｒｖｉｒｕｓ－ｉｎｄｕｃｅｄ??ｇｅｎｅ３，Ｅｂｉ３），兩條鏈之間通過二硫鍵相結(jié)合Ｉ４１１。Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ等人于２００７年最初??報(bào)道，ＩＬ－３５是胸腺來源的天然調(diào)節(jié)性Ｔ細(xì)胞（Ｎａｔｕｒａｌ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ?Ｔｃｅｌｌｓ，ｎＴｒｅｇｓ）??群體產(chǎn)生的，且具有強(qiáng)大的免....

圖４．Ａ．經(jīng)胸心臟多普勒彩超下觀察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣；Ｂ．經(jīng)食??

圖４．Ａ．經(jīng)胸心臟多普勒彩超下觀察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣；Ｂ．經(jīng)食??道心臟多普勒彩超下觀察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣；Ｃ．正中開胸直下?lián)Q??瓣手術(shù)觀察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣．??２．２對(duì)照組的納入標(biāo)準(zhǔn)??診斷為先天性二尖瓣脫垂的患者，并進(jìn)行二尖瓣置換或者二尖瓣成形術(shù)。其??他入組條....

圖５．為手術(shù)室所采不同病變程度的風(fēng)濕性二尖瓣瓣膜組織

５．２．１血液樣本??待符合條件的入組病人進(jìn)入手術(shù)室后，從中心靜脈置管中抽�。保担恚天o脈血，??分裝于５支３ｍＬ規(guī)格的ＥＤＴＡ抗凝管中，蓋緊蓋子后置于平面上輕輕滾動(dòng)數(shù)次??充分混勻，動(dòng)作迅速輕柔，防止凝血和溶血。隨后裝于冰盒中轉(zhuǎn)移至實(shí)驗(yàn)室。若??可立即分離則置于室溫中平衡３０ｍｉ....

圖７．比較ＲＭＳ患者來源的ＰＢＭＣ與健康志愿者來源的ＰＢＭＣ在同等刺激??

圖６．前期我們探索合適的重組人ＩＬ－３５的濃度及刺激ＰＢＭＣ時(shí)間六孔板的??板布局。??３、經(jīng)上述兩步實(shí)驗(yàn)后，我們確定了最優(yōu)的刺激條件，即２００ｎｇ／ｍＬＩＬ－３５朿ＩＪ??激４８Ｌ為了明確ＲＭＳ患者來源的ＰＢＭＣ與健康志愿者來源的ＰＢＭＣ在相同刺??激條件下胞內(nèi)ＩＬ－３５的表達(dá)....

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