目的:探究在載脂蛋白E基因敲除小鼠(即Apo E-/-小鼠)頸總動脈粥樣硬化的3個時間點自噬水平的變化情況。方法:(1)40只6周齡的SPF級雄性Apo E-/-小鼠,先給與普通飼料喂養(yǎng)2周,隨后隨機分成對照組(10只)與模型組(30只)。對照組進行假手術(shù)(Apo E-/-小鼠右側(cè)頸總動脈旁放置硅膠管)處理,而后繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng)8周;模型組給與手術(shù)(右側(cè)頸總動脈外套置硅膠管)處理,手術(shù)后隨機分成3組(2周組、4周組、8周組),每組各10只,并且均換成高脂飼料,分別喂養(yǎng)2周、4周、8周后處死。(2)分離并剪斷Apo E-/-小鼠的股動脈進行取血,檢測每只Apo E-/-小鼠血清中甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL_c)的含量。(3)Apo E-/-小鼠取血后處死,分離取出套管側(cè)頸總動脈,固定后做石蠟切片,HE染色,應(yīng)用光學(xué)顯微鏡觀察每組血管壁結(jié)構(gòu)的變化。(4)離體的套管側(cè)頸總動脈經(jīng)固定后,做超薄切片并染色,應(yīng)用透射電鏡觀察每組小鼠頸總動脈組織巨噬細胞的超微結(jié)構(gòu)。(5)提取各組Apo E-/-小鼠套管側(cè)頸總動脈組織的總RNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄后,應(yīng)用...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
材料與方法
    1 實驗動物
    2 主要儀器
    3 試劑與藥品
    4 實驗動物處理
    5 小鼠血脂的檢測
    6 ApoE^-/-小鼠套管側(cè)頸總動脈組織顯微結(jié)構(gòu)觀察
    7 頸總動脈組織超微結(jié)構(gòu)觀察
    8 實時熒光定量PCR檢測自噬相關(guān)mRNA表達
    9 Western blot檢測自噬相關(guān)蛋白的表達
    10 統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    1 ApoE^-/-小鼠血脂水平變化
    2 ApoE^-/-小鼠頸總動脈組織顯微結(jié)構(gòu)
    3 ApoE^-/-小鼠頸總動脈組織超微結(jié)構(gòu)
    4 自噬相關(guān)因子mRNA表達結(jié)果
    5 自噬相關(guān)蛋白表達結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號：3919819