發(fā)布時(shí)間：2024-03-01 19:44

　　干細(xì)胞移植因其可能促進(jìn)心肌梗死(myocardial infarction, MI)后損傷心肌的修復(fù)和再生已經(jīng)成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells, MSCs)具備許多其它干細(xì)胞沒有的優(yōu)點(diǎn)而被認(rèn)為是細(xì)胞移植治療心肌梗死的理想種子細(xì)胞。MSCs主要通過分化成心肌細(xì)胞、促進(jìn)血管新生或者旁分泌作用等實(shí)現(xiàn)心肌損傷后的修復(fù)。然而,心肌梗死導(dǎo)致心肌缺血缺氧和大量氧自由基的產(chǎn)生使移植的干細(xì)胞存活率急劇下降,嚴(yán)重影響了干細(xì)胞效應(yīng)功能的發(fā)揮。因此,深入了解心臟微環(huán)境中干細(xì)胞凋亡和抗凋亡機(jī)制能夠?yàn)樘岣吒杉?xì)胞的治療效果提供有效的理論依據(jù)。我們之前的研究已經(jīng)對(duì)缺氧無血清和過氧化氫刺激誘導(dǎo)的MSCs凋亡及其機(jī)制進(jìn)行了深入研究,并且進(jìn)一步證明了溶血磷脂酸(Lysophophatidic acid, LPA)作為一種內(nèi)源性的生物活性磷脂信號(hào)小分子可以通過G蛋白偶聯(lián)的LPA受體有效抑制缺氧無血清(hypoxia/serum deprivation, H/SD)誘導(dǎo)的MSCs的凋亡,但是LPA對(duì)過氧化氫誘導(dǎo)的MSCs凋亡是否起抑制作用尚不清楚。自噬是...

【文章頁數(shù)】：128 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1-1大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)

細(xì)胞分布均勾，呈指紋樣螺旋生長；繼續(xù)傳2-3代后，細(xì)胞生長狀態(tài)良好，保持螺旋生長方式不變，細(xì)胞呈分布均勾(Passage2和Passage3)(圖1-1)。實(shí)驗(yàn)中我們使用第2-3代（Passage2-3)MSCs。Passage0 Passage1 Passage....

圖1-2過氧化氫誘導(dǎo)MSCs的調(diào)亡呈濃度和時(shí)間依賴性

現(xiàn)出皺縮、不飽滿、體積變小、細(xì)胞核碎裂、染色質(zhì)聚集著色能力增強(qiáng)，呈亮藍(lán)色亮點(diǎn)，表明H2O2導(dǎo)致MSCs細(xì)胞發(fā)生了調(diào)亡（圖1-2A)。其中，50|aM和lOOpMH2O2誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡的百分比約為10%,而150nM，200^iM和250|^MH202誘導(dǎo)的調(diào)亡細(xì)胞百分比分別約為20....

圖1-3LPA抑制過氧化氫誘導(dǎo)的MSCs的調(diào)亡

圖1-3LPA抑制過氧化氫誘導(dǎo)的MSCs的調(diào)亡。用不同濃度LPA預(yù)處理MSCslh，然后進(jìn)行H2O2處理4h。（A)和（C)為Hoechst33342染色MSCs細(xì)胞，放大倍數(shù)為40X。（B)和（D)為AnnexinV/PI雙染標(biāo)記MSCs后進(jìn)行流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)。Annexin....

圖1-4LPA通過Lparl/3/Gi蛋白偶聯(lián)的途徑抑制過氧化氫誘導(dǎo)的大鼠MSCs調(diào)亡

北化辦和K學(xué)院中科學(xué)院 \4丨：研究卞學(xué)位論的siRNA明顯敲低（圖1-5C)。免疫印跡結(jié)果顯示：與negative-siRNA相比，Gi2-siRNA和Gi3-siRNA分別敲低并沒有完全逆轉(zhuǎn)LPA的抗調(diào)亡作用，但是它們同時(shí)敲低顯著減弱了LPA的抗御亡效應(yīng)（圖1-5D)。由此....

本文編號(hào)：3915736