背景：原發(fā)性高血壓（Essential hypertension, EH）是人類最為常見的心血管疾病之一，也是心力衰竭、冠心病和腦卒中等疾病的重要危險因素，嚴重影響人類健康及壽命。目前多個研究表明線粒體基因（mtDNA）突變與高血壓發(fā)病存在相關性，即母系遺傳。相關研究指出，mtDNA突變可能是通過改變線粒體能量的合成、活性氧(reactive oxygen specie, ROS)的產生及鈣穩(wěn)態(tài)等線粒體功能來影響血壓的。那么線粒體功能與EH間存在怎樣的關系，在高血壓中是否發(fā)生了線粒體功能的改變，發(fā)生了怎樣的改變，這將為人類在線粒體基礎上研究高血壓發(fā)病機制提供有力的理論依據。 目的：研究自發(fā)性高血壓大鼠胸主動脈平滑肌細胞（VSMCs）線粒體功能的變化。 方法：（1）取19—20周的雄性自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）及相應年齡段的雄性正常大鼠（WKY），利用貼壁法培養(yǎng)出VSMCs，取第3代穩(wěn)定的細胞作為研究對象；（2）鏡下觀察、比較高血壓組與正常組細胞的形態(tài)改變，利用熒光法檢測細胞內ATP水平，并利用流式細胞儀檢測兩組細胞的ROS及線粒體膜電位水平；（3）取106的細胞，分別提取RNA，rea...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1制備VSMCs所用SHR大鼠

圖1制備VSMCs所用SHR大鼠經75%的酒精浸泡消毒2-3min，橡皮筋迅速固定于解圖2制備VSMCs的超凈臺要經過紫外燈常規(guī)消毒30min以上，酒精棉球擦拭超凈

圖2制備VSMCs的超凈臺在超凈臺中使用前要經過紫外燈常規(guī)消毒30min以上，酒精棉球擦拭超凈臺臺面，酒精燈保

16圖2制備VSMCs的超凈臺要經過紫外燈常規(guī)消毒30min以上，酒精棉球擦拭超凈及生長特點細胞的狀態(tài)與組織塊被剪碎的程度以及組織碎不一時，影響了組織的鋪平，一方面細胞爬出的），另外就是細胞長出的狀態(tài)普遍都比較差，不得過碎或者組織塊過大，細胞都不易長出。貼壁時間過長....

圖3自平滑肌中組織塊生長中的VSMCs（100×）

是正常大鼠平滑肌細胞一般提早半天傳代。而狀態(tài)好于高血壓的平滑肌細胞（主要表現(xiàn)在細還有生長的速度等）。一般在第5天就會從平滑肌組織邊緣爬出（如態(tài)大小不一，疏密程度不一，生長較為雜亂，但豐富。一般在7天左右即可以進行半換液，而底（如圖4），細胞的形態(tài)大小不一，平滑肌細質豐富....

圖4爬滿瓶底的VSMCs（100×）

圖4爬滿瓶底的VSMCs（100×）胞相比，細胞間生長緊密相連，呈接觸抑制性生長狀態(tài)有剛長出來時透亮。圖5消化后懸浮的VSMCs（100×）

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