發(fā)布時(shí)間：2024-02-20 20:06

　　目的:Apelin是G蛋白偶聯(lián)受體APJ的內(nèi)源性配體,前期研究表明,apelin12、17、36及ELABELA濃度依賴性誘導(dǎo)血小板聚集和血栓形成,apelin13則抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集和血栓形成。本課題進(jìn)一步闡明不同G蛋白和βarrestin通路介導(dǎo)apelins和ELABELA對血小板聚集和血栓形成的影響。方法:1.應(yīng)用比濁法檢測人、新西蘭兔和APLNR^+/-小鼠血小板聚集率變化;2.體外血栓檢測儀分析兔體外血栓形成情況;3.Western blot實(shí)驗(yàn)比較人血小板中APJ表達(dá)差異;4.免疫熒光檢測兔血小板上半通道蛋白pannexin 1表達(dá);5.ELISA檢測血小板βarrestin變化。結(jié)果:1.人血小板上表達(dá)APJ受體,高聚集率血小板上APJ受體表達(dá)上調(diào);2.Apelin12、17、36和ELABELA誘導(dǎo)人血小板聚集,Apelin13抑制ADP誘導(dǎo)的人血小板聚集;3.敲低APJ受體會減弱apelin對血小板活性的調(diào)節(jié)作用;4.Gq蛋白抑制劑YM254890抑制apelin12、17、36和ELABELA誘導(dǎo)的兔血小板聚集和體外血栓形成,但不影響a...

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第1章 緒論
    1.1 Apelin/APJ系統(tǒng)
    1.2 血小板激活、血栓形成與抗血栓治療
    1.3 血小板上的G蛋白信號途徑
    1.4 新型pannexin1 抑制劑螺內(nèi)酯
第2章 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 實(shí)驗(yàn)對象
    2.2 主要試劑和材料
    2.3 主要儀器
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 血液樣本采集
    3.2 血小板聚集實(shí)驗(yàn)
    3.3 新西蘭兔體外血栓實(shí)驗(yàn)
    3.4 洗滌血小板制備及蛋白提取
    3.5 Western blot
    3.6 血小板免疫熒光
    3.7 酶聯(lián)免疫吸附法
    3.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 人血小板上APJ受體表達(dá)檢測
    4.2 Apelin各亞型和ELABELA對人血小板聚集的影響
        (1)Apelin12、17、36和ELABELA誘導(dǎo)人血小板聚集
        (2)Apelin13 抑制ADP誘導(dǎo)的人血小板聚集
    4.3 敲低APJ受體會減弱apelin對血小板活性的調(diào)節(jié)作用
    4.4 Gq蛋白抑制劑YM254890對apelin各亞型和ELABELA誘導(dǎo)兔血小板聚集和體外血栓形成的影響
        (1)Gq蛋白抑制劑YM254890 抑制apelin12、17、36 和ELABELA誘導(dǎo)的兔血小板聚集和體外血栓形成
        (2)Gq蛋白抑制劑YM254890 不能拮抗apelin13 抑制ADP誘導(dǎo)的兔血小板聚集和體外血栓形成
    4.5 Gi蛋白抑制劑PTX對 apelin各亞型和ELABELA誘導(dǎo)兔血小板聚集和體外血栓形成的影響
        (1)Gi蛋白抑制劑PTX拮抗apelin13 抑制ADP誘導(dǎo)的兔血小板聚集和體外血栓形成
        (2)Gi蛋白抑制劑PTX不能抑制apelin12、17、36和ELABELA誘導(dǎo)的兔血小板聚集和體外血栓形成
    4.6 磷脂酶C抑制劑U-73122 抑制apelin12、17、36和ELABELA誘導(dǎo)的兔血小板聚集
    4.7 新型pannexin1 抑制劑螺內(nèi)酯抑制apelin12、17、36 和ELABELA誘導(dǎo)的兔血小板聚集
    4.8 ATP酶 apyrase有效抑制apelin12、17、36和ELABELA誘導(dǎo)的兔血小板聚集
    4.9 Apelin13 誘導(dǎo)兔血小板抑制蛋白βarrestin募集
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者攻讀學(xué)位期間的科研成果
文獻(xiàn)翻譯
致謝



本文編號：3904467