背景:冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病是心血管疾病的重要組成部分,也是全球范圍內(nèi)的主要死亡原因。缺血/再灌注(I/R)損傷是一直冠心病治療中的難題,而心肌缺血/再灌注損傷則是由多種機(jī)制介導(dǎo)的復(fù)雜的過(guò)程,其復(fù)雜機(jī)制目前仍未完全解釋清楚。研究表明細(xì)胞凋亡、炎癥和氧化應(yīng)激都在心肌缺血/再灌注損傷中起著至關(guān)重要的作用。缺血觸發(fā)心肌細(xì)胞炎癥,然后通過(guò)再灌注擴(kuò)大和促進(jìn)心臟死亡,其中單核細(xì)胞、白細(xì)胞在缺血后不久,就會(huì)和其他炎癥細(xì)胞就會(huì)浸潤(rùn)受傷區(qū),活化的巨噬細(xì)胞分泌促炎細(xì)胞因子,招募中性粒細(xì)胞,進(jìn)一步促進(jìn)心肌損傷。缺血/再灌注損傷后的炎癥反應(yīng)進(jìn)一步加重了心肌損害。此外,心肌缺血/再灌注損傷誘導(dǎo)氧自由基的產(chǎn)生,這可能進(jìn)一步觸發(fā)細(xì)胞炎癥和凋亡。由此可見(jiàn),炎癥在缺血/再灌注過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用。高溫需求蛋白A3(Htr A3)是Htr A家族的一個(gè)組成部分,而Htr A3在炎癥中作用的研究目前仍比較少。我們探討了Htr A3在缺氧后復(fù)氧誘導(dǎo)的H9C2心肌細(xì)胞中炎癥細(xì)胞因子的分泌和NF-κB信號(hào)通路中的作用,進(jìn)而初步探究Htr A3在心肌缺血/再灌注損傷中的作用及調(diào)節(jié)機(jī)制,為未來(lái)心肌細(xì)胞缺血/再灌注損傷炎癥反應(yīng)的...

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.4 實(shí)驗(yàn)試劑配制
3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 細(xì)胞傳代培養(yǎng)
    3.2 H9C2心肌細(xì)胞模擬缺血/再灌注損傷模型
    3.3 細(xì)胞凍存
    3.4 細(xì)胞復(fù)蘇
    3.5 細(xì)胞分組
    3.6 質(zhì)粒提取
    3.7 細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
    3.8 蛋白的提取
    3.9 蛋白定量
    3.10 蛋白免疫印跡法(western blot)
    3.11 RNA提取和實(shí)時(shí)熒光定量法(RT-PCR)
    3.12 LDH活性測(cè)定
    3.13 ELISA
    3.14 統(tǒng)計(jì)分析
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 Htr A3在H/R誘導(dǎo)的H9C2 細(xì)胞中的表達(dá)變化
    4.2 H/R誘導(dǎo)的H9C2細(xì)胞中的促炎癥細(xì)胞因子表達(dá)明顯升高
    4.3 成功過(guò)表達(dá)與沉默H9C2 心肌細(xì)胞中Htr A3
    4.4 過(guò)表達(dá)Htr A3 減少H/R誘導(dǎo)的H9C2 細(xì)胞中的促炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)
    4.5 沉默Htr A3 促進(jìn)H/R誘導(dǎo)的H9C2 細(xì)胞中促炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)
    4.6 Htr A3對(duì)H/ R誘導(dǎo)的H9C2 細(xì)胞中NF-κB信號(hào)通路的影響
5 討論
6 結(jié)論
7 參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 micro RNAs 在心肌缺血/再灌注損傷中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3903197