目的 探討鐵過載對骨髓造血干祖細(xì)胞造血功能的影響及作用機(jī)制。 方法 1.通過4Gy γ,射線全身照射和(或)右旋糖酐鐵腹腔注射建立正常和骨髓損傷情況下的鐵過載小鼠模型,通過①病理組織切片蘇木精-伊紅染色/普魯士藍(lán)鐵染色的方法分析鐵過載小鼠肝臟、脾臟、骨髓的形態(tài)及鐵沉積情況；②流式細(xì)胞儀檢測骨髓單個核細(xì)胞(BMMNCs)內(nèi)可變鐵池(LIP)水平驗證鐵過載模型的成功建立。 2.使用細(xì)胞計數(shù)儀檢測外周血象及BMMNCs數(shù)目；采用流式細(xì)胞術(shù)分析各系造血細(xì)胞比例；采用甲基纖維素半固體培養(yǎng)法檢測造血祖細(xì)胞增殖功能；采用競爭性移植實驗分析骨髓細(xì)胞移植后造血重建能力；采用磁珠結(jié)合流式細(xì)胞儀分選造血干細(xì)胞單克隆培養(yǎng)檢測造血干細(xì)胞增殖功能。 3.采用2’,7’-二氯熒光黃雙乙酸鹽(DCFH-DA)探針檢測鐵過載前后骨髓細(xì)胞活性氧(ROS)水平；使用Real-time PCR方法檢測ROS相關(guān)基因NOX4、GPX水平的表達(dá)。 4.經(jīng)地拉羅司(DFX)去鐵或經(jīng)NAC抗氧化治療后,檢測上述指標(biāo)的變化。 結(jié)果 1.小鼠肝臟、脾臟、骨髓內(nèi)可見大量鐵沉積,BMMNCs內(nèi)LIP水平明顯升高,提示鐵過載模型成功建立； 2...

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、 小鼠鐵過載模型的建立及其對骨髓造血功能的影響
    1.1 對象和方法
        1.1.1 實驗材料
        1.1.2 實驗方法
        1.1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 鐵過載小鼠的一般表現(xiàn)
        1.2.2 小鼠鐵過載模型的建立
        1.2.3 鐵過載對外周血象和骨髓單個核細(xì)胞數(shù)目的影響
        1.2.4 鐵過載對造血干祖細(xì)胞數(shù)量的影響
        1.2.5 鐵過載損傷造血祖細(xì)胞的增殖功能
        1.2.6 鐵過載損傷造血干細(xì)胞的增殖功能
        1.2.7 鐵過載抑制造血干細(xì)胞造血重建能力
        1.2.8 鐵過載提升骨髓各系細(xì)胞ROS水平
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、 鐵過載對骨髓損傷小鼠造血功能的作用及機(jī)制研究
    2.1 材料和方法
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗方法
        2.1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 骨髓損傷小鼠鐵過載模型的建立
        2.2.2 骨髓損傷小鼠鐵過載對BMMNCs數(shù)目及比例的影響
        2.2.3 骨髓損傷小鼠鐵過載對骨髓造血祖細(xì)胞功能的影響
        2.2.4 骨髓損傷小鼠鐵過載對骨髓造血干細(xì)胞功能的影響
        2.2.5 骨髓損傷小鼠鐵過載對造血干細(xì)胞造血重建能力的影響
        2.2.6 骨髓損傷小鼠鐵過載對外周血象的影響
        2.2.7 鐵過載小鼠脾臟瑞氏染色情況
        2.2.8 鐵過載引起脾臟髓外造血
        2.2.9 骨髓損傷小鼠鐵過載對各系ROS水平的影響
        2.2.10 鐵過載對受照小鼠c-kit+細(xì)胞內(nèi)NOX4和GPX表達(dá)的影響
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述一 鐵過載在血液系統(tǒng)疾病中的危害及其治療研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
綜述二 活性氧物質(zhì)與骨髓造血干細(xì)胞衰老研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3855506