缺氧誘導(dǎo)因子-1在心肌細胞缺氧、復(fù)氧損傷中的作用及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與藥物干預(yù)研究
發(fā)布時間:2023-08-13 18:50
目的觀察阿托伐他。ˋTV)和PI3K信號通路的抑制劑渥曼青霉素(WT)對心肌細胞缺氧/復(fù)氧(H/R)損傷的影響,及其對缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)、葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白-1(GLUT-1)和血紅素加氧酶-1(HO-1)mRNA表達的影響,探討阿托伐他汀和PI3K信號通路保護心肌細胞缺氧復(fù)氧損傷的機制,為臨床預(yù)防和治療心肌缺血再灌注損傷提供新的思路。 方法分離SD乳鼠(出生1~3天)心肌細胞進行原代培養(yǎng),免疫細胞化學(xué)鑒定心肌細胞;建立H/R模型;取培養(yǎng)第3~4天的心肌細胞隨機分成5組:正常對照組(Control組)、H/R組、H/R+ATV組、H/R+WT組和H/R+ATV+WT組;倒置顯微鏡下觀察心肌細胞形態(tài)學(xué)變化并計數(shù)細胞搏動頻率;應(yīng)用MTS法檢測心肌細胞的存活率;化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測心肌細胞特異性損傷指標(biāo)肌鈣蛋白I(cTnI)的含量;采用SYBR GREEN熒光定量PCR檢測HIF-1α、VEGF、GLUT-1和HO-1mRNA表達水平。應(yīng)用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計分析,組間比較采用One-Way ANOVA分析,兩兩比較采用LSD分析, P&...
【文章頁數(shù)】:51 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
目錄
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
材料方法
一、實驗材料
(一) 主要試劑
(二) 主要器材
(三) 主要試劑的配制
二、實驗方法
(一) 乳鼠心肌細胞原代培養(yǎng)及鑒定
(二) 乳鼠心肌細胞缺氧復(fù)氧(H/R)模型的建立及鑒定
(三) 實驗分組
(四) 各組心肌細胞形態(tài)學(xué)觀察及搏動頻率的比較
(五) 心肌細胞特異性損傷指標(biāo)肌鈣蛋白 I(cTnI)水平的測定
(六) MTS 法檢測心肌細胞的存活率
(七) 心肌細胞 HIF-1α、VEGF、GLUT-1、HO-1mRNA 表達的檢測
(八) 統(tǒng)計學(xué)處理
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
致謝
綜述
參考文獻
本文編號:3841744
【文章頁數(shù)】:51 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
目錄
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
材料方法
一、實驗材料
(一) 主要試劑
(二) 主要器材
(三) 主要試劑的配制
二、實驗方法
(一) 乳鼠心肌細胞原代培養(yǎng)及鑒定
(二) 乳鼠心肌細胞缺氧復(fù)氧(H/R)模型的建立及鑒定
(三) 實驗分組
(四) 各組心肌細胞形態(tài)學(xué)觀察及搏動頻率的比較
(五) 心肌細胞特異性損傷指標(biāo)肌鈣蛋白 I(cTnI)水平的測定
(六) MTS 法檢測心肌細胞的存活率
(七) 心肌細胞 HIF-1α、VEGF、GLUT-1、HO-1mRNA 表達的檢測
(八) 統(tǒng)計學(xué)處理
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
致謝
綜述
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本文編號:3841744
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