目的:觀察NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3(Nod-like receptor pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)炎癥小體是否參與單純皰疹病毒1型(herpes simplex virus-1,HSV-1)誘導(dǎo)的病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)的病理過程。方法:培養(yǎng)乳鼠心室肌細(xì)胞(neonatal rat ventricular myocytes,NRVM),分別以0.01 PFU和0.1 PFU HSV-1感染NRVM,24 h后通過光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,實(shí)時定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)測定NLRP3炎癥小體及其下游通路的mRNA表達(dá)水平,免疫熒光(immunofluorescence,IF)顯示半胱天冬酶(cysteinyl aspartate-specific proteases,Caspase)-1的表達(dá),全自動生化儀測定細(xì)胞上清肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase-MB,CK-MB)的含量以及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-li...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 原代乳鼠心室肌細(xì)胞分離及培養(yǎng)
        1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組及病毒感染方法
        1.2.3 q RT-PCR檢測
        1.2.4 IF檢測培養(yǎng)細(xì)胞Caspase-1表達(dá)
        1.2.5 培養(yǎng)上清CK-MB及IL-18檢測
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 HSV-1感染心肌細(xì)胞致CPE現(xiàn)象觀察
    2.2 HSV-1感染心肌細(xì)胞致心肌損傷標(biāo)志物CK-MB水平增高
    2.3 HSV-1感染心肌細(xì)胞致NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18 m RNA水平增高
    2.4 HSV-1感染心肌細(xì)胞致Caspase-1含量增高
    2.5 HSV-1感染心肌細(xì)胞致IL-18釋放增加
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