目的探討微小RNA-610(miR-610)對(duì)血小板源生長(zhǎng)因子-BB(PDGF-BB)誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)的增殖、遷移和侵襲的影響及其機(jī)制。方法雙熒光素酶報(bào)告基因分析法驗(yàn)證miR-610對(duì)起始識(shí)別復(fù)合物1(ORC1)的靶向作用。將VSMCs分為8組:空白組、實(shí)驗(yàn)組(PDGF-BB處理)和第1至第6轉(zhuǎn)染組(分別轉(zhuǎn)染miR-NC、miR-610模擬物、si-NC、si-ORC1、miR-610+pcDNA、miR-610+pcDNA-ORC1后,進(jìn)行PDGF-BB處理)。用噻唑藍(lán)法、Transwell實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)細(xì)胞活性和遷移、侵襲能力。結(jié)果 miR-610靶向負(fù)性調(diào)控ORC1表達(dá)�？瞻捉M、實(shí)驗(yàn)組、第1轉(zhuǎn)染組至第6轉(zhuǎn)染組細(xì)胞活力(48 h)分別為0.41±0.04,0.64±0.07,0.72±0.07,0.48±0.05,0.65±0.06,0.48±0.05,0.45±0.05和0.64±0.06;這8組的遷移細(xì)胞數(shù)分別為(38.46±6.38),(86.39±8.16),(89.34±8.25),(52.39±5.11),(86.73±8.23),(59.63±5.25...

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【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)、分組和處理[4]
        2.2 以qRT-PCR檢測(cè)miR-610和ORC1基因表達(dá)水平[5]
        2.3 以MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力[5]
        2.4 以Transwell法檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲能力[5]
        2.5 以蛋白質(zhì)印記檢測(cè)蛋白表達(dá)水平[6]
        2.6 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)[6]
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 PDGF-BB對(duì)VSMCs 中miR-610和ORC1表達(dá)的影響
    2 miR-610過(guò)表達(dá)對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs 增殖的影響
    3 miR-610過(guò)表達(dá)對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs 遷移、侵襲及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    4 抑制ORC1表達(dá)對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs 增殖、遷移、侵襲及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    5 ORC1過(guò)表達(dá)逆轉(zhuǎn)了miR-610過(guò)表達(dá)對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs增殖、遷移、侵襲及相關(guān)蛋白表達(dá)的作用
    6 miR-610靶向調(diào)控ORC1的表達(dá)
討 論



本文編號(hào)：3834126