紅細胞再生障礙性貧血（Diamond-Blackfan anemia, DBA）是一種遺傳性骨髓衰竭綜合征，患者主要表現(xiàn)為先天性紅細胞發(fā)育不良以及相關的身體畸形，嚴重影響其生命健康。臨床研究發(fā)現(xiàn)有多于50%的患者伴有不同的核糖體基因突變，其中有將近20%的患者表現(xiàn)為核糖體蛋白RPL5和RPL11異常。然而在DBA患者中，RPL5和RPL11缺陷致使造血功能異常的機制尚未被完全闡明。本研究以斑馬魚為模式生物，通過顯微注射嗎啡琳類似物修飾的反義寡核苷酸RPL5MO（morpholino）和RPL11MO分別獲取RPL5和RPL11缺陷的斑馬魚胚胎，通過全基因組RNA-Seq數(shù)據分析，O-染色，蘇丹黑B-染色，血細胞相關標記基因的胚胎整體原位雜交以及血液血管相關標記基因的實時定量來檢測RPL5和RPL11缺陷對血液生發(fā)的影響，并分析證實RPL5和RPL11缺失導致造血功能不足；通過相應RPL5MO和RPL11MO分別與p53MO共注射實驗以及Western Blotting檢測磷酸化的AKT（pAKT），磷酸化的ERK（pERK）各自含量的變化，從而探索RPL5和RPL11缺失致使造血功能不...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
引言
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 實驗方法
2 結果
    2.1 RPL5 和 RPL11 缺陷對斑馬魚胚胎形態(tài)特征的影響
    2.2 檢驗 RPL5 MO 和 RPL11 MO 功效的載體構建及檢驗
    2.3 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑馬魚生物信息學分析
    2.4 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑馬魚胚胎經典染色
    2.5 血液相關標記基因探針的制備
    2.6 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑馬魚胚胎原位雜交
    2.7 p53 途徑與 RPL5 和 RPL11 缺陷致使造血功能不足
    2.8. RT-PCR 分析血液相關標記基因的表達
    2.9 PI3K/AKT,MAPK/ERK 通路與 RPL 缺陷致使造血功能不足
3 討論
    3.1 本研究概述
    3.2 通過 MO 技術獲取 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑馬魚胚胎
    3.3 RPL5 和 RPL11 缺陷致使造血功能不足
    3.4 RPL5 和 RPL11 缺陷致使造血功能不足的相關信號機制
致謝
參考文獻
碩士期間研究成果
附錄



本文編號：3824693