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低剪切應力通過CX3CR1/NF-κB通路誘導HUVECs炎癥反應的研究

發(fā)布時間:2023-04-27 21:22
  目的:探討CX3CR1/NF-κB通路在低剪切應力誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)炎癥反應中的作用。方法:1.用完全培養(yǎng)基(M199:胎牛血清:青鏈霉素=100:10:1)培養(yǎng)EA.hy926人臍靜脈內(nèi)皮細胞株。內(nèi)皮細胞株的形態(tài)通過光學顯微鏡及電子顯微鏡觀察,通過免疫組織化學和生長曲線的方法對內(nèi)皮細胞株進行鑒定。2.對內(nèi)皮細胞施加處理,分別是正常對照組(control,C),陰性對照組(negative control,NC),低剪切應力組(low shear stress,LSS)(4.14dyn/cm2,2h),CX3CR1基因沉默組(ShCX3CR1),低剪切應力+CX3CR1基因沉默組(LSS+ShCX3CR1),低剪切應力+PDTC(NF-κB P65抑制劑)組(LSS+PDTC),qRT-PCR檢測內(nèi)皮細胞中CX3CR1 mRNA的表達情況,Western-blotting檢測內(nèi)皮細胞中CX3CR1,NF-κB P65,IκB,ICAM-1,VCAM-1,IL-6的蛋白...

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
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摘要
Abstract
前言
研究內(nèi)容與方法
    1 試劑與儀器
        1.1 試劑
        1.2 儀器
    2 實驗內(nèi)容與方法
        2.1 EA.hy926 細胞株的培養(yǎng)和鑒定
        2.2 慢病毒感染
        2.3 低剪切應力加載系統(tǒng)
        2.4 實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)
        2.5 蛋白免疫印跡(Western Blotting)
        2.6 細胞功能實驗
    3 質(zhì)量控制
    4 統(tǒng)計學處理
    5 技術路線圖
結果
討論
小結
致謝
參考文獻
綜述
    參考文獻
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本文編號:3803088

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