目的本實(shí)驗(yàn)主要在細(xì)胞水平上研究親環(huán)蛋白A是否通過(guò)AKT/Nox2信號(hào)通路調(diào)控大鼠心肌細(xì)胞H9c2在缺氧/復(fù)氧條件下誘導(dǎo)的凋亡。方法在體外培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞H9c2,通過(guò)蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測(cè)β-actin、BAX、Bcl-2、Caspase-3、Nox1、Nox2、Nox4、AKT、p-AKT-Ser473的蛋白表達(dá)量;使用流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry,FCM)和TUNEL試劑盒檢測(cè)H9c2細(xì)胞的凋亡率;通過(guò)二氫乙錠(Dihydroethidium,DHE)染色和電子自旋共振波譜儀(Electron Spin Resonance,ESR)測(cè)定H9c2細(xì)胞中活性氧自由基(Reactive oxygen species,ROS)和依賴于煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(Reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶的O2-的含量。應(yīng)用AKT抑制劑和NADPH氧化酶2(NADPH oxidase 2,Nox2)抑制劑分別抑制AKT蛋白和Nox2蛋白的表達(dá)水平及其活性,并同時(shí)檢測(cè)凋亡蛋白和抗凋亡...

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 研究背景
    1.2 本研究的目的、內(nèi)容
第二章 親環(huán)蛋白A通過(guò)AKT/Nox2 信號(hào)通路調(diào)控心肌細(xì)胞在缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)下的凋亡
    2.1 材料
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑及耗材
        2.1.3 緩沖液及其他溶液
    2.2 方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 分組及細(xì)胞處理
        2.2.3 提細(xì)胞蛋白和 Western blot
        2.2.4 流式細(xì)胞術(shù)
        2.2.5 TUNEL
        2.2.6 DHE熒光探針
        2.2.7 電子自旋共振
        2.2.8 共聚焦顯微鏡
        2.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 細(xì)胞外的 CyPA 抑制了在缺氧/復(fù)氧條件下 H9c2 細(xì)胞的凋亡
        2.3.2 細(xì)胞外的 CyPA 降低了缺氧/復(fù)氧條件下 H9c2 細(xì)胞中 O2
-的產(chǎn)量
        2.3.3 AKT/Nox2 信號(hào)通路對(duì)CyPA在逆轉(zhuǎn)缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中的作用
        2.3.4 在缺氧/復(fù)氧的條件下，抑制 AKT/Nox2 信號(hào)通路部分地消除了CyPA介導(dǎo)的保護(hù)作用
        2.3.5 親環(huán)蛋白A對(duì)缺氧/復(fù)氧條件下H9c2中Nox2 膜結(jié)合亞基的表達(dá)的影響
        2.3.6 機(jī)制示意圖
    2.4 討論
第三章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號(hào)：3791858

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