發(fā)布時間：2023-03-31 07:45

　　目的:探討微小RNA-142-3p(miR-142-3p)對動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)進程中人主動脈內皮細胞(human aortic endothelial cells,HAECs)凋亡的影響及作用機制。方法:HAECs經氧化型低密度脂蛋白(oxi?dized low-density lipoprotein,ox-LDL)作用后,采用RT-qPCR檢測miR-142-3p的表達水平。Annexin V-FITC/PI雙染法流式細胞術(flow cytometry,FCM)和caspase-3活性檢測試劑盒檢測細胞凋亡。使用Target Scan等生物信息學軟件預測miR-142-3p的潛在靶基因,雙螢光素酶報告基因實驗驗證miR-142-3p與Rictor mRNA 3′-UTR直接靶向結合。結果:在ox-LDL誘導HAECs凋亡過程中miR-142-3p表達顯著上調(P<0.05,P<0.01)。過表達miR-142-3p促進HAECs凋亡,相反,抑制miR-142-3p的表達水平可以部分程度緩解ox-LDL介導的內皮細胞(endothelia...

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【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料
    2 方法
        2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2 細胞表型鑒定
        2.3 細胞轉染和細胞處理
        2.4 caspase-3活性檢測和流式細胞術檢測細胞凋亡
        2.5 CCK-8實驗測定細胞活力
        2.6 RT-q PCR檢測mi RNA的水平
        2.7 Western blot檢測蛋白水平
        2.8 RT-q PCR檢測m RNA的表達
        2.9 雙螢光素酶報告基因實驗
    3 統(tǒng)計學處理
結果
    1血管內皮細胞鑒定
    2 mi R-142-3p在HAECs凋亡過程中表達上調
    3 Rictor是mi R-142-3p在HAECs中的靶基因之一
    4 下調mi R-142-3p抑制HAECs的凋亡
    5 mi R-142-3p通過靶向Rictor調節(jié)HAECs凋亡
    6 Akt/e NOS信號通路參與了mi R-142-3p對HAECs凋亡的調控
討論



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