目的:研究miR-152-3p與PTEN在Stanford A型急性主動(dòng)脈夾層中的表達(dá),以及二者之間的互作關(guān)系對(duì)急性主動(dòng)脈夾層發(fā)生的影響。方法:1)收集來(lái)我院行主動(dòng)脈夾層手術(shù)病人的主動(dòng)脈壁組織標(biāo)本30例作為夾層組,行冠狀動(dòng)脈搭橋手術(shù)病人的主動(dòng)脈壁組織標(biāo)本30例作為對(duì)照組,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測(cè)miR-152-3p的相對(duì)表達(dá)量,蛋白質(zhì)印跡法（western blot）檢測(cè)PTEN蛋白的相對(duì)表達(dá)量,HE染色、Masson染色觀察主動(dòng)脈壁組織形態(tài)。2)培養(yǎng)人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,分別將miR-152-3p mimic、miR-152-3p mimic control、miR-152-3p inhibitor、mi R-152-3p inhibitor control、空白對(duì)照組（分別為mimic組、mimi-con組、inhibitor組、inhibitor-con組、NC組）對(duì)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染,完成轉(zhuǎn)染操作后,在溫箱中培養(yǎng)6h后,置換新鮮的完全培養(yǎng)基,接著培養(yǎng)48h后收集細(xì)胞,采用western blot法檢測(cè)PTEN蛋白及PTEN/AKT通路上相關(guān)蛋白的表達(dá),采用流式... 

【文章頁(yè)數(shù)】：47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
1 前言
2 材料與方法
    2.1 研究對(duì)象
    2.2 主要試劑與儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 qRT-PCR檢測(cè)mi R-152-3p、PTEN mRNA的表達(dá)
        2.3.2 western blot檢測(cè)蛋白表達(dá)差異
        2.3.3 HE、Masson染色
        2.3.4 血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
        2.3.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡
        2.3.6 統(tǒng)計(jì)方法
3 結(jié)果
    3.1 miR-152-3p在主動(dòng)脈壁組織中的表達(dá)
    3.2 PTEN在主動(dòng)脈壁中的表達(dá)
    3.3 組織學(xué)病理結(jié)果
        3.3.1 HE染色結(jié)果
        3.3.2 Masson染色結(jié)果
    3.4 qRT-PCR驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效率
        3.4.1 轉(zhuǎn)染后miR-152-3p的表達(dá)
        3.4.2 轉(zhuǎn)染后PTEN m RNA的表達(dá)
    3.5 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)差異
        3.5.1 過(guò)表達(dá)miR-152-3p對(duì) PTEN、Bax、Bcl-2、p-Akt/Akt的影響
        3.5.2 抑制miR-152-3p的表達(dá)對(duì)PTEN、Bax、Bcl-2、p-Akt/Akt的影響
    3.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡水平
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性及自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3707283