目的研究5-羥色胺（5-HT）介導(dǎo)的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖是否與細(xì)胞內(nèi)活性氧（reactive oxygen species, ROS）升高有關(guān),并明確NADPH氧化酶（NADPH oxidase, NOX）在ROS產(chǎn)生及可能由此導(dǎo)致的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖中的作用。方法組織塊法建立人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（pulmonary artery smooth muscle cells, PASMCs）細(xì)胞系。分別設(shè)置正常對(duì)照組,不加任何藥物; 5-HT組,給予5-HT（1μmol/L）刺激細(xì)胞;各干預(yù)組分別給予ROS清除劑Tempol（100μmol/L）、NOX抑制劑DPI（20μmol/L）、ERK抑制劑PD98059（30μmol/L）預(yù)處理,再加入5-HT刺激不同時(shí)間。處理完成后測(cè)定各組NOX活性,采用DCF-DA熒光探針檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS的生成,3H-TdR摻入法檢測(cè)PASMCs的增殖,免疫印跡雜交法檢測(cè)ERK1/2磷酸化水平。結(jié)果研究發(fā)現(xiàn)5-HT刺激可明顯增強(qiáng)NOX活性（P＜0.05）,引起ROS的增加（P＜0.05）,DNA合成增加（P＜0.05）,ERK1/2磷酸化水平增加（P＜0.0... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑與儀器
    1.2 PASMC的培養(yǎng)及分組
    1.3 [3H]胸苷摻入測(cè)定
    1.4 NOX活性測(cè)定
    1.5 細(xì)胞內(nèi)ROS含量檢測(cè)
    1.6 磷酸化ERK1/2的測(cè)定
    1.7 統(tǒng)計(jì)
2 結(jié)果
    2.1 3H-TdR摻入量法檢測(cè)結(jié)果
    2.2 NOX活性測(cè)定結(jié)果
    2.3 細(xì)胞內(nèi)ROS水平檢測(cè)結(jié)果
    2.4 磷酸化ERK1/2水平測(cè)定結(jié)果
3 討論



本文編號(hào)：3701705