目的本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建RAW264.7源性泡沫細(xì)胞模型,探討CTRP9對RAW264.7巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白ABCA1、ABCG1、LXRa的表達(dá)及膽固醇含量影響,進(jìn)一步闡述其可能的機(jī)制。方法:1.體外培養(yǎng)RAW264.7細(xì)胞,加入終濃度為50mg/L氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）干預(yù),再孵育24h,將其誘導(dǎo)成泡沫細(xì)胞。2.實(shí)驗(yàn)分組（1）測定不同時(shí)間CTRP9對RAW264.7源性泡沫細(xì)胞各指標(biāo)及膽固醇含量影響:（1）對照組;（2）1小時(shí)實(shí)驗(yàn)組;（3）3小時(shí)實(shí)驗(yàn)組;（4）6小時(shí)實(shí)驗(yàn)組。用磷酸鹽緩沖液將CTRP9稀釋至3ug/ml,分別加入上述實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行培養(yǎng)。實(shí)時(shí)熒光定量Real-Time PCR法測定各組細(xì)胞ABCA1、ABCG1、LXRa mRNA的相對表達(dá)量,Western-blot測定各組細(xì)胞ABCA1、ABCG1、LXRa的蛋白含量,高效液相色譜測定細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量。觀察CTRP9對RAW264.7源性泡沫細(xì)胞中ABCA1、ABCG1、LXRa的影響。篩選出CTRP9對RAW264.7源性泡沫細(xì)胞的各指標(biāo)及膽固醇含量影響的最佳的時(shí)間點(diǎn)。（2）測定不同濃度CTR... 

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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前言
1 材料和方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    1.2 重要實(shí)驗(yàn)試劑
    1.3 重要實(shí)驗(yàn)儀器
    1.4 主要溶液配制
    1.5 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.6 實(shí)驗(yàn)分組
    1.7 RNA 的提取和 Real time PCR 分析
    1.8 Western-blot檢測各指標(biāo)蛋白水平的表達(dá)
    1.9 高效液相色譜法檢測細(xì)胞內(nèi)的膽固醇含量
    1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 不同時(shí)間CTRP9對RAW264.7源性泡沫細(xì)胞各指標(biāo)及膽固醇含量影響
    2.2 不同濃度CTRP9對RAW264.7源性泡沫細(xì)胞各指標(biāo)及膽固醇含量影響
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]氧化型低密度脂蛋白對THP-1巨噬細(xì)胞三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1表達(dá)的影響[J]. 唐朝克,甘露,燕春艷,劉俊文,王雙,楊峻浩,莫中成,史文元,阮長耿,楊永宗.  中國動(dòng)脈硬化雜志. 2003(06)



本文編號：3699974