目的:本實(shí)驗(yàn)的目的是以小鼠心肌細(xì)胞為研究對象,研究ALA/SFC是否可以通過HO-1誘導(dǎo)自噬以保護(hù)心肌細(xì)胞免受缺氧引起的細(xì)胞凋亡,并對其可能的機(jī)制和信號通路進(jìn)行探索。方法:分別使用ALA/SFC預(yù)處理小鼠心房心肌細(xì)胞HL-1細(xì)胞,使其暴露于缺氧狀態(tài),通過CCK-8檢測細(xì)胞存活率、TUNEL染色檢測細(xì)胞凋亡情況、MDC染色檢測細(xì)胞自噬情況、及細(xì)胞活性氧（ROS）、蛋白質(zhì)印跡分析、細(xì)胞免疫熒光染色、siRNA敲降相應(yīng)基因等實(shí)驗(yàn)步驟,對小鼠心肌細(xì)胞活性、氧化應(yīng)激水平、凋亡情況、HO-1、Nrf-2和MAPKs表達(dá)水平及自噬水平進(jìn)行評估,探討ALA/SFC在缺氧引起小鼠心肌細(xì)胞系（HL-1細(xì)胞）損傷中的作用機(jī)制。結(jié)果:ALA/SFC預(yù)處理可顯著減輕缺氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡,活性氧產(chǎn)生和線粒體損傷,同時(shí)增加細(xì)胞活力和自噬水平。ALA/SFC的HO-1表達(dá)與Nrf-2的上調(diào)和核轉(zhuǎn)位有關(guān),而Nrf-2 siRNA大幅度降低了 HO-1的表達(dá)。ERK1/2,p38和SAPK/JNK途徑被ALA/SFC激活,它們的特異性抑制劑明顯降低了ALA/SFC介導(dǎo)的HO-1上調(diào)。Nrf-2或HO-1沉默,和自噬抑制... 

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１：?ＡＬＡ／ＳＦＣ對缺氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用

圖２：?ＡＬＡ／ＳＦＣ能改善缺氧誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激以及ＡＬＡ／ＳＦＣ誘導(dǎo)ＨＬ－１細(xì)胞自噬及Ｈ０－１表達(dá)

圖３：?ＡＬＡ／ＳＦＣ增強(qiáng)了?Ｎｒｆ－２的核轉(zhuǎn)運(yùn)，Ｎｒｆ－２通過激活ＨＬ－ｌ細(xì)胞中依賴于Ｎｒｆ－２的ＭＡＰＫｓ??信號通路調(diào)節(jié)ＨＯ－１的表達(dá)？?（Ａ）?ＡＬＡ?（ｌＯＯＯｕＭ）和ＳＦＣ?（５００?ＵＭ）處理６?ｈ后ＨＬ－?

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]心肌細(xì)胞凋亡信號傳導(dǎo)通路與心肌損傷[J]. 戴日新,李浪.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2010(07)



本文編號：3697552