本文關(guān)鍵詞：運動疲勞通過調(diào)節(jié)胞內(nèi)ROS影響心肌細胞自噬的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：自噬是廣泛存在于生物體內(nèi)的一種使長壽命蛋白質(zhì)和相關(guān)細胞器降解再利用的分解代謝過程。一定程度正常生理水平下的自噬活動是一種細胞的內(nèi)源性自我保護機制,同時參加很多適應(yīng)性的免疫反應(yīng)。當(dāng)自噬過度或不足時,細胞則會出現(xiàn)穩(wěn)態(tài)失調(diào),加劇細胞損傷,嚴(yán)重時甚至?xí)䦟?dǎo)致細胞死亡。已有的研究結(jié)果表明,病理環(huán)境下和來源于外界的刺激都會不同程度下增高心肌自噬活性,該過程與多種心臟疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。我們實驗室前期研究結(jié)果證實了,不同的運動量對心臟產(chǎn)生不同的調(diào)節(jié)作用。負荷內(nèi)的水平較低運動訓(xùn)練能提高大鼠心臟功能,而當(dāng)進行的運動是高強度超負荷時,大鼠則會產(chǎn)生運動疲勞嚴(yán)重損傷心臟功能。綜上所述,我們認(rèn)為細胞自噬的活動可能在運動疲勞引發(fā)的心肌損傷這個過程中扮演了重要角色。本實驗的目的是探討大鼠心肌細胞自噬水平在運動疲勞和訓(xùn)練時發(fā)生的變化及其分子機制。利用大鼠游泳訓(xùn)練方法制備模型后,采用冰凍切片HE染色及電鏡法觀察不同運動強度下大鼠的心臟形態(tài)及組織學(xué)結(jié)構(gòu)。采用DCFH-DA探針法觀察大鼠在不同運動強度下細胞內(nèi)ROS水平。采用Western Blot法觀察不同組間大鼠的心肌細胞中LC3及p62蛋白含量以確定其自噬水平。實驗得到了如下結(jié)果,疲勞組大鼠發(fā)生心肌代償性肥大,心肌細胞受損嚴(yán)重,其ROS及自噬水平均有顯著提升;運動組大鼠心肌有增大現(xiàn)象,心肌細胞結(jié)構(gòu)完整,未發(fā)生嚴(yán)重損傷,其ROS含量略有提升而自噬水平雖不如疲勞組卻亦有大幅提升。當(dāng)注射ROS抑制劑NAC后,疲勞組大鼠的自噬水平發(fā)生了明顯的下降。以上實驗結(jié)果說明運動干涉會促進大鼠心肌細胞的自噬和ROS水平的提升。當(dāng)運動疲勞時,過度的自噬破壞了細胞結(jié)構(gòu)產(chǎn)生負性影響,而這是通過ROS相關(guān)的信號通路實現(xiàn)的。本研究為預(yù)防和治療由運動疲勞引發(fā)的心肌疾病和損傷提供了重要的理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：細胞自噬 運動疲勞 ROS 心肌細胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R54
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 1 引言8-15
• 1.1 運動疲勞的種類和產(chǎn)生機制8-9
• 1.2 運動疲勞與心肌損傷9
• 1.3 細胞自噬9-11
• 1.4 自噬與心臟疾病11-13
• 1.4.1 自噬與心肌缺血12
• 1.4.2 自噬與缺血再灌注12-13
• 1.5 ROS在運動疲勞及細胞自噬中扮演的角色13-15
• 1.5.1 ROS與運動疲勞13-14
• 1.5.2 ROS與細胞自噬14-15
• 2 實驗材料與方法15-20
• 2.1 實驗動物15
• 2.2 實驗儀器15
• 2.3 藥品與試劑15
• 2.4 主要試劑的配置15-16
• 2.5 實驗方法16-20
• 2.5.1 分組與訓(xùn)練方案16-17
• 2.5.2 HE染色法及電鏡法觀察大鼠心臟形態(tài)及組織結(jié)構(gòu)變化17-18
• 2.5.3 DCFH-DA探針法檢測大鼠心肌細胞ROS含量18-19
• 2.5.4 大鼠心肌細胞自噬水平的檢測19
• 2.5.5 統(tǒng)計分析19-20
• 3 實驗結(jié)果20-27
• 3.1 運動疲勞引起的大鼠心臟形態(tài)及組織結(jié)構(gòu)變化20-24
• 3.1.1 運動疲勞誘使大鼠心臟體重比提升20-21
• 3.1.2 運動疲勞誘使大鼠心肌細胞橫截面積增大21-22
• 3.1.3 運動疲勞誘使大鼠心肌細胞發(fā)生嚴(yán)重損傷22-23
• 3.1.4 運動疲勞誘使大鼠心肌細胞發(fā)生自噬23-24
• 3.2 大鼠不同運動條件下引起的自噬水平變化24-27
• 3.2.1 運動疲勞誘使大鼠心肌細胞中ROS水平提升24-25
• 3.2.2 運動疲勞誘導(dǎo)大鼠心肌的細胞自噬水平提升25-27
• 4 討論27-31
• 結(jié)論31-32
• 創(chuàng)新點32-33
• 參考文獻33-37
• 英文縮寫37-38
• 致謝38

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