本文關(guān)鍵詞：沉默肌腱干細(xì)胞TGIF1基因促進(jìn)腱骨愈合的相關(guān)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景及目的腱骨連接處是結(jié)締組織中的特殊形式,損傷之后很難形成纖維軟骨層,愈合能力較差。TGFβ在不同的階段通過不同的信號通路可產(chǎn)生雙向作用(成肌腱或成軟骨)。研究顯示TGIF1可抑制TGFβ通路下游軟骨基因的表達(dá)。肌腱干細(xì)胞作為新發(fā)現(xiàn)的干細(xì)胞,具有更強(qiáng)多向分化能力。本研究以肌腱干細(xì)胞為種子細(xì)胞,探討沉默肌腱干細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄生長因子影響因子1(TGIF1)對腱骨損傷的促進(jìn)作用。方法1從SD大鼠跟腱中分離、培養(yǎng)肌腱干細(xì)胞,并對其進(jìn)行鑒定,進(jìn)行成骨、成軟骨及成脂誘導(dǎo),觀察肌腱來源干細(xì)胞的克隆、增殖能力及多向分化的能力。2利用沉默或過表達(dá)TGIF1基因的肌腱干細(xì)胞進(jìn)行成軟骨誘導(dǎo),觀察各組成軟骨分化的能力。在成軟骨誘導(dǎo)后的3天、7天及21天對細(xì)胞微團(tuán)進(jìn)行定量PCR及Western blotting檢測,觀察軟骨及肌腱相關(guān)標(biāo)記基因的表達(dá)情況。3將64只成年SD大鼠隨機(jī)4組,分別為纖維蛋白+肌腱干細(xì)胞沉默TGIF1組,纖維蛋白+肌腱干細(xì)胞過表達(dá)TGIF1組,纖維蛋白+肌腱干細(xì)胞組和僅含纖維蛋白組。顯露并切斷大鼠岡上肌在肱骨大結(jié)節(jié)正常的插入點(diǎn),去除插入點(diǎn)原有的纖維軟骨,在肌腱干細(xì)胞組注射1×106 TDSCs+纖維蛋白膠,僅含纖維蛋白組植入纖維蛋白膠,肌腱干細(xì)胞沉默TGIF1組注入1×106沉默TGIF1基因的肌腱干細(xì)胞+纖維蛋白膠,肌腱干細(xì)胞過表達(dá)TGIF1組植入1×106過表達(dá)TGIF1基因的肌腱干細(xì)胞+纖維蛋白膠。分別在術(shù)2周和4周取材進(jìn)行組織學(xué)研究,評估腱骨平面的愈合情況。結(jié)果1大鼠跟腱分離的TDSCs經(jīng)分離培養(yǎng)后具有較強(qiáng)的增殖能力,表面特異性抗原CD90陽性,CD73陽性,而CD34為陰性表達(dá),多向分化實(shí)驗(yàn)顯示TDSCs具有成骨、成軟骨及成脂肪分化的能力。2沉默或過表達(dá)肌腱干細(xì)胞TGIF1基因進(jìn)行成軟骨分化,結(jié)果顯示沉默TGIF1基因的肌腱干細(xì)胞成軟骨能力增強(qiáng),而過表達(dá)TGIF1基因的肌腱干細(xì)胞成軟骨能力減弱。3通過免疫共沉淀的方法發(fā)現(xiàn)TGIF1能夠結(jié)合Smad2,抑制Smad2的磷酸化。4纖維蛋白+肌腱干細(xì)胞沉默TGIF1組術(shù)后2周在腱骨界面之間出現(xiàn)軟骨細(xì)胞纖維軟骨,術(shù)后4周腱骨界面纖維軟骨較其他各組明顯,且可見較多排列有序的膠原纖維,而纖維蛋白+肌腱干細(xì)胞過表達(dá)TGIF1組和僅含纖維蛋白組中腱骨連接處瘢痕組織明顯。在肌腱干細(xì)胞組中含有少量的纖維軟骨和瘢痕組織。Western blotting檢測纖維蛋白+肌腱干細(xì)胞沉默TGIF1組蛋白裂解物中軟骨相關(guān)蛋白較其他組多。結(jié)論這個(gè)研究顯示沉默肌腱干細(xì)胞中TGIF1的表達(dá)可以促進(jìn)腱骨連接面損傷的愈合。
【關(guān)鍵詞】：肌腱干細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄生長因子影響因子-1 腱骨愈合
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R68
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 第一部分 肌腱干細(xì)胞的提取、鑒別及多向分化的相關(guān)研究12-22
• 2 材料與方法12-18
• 3 結(jié)果18-21
• 4 討論21-22
• 第二部分 調(diào)控肌腱干細(xì)胞TGIF1 表達(dá)對腱骨愈合的實(shí)驗(yàn)研究22-42
• 2 材料與方法22-31
• 3 結(jié)果31-39
• 4 討論39-42
• 結(jié)論42
• 參考文獻(xiàn)42-49
• 附錄49-51
• 致謝51-52
• 綜述52-60
• 參考文獻(xiàn)56-60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 秦朗;;運(yùn)動(dòng)員急性運(yùn)動(dòng)損傷調(diào)查及影響因素分析[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2011年09期

  本文關(guān)鍵詞：沉默肌腱干細(xì)胞TGIF1基因促進(jìn)腱骨愈合的相關(guān)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：344862