【摘要】：目的將人髕下脂肪墊干細胞(IPFPSC)及骨關(guān)節(jié)炎軟骨細胞(OAC)進行間接共培養(yǎng),促進OAC軟骨表型的恢復(fù)及誘導(dǎo)IPFPSC向軟骨細胞分化。方法體外分離、培養(yǎng)人IPFPSC及OAC,分為單獨IPFPSC組、單獨OAC組及IPFPSC和OAC間接共培養(yǎng)組,體外成軟骨誘導(dǎo)21 d后,通過HE染色、Alcian藍染色、免疫熒光細胞化學(xué)染色檢測細胞1型膠原蛋白(Col1)、Col2、Col10、聚集蛋白聚糖(aggrecan)及SOX-9的表達情況。結(jié)果共培養(yǎng)組OAC聚集成微球,IPFPSC呈橢圓形;單獨組OAC聚集分布,排列松散,單獨組IPFPSC呈長梭形。HE染色顯示共培養(yǎng)組OAC聚集成團,核染色深,IPFPSC呈橢圓形,胞質(zhì)豐富,呈旋渦狀生長;單獨組OAC聚集分布,核染色淺;單獨組IPFPSC呈長梭形,核染色淺。Alcian藍染色顯示共培養(yǎng)組OAC及IPFPSC蛋白多糖分泌多,單獨OAC及單獨IPFPSC組分泌少。免疫熒光細胞化學(xué)染色顯示共培養(yǎng)組IPFPSC及OAC中Col2、aggrecan及SOX-9表達較強,Col1與Col10表達較弱;而單獨培養(yǎng)的IPFPSC及OAC組則相反。結(jié)論 IPFPSC和OAC間接共培養(yǎng)可以促進OAC軟骨細胞表型的恢復(fù)及誘導(dǎo)IPFPSC向軟骨細胞分化。
[Abstract]:Objective to promote the recovery of OAC cartilage phenotype and induce the differentiation of IPFPSC into chondrocytes by indirect co-culture of human infrapatellar fat pad stem cells (IPFPSC) and osteoarthritis chondrocytes (OAC). Methods Human IPFPSC and OAC, were isolated and cultured in vitro. Human IPFPSC and OAC, were divided into IPFPSC group, OAC group and IPFPSC and OAC coculture group. After 21 days of chondrogenesis in vitro, HE staining and Alcian blue staining were used. The expression of type 1 collagen (Col1), Col2,Col10, aggregation proteoglycan (aggrecan) and SOX-9 were detected by immunofluorescence cytochemical staining. Results in co-culture group, OAC gathered into microspheres and IPFPSC was oval. The aggregation distribution of OAC in single group was loose and the IPFPSC in single group was long fusiform. HE staining showed that OAC in coculture group was clustered into a cluster with deep nuclear staining, elliptical IPFPSC, rich cytoplasm and swirling growth, and OAC aggregation distribution in single group was shallow in nuclear staining. Alcian blue staining showed that OAC and IPFPSC produced more proteoglycan in coculture group than in OAC and IPFPSC group. Immunofluorescence cytochemical staining showed that the expression of Col2,aggrecan and SOX-9 in IPFPSC and OAC was stronger than that of Col1 and Col10 in co-cultured group, but the expression of Col1 and Col10 in IPFPSC and OAC group was opposite. Conclusion indirect co-culture of IPFPSC and OAC can promote the phenotype recovery of OAC chondrocytes and induce IPFPSC to differentiate into chondrocytes.
【作者單位】： 湖南師范大學(xué)第一附屬醫(yī)院;第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院關(guān)節(jié)外科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金重點項目(31130021);國家自然科學(xué)基金青年項目(31300773)
【分類號】：R684.3

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本文編號：2323563