本文關(guān)鍵詞：氯化鑭對(duì)氧化鋁陶瓷顆粒誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞釋放炎癥細(xì)胞因子影響的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的： 通過觀察氯化鑭對(duì)氧化鋁陶瓷顆粒誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞分泌炎癥細(xì)胞因子（IL-1β、TNF-α)表達(dá)的影響，探討氧化鋁陶瓷顆粒與無菌性炎癥的關(guān)系以及氯化鑭對(duì)該關(guān)系的影響，為氯化鑭作用于磨損顆粒誘導(dǎo)的人工關(guān)節(jié)無菌性松動(dòng)提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 體外培養(yǎng)小鼠RAW264.7細(xì)胞。根據(jù)培養(yǎng)液的不同，實(shí)驗(yàn)分四組8小組：空白對(duì)照組（A組），，陶瓷顆粒組（B組），陶瓷顆粒+不同濃度氯化鑭組（C組2.5μmol/L，D組10μmol/L，E組100μmol/L），不同濃度氯化鑭組（F組2.5μmol/L、G組10μmol/L、H組100μmol/L）。分組處理48h后，運(yùn)用MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況；ELISA、RT-PCR及western blot法在基因和蛋白水平檢測(cè)炎癥因子IL-1β、TNF-α、NF-κB的表達(dá)情況。 結(jié)果： MTT結(jié)果顯示各組之間未見明顯差異（P0.05）。與空白對(duì)照組（A組）相比，陶瓷顆粒組（B組）和100μmol/L （H組）的IL-1β、TNF-αmRNA和蛋白表達(dá)水平明顯增高（P 0.01）；而2.5umol/L氯化鑭（F組）和10umol/L氯化鑭（G組）與空白對(duì)照組（A組）相比未見明顯差異（P0.05）。陶瓷顆粒組（B組）在加入2.5μmol/L（C組），10μmol/L（D組）氯化鑭后，IL-1β、TNF-α mRNA和蛋白表達(dá)明顯降低（P0.05）；而加入100μmol/L （E組）未見明顯作用（P0.05）�？瞻讓�(duì)照組（A組）、2.5μmol/L氯化鑭（F組）、10μmol/L氯化鑭（G組）三組的IL-1β、TNF-αmRNA和蛋白表達(dá)低于100μmol/L氯化鑭（H組）（P 0.05）。另外我們也對(duì)NF-κB的mRNA基因和蛋白表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其變化與炎癥因子結(jié)果大致相同。 結(jié)論： （1）氧化鋁陶瓷顆粒對(duì)RAW264.7細(xì)胞增殖無明顯影響，但可刺激RAW264.7細(xì)胞分泌IL-1β、TNF-α，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)NF-κB的表達(dá)；（2）氯化鑭對(duì)磨損顆粒誘導(dǎo)的無菌性炎癥呈濃度相關(guān)性。2.5μmol/L、10μmol/L氯化鑭可明顯抑制氧化鋁陶瓷顆粒對(duì)RAW264.7細(xì)胞釋放炎癥因子IL-1β、TNF-α，并可抑制NF-κB的表達(dá)，100μmol/L氯化鑭不僅未見明顯抑制作用，甚至促進(jìn)炎癥因子IL-1β、TNF-α的釋放及NF-κB的表達(dá)（3）氯化鑭的炎癥抑制作用可能與NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：氯化鑭 氧化鋁陶瓷顆粒 TNF-α IL-1β NF-κB
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R318.08
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 前言10-12
• 第2章 材料與方法12-28
• 2.1 材料12-15
• 2.1.1 細(xì)胞株來源12
• 2.1.2 試劑及其配制方法12-14
• 2.1.3 主要儀器與設(shè)備14-15
• 2.2 方法15-26
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)15-17
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)分組17
• 2.2.3 MTT 比色試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞活性17-18
• 2.2.4 ELISA 法檢測(cè) IL-1β、TNF-α蛋白分泌情況18-19
• 2.2.5 RT-PCR 法檢測(cè) IL-1β、TNF-α、NF-κB mRNA 基因的表達(dá)19-23
• 2.2.6 Western blot 檢測(cè) NF-κB 蛋白的表達(dá)情況23-26
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理26-27
• 附圖27-28
• 第3章 結(jié)果28-33
• 3.1 MTT 比色試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞活性28
• 3.2 氯化鑭對(duì) IL-1Β、TNF-Α蛋白分泌的影響28-29
• 3.3 氯化鑭對(duì)各組 IL-1Β、TNF-Α、NF-ΚBMRNA 表達(dá)的影響29-31
• 3.4 氯化鑭對(duì)各組 NF-ΚB 蛋白含量的影響31-33
• 第4章 討論33-37
• 4.1 磨損顆粒與人工關(guān)節(jié)假體周圍骨溶解33-34
• 4.2 RAW264.7 細(xì)胞與人工關(guān)節(jié)假體周圍骨溶解34
• 4.3 NF-ΚB 與人工關(guān)節(jié)假體周圍骨溶解34-36
• 4.4 LACL3的作用與劑量之間的關(guān)系36
• 4.5 小結(jié)36-37
• 第5章 結(jié)論37-38
• 致謝38-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果43-44
• 綜述44-51
• 參考文獻(xiàn)49-51

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1 汪泱,胡峰,郭菲,袁鏗,胡銀英;氯化鑭拮抗內(nèi)毒素效應(yīng)的小鼠體內(nèi)研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2004年03期

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本文編號(hào)：622891