發(fā)布時間：2017-07-26 08:12

  本文關(guān)鍵詞：內(nèi)皮祖細胞促進組織工程骨體內(nèi)成骨

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【摘要】：目的探討自體外周血內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)體內(nèi)微血管化組織工程骨,并促進BMSCs成骨的能力。方法分離培養(yǎng)并鑒定1~9號新西蘭大耳兔外周血來源EPCs及BMSCs;取第3代細胞分3組:單純EPCs(A組)、單純BMSCs(B組)及共培養(yǎng)細胞(C組,EPCs∶BMSCs=1∶2),分別復合至包被纖維粘連蛋白的部分脫蛋白生物骨支架上構(gòu)建組織工程骨,4 d后將A、B、C組組織工程骨分別自體異位移植于右上肢、左上肢、右下肢肌袋內(nèi)(2塊/肢體),于移植后2、4、8周大體觀察組織工程骨生長情況;取材行HE染色并計算骨長入率;行CD34、CD105、緊密連接蛋白1(zonula occludens protein 1,ZO-1)免疫組織化學染色,并比較各組各時間點各因子表達量變化。結(jié)果成功分離1~9號兔外周血EPCs及BMSCs,免疫熒光染色鑒定EPCs為CD34、CD133及血管性血友病因子陽性,BMSCs為CD29、CD90陽性,CD34陰性。3組自體細胞成功復合至部分脫蛋白生物骨支架并異位移植。2、4、8周大體觀察示,隨時間延長,包繞各組組織工程骨的軟組織逐漸增多、增厚,切緣與組織工程骨分界不清,原組織工程骨孔隙逐漸被填充,C組最明顯,組織工程骨內(nèi)可見迂曲血管網(wǎng)形成。HE染色示各組組織工程骨內(nèi)毛細血管及膠原纖維逐漸增多,4、8周組織工程骨骨長入率C組明顯高于A、B組(P0.05),B組高于A組(P0.05)。免疫組織化學染色示,隨時間延長,3組組織工程骨CD34、CD105、ZO-1表達量均逐漸增多,組內(nèi)各時間點間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);移植后2周,C組CD105表達量高于A、B組(P0.05);4、8周3組間CD34、CD105、ZO-1表達量兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),各因子表達量C組均最多,B組最少。結(jié)論自體外周血EPCs與BMSCs按1∶2比例共培養(yǎng)后具有協(xié)同作用,可促進組織工程骨血管化及成骨。
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院醫(yī)學影像科;昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院整形外科;中南大學湘雅醫(yī)學院附屬海口醫(yī)院放射科;昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院血管外科;
【關(guān)鍵詞】： 內(nèi)皮祖細胞 BMSCs 新生血管化 組織工程骨 兔
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81460298) 云南省科技廳-昆明醫(yī)科大學應用基礎(chǔ)研究聯(lián)合專項(2015FB038)~~
【分類號】：R318.08;R687
【正文快照】： 炎癥、外傷、腫瘤切除所致大面積骨缺損修復是臨床難題,隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展,組織工程骨為骨缺損修復提供了新方法。組織工程骨的微血管化是骨組織工程研究的核心問題[1]。目前可通過加入促血管生成因子、改造支架結(jié)構(gòu)等方法促進組織工程骨血管形成[2],但效果并不理想。內(nèi)

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本文編號：575432