本文關(guān)鍵詞：聚氯乙烯材料表面白色念珠菌-表皮葡萄球菌混合生物膜結(jié)構(gòu)觀察，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)材料表面白色念珠菌-表皮葡萄球菌混合生物膜體外模型,觀察混合生物膜的形成與微觀結(jié)構(gòu)。方法取表皮葡萄球菌(ATCC35984)與白色念珠菌(ATCC10231),分別制備濃度為1×106 CFU/m L的懸液并混合后,與直徑0.5 cm PVC膜在胰蛋白胨大豆肉湯(tryptic soy broth,TSB)培養(yǎng)基中共培養(yǎng)形成混合生物膜(實(shí)驗(yàn)組)。培養(yǎng)2、6、12、24、48、72 h時(shí)取PVC膜,激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)生物膜厚度、單位視野菌落數(shù),并于48 h時(shí)測(cè)量生物膜內(nèi)活菌百分比、三維重建PVC膜表面生物膜圖像;掃描電鏡觀察各時(shí)間點(diǎn)混合生物膜結(jié)構(gòu)。以單純PVC膜置于TSB培養(yǎng)基中培養(yǎng)作為對(duì)照組。結(jié)果對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)PVC材料表面無病原菌黏附。實(shí)驗(yàn)組激光共聚焦顯微鏡觀察示,培養(yǎng)6 h時(shí)可見菌落及生物膜形成,隨時(shí)間延長(zhǎng)均逐漸增加,24 h時(shí)菌落達(dá)高峰,48 h時(shí)生物膜厚度達(dá)峰值。實(shí)驗(yàn)組PVC膜表面菌落數(shù)比較,2、6、24 h間以及2、6 h與48、72 h間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),24、48、72 h間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);生物膜厚度除48、72 h間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外(P0.05),其余各時(shí)間點(diǎn)間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。培養(yǎng)48 h時(shí),混合生物膜外層活菌百分比明顯高于內(nèi)層及中間層(P0.05)。三維重建顯示混合生物膜表面凹凸不平,突起部分活菌數(shù)量較多。掃描電鏡觀察示,實(shí)驗(yàn)組隨培養(yǎng)時(shí)間增加,PVC膜表面白色念珠菌由孢子狀逐漸伸長(zhǎng)出現(xiàn)假絲狀及菌絲狀,表皮葡萄球菌黏附于白色念珠菌周圍,逐漸形成復(fù)雜的多層次網(wǎng)狀混合生物膜。結(jié)論白色念珠菌-葡萄球菌混合培養(yǎng)可在PVC材料表面形成結(jié)構(gòu)復(fù)雜的混合生物膜,激光共聚焦顯微鏡、掃描電鏡與三維圖像重建技術(shù)的結(jié)合是研究混合生物膜的理想方法。
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院(云南省腫瘤醫(yī)院)胸外科一病區(qū);
【關(guān)鍵詞】： 聚氯乙烯 白色念珠菌 表皮葡萄球菌 混合生物膜
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81260228)~~
【分類號(hào)】：R318.08
【正文快照】： Department of h oracic Surgery,the h ird Ai liated Hospital of Kunming Medical University,Tumor Hospital of Yunnan Province,KunmingYunnan,650118,P.R.China.Foundation item:National Natural Science Foundation of China(81260228)病原菌生物膜是病原微生物在植

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