熒光多孔硅納米顆粒載體細(xì)胞學(xué)表征及其分子特異性攝取
本文關(guān)鍵詞:熒光多孔硅納米顆粒載體細(xì)胞學(xué)表征及其分子特異性攝取,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:多孔硅納米顆粒因其獨(dú)特的熒光特性、高比表面積以及良好的生物相容性等,使其在細(xì)胞成像、腫瘤成像、生物傳感、藥物載體等領(lǐng)域具有巨大的應(yīng)用價(jià)值。本文在制備具有良好穩(wěn)定熒光性質(zhì)的多孔硅納米顆粒的基礎(chǔ)上,結(jié)合通過微波加熱對(duì)多孔硅納米顆粒表面進(jìn)行進(jìn)一步的功能化修飾,系統(tǒng)開展了多孔硅納米顆粒的熒光性質(zhì)調(diào)諧、細(xì)胞內(nèi)離子檢測(cè)、體內(nèi)血液穩(wěn)定性的調(diào)控以及抗癌藥物的載入和智能釋放等領(lǐng)域的研究。本研究論文的主要內(nèi)容如下: 1.首先我們通過電化學(xué)腐蝕和超聲粉碎的方法制備了多孔硅納米顆粒,并進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)在乙醇或二甲基亞砜體系下,利用微波加熱的方法可以有效地提高多孔硅納米顆粒的熒光效率。我們結(jié)合紅外光譜和掃描電子顯微鏡等表征手段探討了其熒光增強(qiáng)的機(jī)理,結(jié)果表明:微波可以誘導(dǎo)乙醇或二甲基亞砜對(duì)多孔硅納米顆粒進(jìn)行氧化刻蝕,導(dǎo)致多孔硅的納米孔徑增大,同時(shí)形成表面氧化態(tài),多孔硅納米顆粒的熒光最終得以增強(qiáng)。依據(jù)這一理論,我們成功制備了粒徑約為60nm的具有強(qiáng)烈紅色熒光的硅基量子點(diǎn)。 2.通過微波誘導(dǎo)硅氫烷基化反應(yīng),我們將十一烯酸修飾到多孔硅納米顆粒表面上,有效提高了其在37℃磷酸緩沖溶液中的生理環(huán)境下的穩(wěn)定性。同時(shí)發(fā)現(xiàn)Cu2+可以有效地引發(fā)這種羧基化多孔硅納米顆粒的熒光淬滅,其淬滅強(qiáng)度和Cu2+濃度呈良好線性關(guān)系。利用這一特性,在羧基化多孔硅納米顆粒被細(xì)胞內(nèi)吞后,我們成功地檢測(cè)了細(xì)胞內(nèi)部Cu2+的μmol/L濃度。 3.我們同樣通過微波誘導(dǎo)硅氫烷基化反應(yīng),將十二烯修飾到多孔硅納米顆粒表面上。進(jìn)一步通過疏水性分子間作用,我們?cè)賹⑴Q灏椎鞍追肿影狡浔砻妫,這樣可以有效改善了烷基化多孔硅納米顆粒在水相中的分散性。同時(shí)由于吸附在納米顆粒外面的牛血清白蛋白層還能抵御細(xì)胞非特異性攝取和阻礙納米顆粒自身降解。 4.作為一種廣譜性抗癌藥物,阿霉素分子可以通過靜電吸附有效地吸附到牛血清白蛋白大分子中。我們進(jìn)一步通過疏水性分子間相互作用,將吸附阿霉素的牛血清白蛋白分子復(fù)合物包裹到烷基化多孔硅納米顆粒表面,形成了阿霉素/多孔硅復(fù)合納米顆。此外,阿霉素分子可以通過pH調(diào)控從阿霉素/多孔硅復(fù)合納米顆粒中可控釋放出來。這些阿霉素/多孔硅復(fù)合納米顆粒在被細(xì)胞攝取后,可以有效的在溶酶體內(nèi)釋放出阿霉素分子,最終富集到細(xì)胞核內(nèi),從而提高了其殺死癌細(xì)胞的效率。
【關(guān)鍵詞】:多孔硅 納米顆粒 細(xì)胞內(nèi)吞 離子檢測(cè) 藥物載體
【學(xué)位授予單位】:南京林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R318.08;TB383.1
【目錄】:
- 致謝3-4
- 摘要4-5
- Abstract5-8
- 第一章 文獻(xiàn)綜述8-16
- 1.1 硅基納米材料8
- 1.2 多孔硅納米材料8-13
- 1.2.1 多孔硅的發(fā)展史8-9
- 1.2.2 多孔硅的制備方法9-10
- 1.2.3 多孔硅納米顆粒的制備以及功能化修飾10-11
- 1.2.4 多孔硅納米材料在細(xì)胞生物學(xué)中的應(yīng)用11-13
- 1.3 實(shí)驗(yàn)樣品表征手段13-15
- 1.3.1 熒光分光光度計(jì)13-14
- 1.3.2 透射電子顯微鏡14
- 1.3.3 掃描電子顯微鏡14
- 1.3.4 傅里葉紅外光譜儀14
- 1.3.5 X 射線光電子能譜14
- 1.3.6 激光共聚焦掃描顯微鏡14-15
- 1.4 選題依據(jù)和研究?jī)?nèi)容15-16
- 第二章 微波加熱誘導(dǎo)多孔硅納米顆粒的熒光增強(qiáng)16-22
- 2.1 試劑與儀器16-17
- 2.2 實(shí)驗(yàn)方法17-18
- 2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料17
- 2.2.2 硅片的預(yù)處理17
- 2.2.3 制備多孔硅納米顆粒17-18
- 2.3 結(jié)果和討論18-21
- 2.3.1 微波加熱時(shí)間和溫度對(duì)多孔硅納米顆粒熒光強(qiáng)度的影響18
- 2.3.2 溶劑效應(yīng)對(duì)多孔硅納米顆粒熒光強(qiáng)度的影響18-19
- 2.3.3 微波加熱對(duì)多孔硅納米顆粒化學(xué)成份影響19-20
- 2.3.4 微波加熱對(duì)多孔硅納米顆粒的微觀結(jié)構(gòu)影響20-21
- 2.3.5 多孔硅納米顆粒的熒光量子產(chǎn)量研究21
- 2.4 結(jié)論21-22
- 第三章 羧基化熒光多孔硅納米顆粒檢測(cè)活細(xì)胞內(nèi)二價(jià)銅離子22-29
- 3.1 試劑與儀器22-24
- 3.2 實(shí)驗(yàn)方法24
- 3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料24
- 3.2.2 硅片的預(yù)處理及多孔硅材料的制備24
- 3.2.3 微波制備羧基化多孔硅納米顆粒24
- 3.3 結(jié)果與討論24-28
- 3.3.1 羧基化多孔硅納米顆粒的表征24-25
- 3.3.2 羧基化多孔硅納米顆粒熒光的穩(wěn)定性研究25-26
- 3.3.3 基于羧基化多孔硅納米顆粒的熒光淬滅檢測(cè)溶液中的二價(jià)銅離子26-27
- 3.3.4 羧基化多孔硅納米顆粒熒光探針檢測(cè)活細(xì)胞內(nèi)二價(jià)銅離子濃度27-28
- 3.4 結(jié)論28-29
- 第四章 疏水性熒光多孔硅納米顆粒吸附牛血清白蛋白降低細(xì)胞非特異性攝取29-37
- 4.1 試劑與儀器29-30
- 4.2 實(shí)驗(yàn)方法30-31
- 4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料30
- 4.2.2 硅片的預(yù)處理及多孔硅材料的制備30
- 4.2.3 制備烷基化多孔硅材料30
- 4.2.4 合成牛血清白蛋白包裹的多孔硅納米顆粒30-31
- 4.2.5 細(xì)胞活力分析31
- 4.2.6 細(xì)胞非特異性攝取分析31
- 4.3 結(jié)果與討論31-36
- 4.3.1 烷基化多孔硅納米顆粒的設(shè)計(jì)、合成和表征31-34
- 4.3.2 牛血清白蛋白/烷基化多孔硅納米顆粒非特異性細(xì)胞攝取34-36
- 4.4 結(jié)論36-37
- 第五章 牛血清白蛋白/熒光多孔硅納米復(fù)合顆粒作為納米載體導(dǎo)入外源藥物分子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部37-44
- 5.1 試劑與儀器37-38
- 5.2 實(shí)驗(yàn)方法38-39
- 5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料38
- 5.2.2 硅片的預(yù)處理及孔硅材料的制備38
- 5.2.3 制備烷基化多孔硅納米顆粒(D-PSiNPs)38
- 5.2.4 制備 DOX/BSA/D-PSiNPs 納米復(fù)合材料38-39
- 5.2.5 DOX 釋放的研究39
- 5.2.6 細(xì)胞相互作用的試驗(yàn)39
- 5.2.7 細(xì)胞毒性試驗(yàn)39
- 5.3 結(jié)果與討論39-43
- 5.3.1 DOX/BSA/D-PSiNPs 復(fù)合納米顆粒的制備和表征39-41
- 5.3.2 pH 調(diào)控 DOX/BSA/D-PSiNPs 復(fù)合納米顆粒釋放 DOX41
- 5.3.3 DOX/BSA/D-PSiNPs 復(fù)合納米顆粒和細(xì)胞相互作用41-43
- 5.4 結(jié)論43-44
- 第六章 結(jié)論與展望44-46
- 6.1 主要結(jié)論44
- 6.2 今后主要的研究方向44-46
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文46-47
- 參考文獻(xiàn)47-57
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