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熒光多孔硅納米顆粒載體細胞學表征及其分子特異性攝取

發(fā)布時間:2017-06-06 23:07

  本文關鍵詞:熒光多孔硅納米顆粒載體細胞學表征及其分子特異性攝取,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:多孔硅納米顆粒因其獨特的熒光特性、高比表面積以及良好的生物相容性等,使其在細胞成像、腫瘤成像、生物傳感、藥物載體等領域具有巨大的應用價值。本文在制備具有良好穩(wěn)定熒光性質的多孔硅納米顆粒的基礎上,結合通過微波加熱對多孔硅納米顆粒表面進行進一步的功能化修飾,系統(tǒng)開展了多孔硅納米顆粒的熒光性質調諧、細胞內(nèi)離子檢測、體內(nèi)血液穩(wěn)定性的調控以及抗癌藥物的載入和智能釋放等領域的研究。本研究論文的主要內(nèi)容如下: 1.首先我們通過電化學腐蝕和超聲粉碎的方法制備了多孔硅納米顆粒,并進一步發(fā)現(xiàn)在乙醇或二甲基亞砜體系下,利用微波加熱的方法可以有效地提高多孔硅納米顆粒的熒光效率。我們結合紅外光譜和掃描電子顯微鏡等表征手段探討了其熒光增強的機理,結果表明:微波可以誘導乙醇或二甲基亞砜對多孔硅納米顆粒進行氧化刻蝕,導致多孔硅的納米孔徑增大,同時形成表面氧化態(tài),多孔硅納米顆粒的熒光最終得以增強。依據(jù)這一理論,我們成功制備了粒徑約為60nm的具有強烈紅色熒光的硅基量子點。 2.通過微波誘導硅氫烷基化反應,我們將十一烯酸修飾到多孔硅納米顆粒表面上,有效提高了其在37℃磷酸緩沖溶液中的生理環(huán)境下的穩(wěn)定性。同時發(fā)現(xiàn)Cu2+可以有效地引發(fā)這種羧基化多孔硅納米顆粒的熒光淬滅,其淬滅強度和Cu2+濃度呈良好線性關系。利用這一特性,在羧基化多孔硅納米顆粒被細胞內(nèi)吞后,我們成功地檢測了細胞內(nèi)部Cu2+的μmol/L濃度。 3.我們同樣通過微波誘導硅氫烷基化反應,將十二烯修飾到多孔硅納米顆粒表面上。進一步通過疏水性分子間作用,我們再將牛血清白蛋白分子包裹到其表面,,這樣可以有效改善了烷基化多孔硅納米顆粒在水相中的分散性。同時由于吸附在納米顆粒外面的牛血清白蛋白層還能抵御細胞非特異性攝取和阻礙納米顆粒自身降解。 4.作為一種廣譜性抗癌藥物,阿霉素分子可以通過靜電吸附有效地吸附到牛血清白蛋白大分子中。我們進一步通過疏水性分子間相互作用,將吸附阿霉素的牛血清白蛋白分子復合物包裹到烷基化多孔硅納米顆粒表面,形成了阿霉素/多孔硅復合納米顆。此外,阿霉素分子可以通過pH調控從阿霉素/多孔硅復合納米顆粒中可控釋放出來。這些阿霉素/多孔硅復合納米顆粒在被細胞攝取后,可以有效的在溶酶體內(nèi)釋放出阿霉素分子,最終富集到細胞核內(nèi),從而提高了其殺死癌細胞的效率。
【關鍵詞】:多孔硅 納米顆粒 細胞內(nèi)吞 離子檢測 藥物載體
【學位授予單位】:南京林業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R318.08;TB383.1
【目錄】:
  • 致謝3-4
  • 摘要4-5
  • Abstract5-8
  • 第一章 文獻綜述8-16
  • 1.1 硅基納米材料8
  • 1.2 多孔硅納米材料8-13
  • 1.2.1 多孔硅的發(fā)展史8-9
  • 1.2.2 多孔硅的制備方法9-10
  • 1.2.3 多孔硅納米顆粒的制備以及功能化修飾10-11
  • 1.2.4 多孔硅納米材料在細胞生物學中的應用11-13
  • 1.3 實驗樣品表征手段13-15
  • 1.3.1 熒光分光光度計13-14
  • 1.3.2 透射電子顯微鏡14
  • 1.3.3 掃描電子顯微鏡14
  • 1.3.4 傅里葉紅外光譜儀14
  • 1.3.5 X 射線光電子能譜14
  • 1.3.6 激光共聚焦掃描顯微鏡14-15
  • 1.4 選題依據(jù)和研究內(nèi)容15-16
  • 第二章 微波加熱誘導多孔硅納米顆粒的熒光增強16-22
  • 2.1 試劑與儀器16-17
  • 2.2 實驗方法17-18
  • 2.2.1 實驗材料17
  • 2.2.2 硅片的預處理17
  • 2.2.3 制備多孔硅納米顆粒17-18
  • 2.3 結果和討論18-21
  • 2.3.1 微波加熱時間和溫度對多孔硅納米顆粒熒光強度的影響18
  • 2.3.2 溶劑效應對多孔硅納米顆粒熒光強度的影響18-19
  • 2.3.3 微波加熱對多孔硅納米顆;瘜W成份影響19-20
  • 2.3.4 微波加熱對多孔硅納米顆粒的微觀結構影響20-21
  • 2.3.5 多孔硅納米顆粒的熒光量子產(chǎn)量研究21
  • 2.4 結論21-22
  • 第三章 羧基化熒光多孔硅納米顆粒檢測活細胞內(nèi)二價銅離子22-29
  • 3.1 試劑與儀器22-24
  • 3.2 實驗方法24
  • 3.2.1 實驗材料24
  • 3.2.2 硅片的預處理及多孔硅材料的制備24
  • 3.2.3 微波制備羧基化多孔硅納米顆粒24
  • 3.3 結果與討論24-28
  • 3.3.1 羧基化多孔硅納米顆粒的表征24-25
  • 3.3.2 羧基化多孔硅納米顆粒熒光的穩(wěn)定性研究25-26
  • 3.3.3 基于羧基化多孔硅納米顆粒的熒光淬滅檢測溶液中的二價銅離子26-27
  • 3.3.4 羧基化多孔硅納米顆粒熒光探針檢測活細胞內(nèi)二價銅離子濃度27-28
  • 3.4 結論28-29
  • 第四章 疏水性熒光多孔硅納米顆粒吸附牛血清白蛋白降低細胞非特異性攝取29-37
  • 4.1 試劑與儀器29-30
  • 4.2 實驗方法30-31
  • 4.2.1 實驗材料30
  • 4.2.2 硅片的預處理及多孔硅材料的制備30
  • 4.2.3 制備烷基化多孔硅材料30
  • 4.2.4 合成牛血清白蛋白包裹的多孔硅納米顆粒30-31
  • 4.2.5 細胞活力分析31
  • 4.2.6 細胞非特異性攝取分析31
  • 4.3 結果與討論31-36
  • 4.3.1 烷基化多孔硅納米顆粒的設計、合成和表征31-34
  • 4.3.2 牛血清白蛋白/烷基化多孔硅納米顆粒非特異性細胞攝取34-36
  • 4.4 結論36-37
  • 第五章 牛血清白蛋白/熒光多孔硅納米復合顆粒作為納米載體導入外源藥物分子進入細胞內(nèi)部37-44
  • 5.1 試劑與儀器37-38
  • 5.2 實驗方法38-39
  • 5.2.1 實驗材料38
  • 5.2.2 硅片的預處理及孔硅材料的制備38
  • 5.2.3 制備烷基化多孔硅納米顆粒(D-PSiNPs)38
  • 5.2.4 制備 DOX/BSA/D-PSiNPs 納米復合材料38-39
  • 5.2.5 DOX 釋放的研究39
  • 5.2.6 細胞相互作用的試驗39
  • 5.2.7 細胞毒性試驗39
  • 5.3 結果與討論39-43
  • 5.3.1 DOX/BSA/D-PSiNPs 復合納米顆粒的制備和表征39-41
  • 5.3.2 pH 調控 DOX/BSA/D-PSiNPs 復合納米顆粒釋放 DOX41
  • 5.3.3 DOX/BSA/D-PSiNPs 復合納米顆粒和細胞相互作用41-43
  • 5.4 結論43-44
  • 第六章 結論與展望44-46
  • 6.1 主要結論44
  • 6.2 今后主要的研究方向44-46
  • 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文46-47
  • 參考文獻47-57

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本文編號:427678

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