發(fā)布時間：2017-06-02 06:12

  本文關(guān)鍵詞：定位磺化殼聚糖生物活性的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：肝素/硫酸乙酰肝素是糖胺聚糖家族中的一類重要的多糖,具有多種重要的生物學(xué)功能。肝素/硫酸乙酰肝素能特異性結(jié)合多種細胞外基質(zhì)蛋白和信號分子,并且能調(diào)節(jié)廣泛的生理功能。磺化殼聚糖作為一種肝素類似物,具有與肝素/硫酸乙酰肝素十分相似的分子結(jié)構(gòu),其分子中所具有的磺酸基團及其結(jié)構(gòu)能夠同肝素中的磺化結(jié)構(gòu)一樣實現(xiàn)對蛋白質(zhì)結(jié)合活性的調(diào)控,從而具備類似肝素的生物功能,包括抗凝血、抗病毒、抗腫瘤、抗菌、調(diào)節(jié)細胞分化等。與肝素相比,磺化殼聚糖具有活性單一,結(jié)構(gòu)可控的優(yōu)點,因此其具有極好的應(yīng)用前景。研究磺化殼聚糖的生物功能具有極其重要的意義。本課題制備了多種不同磺化位點修飾的殼聚糖,考察磺化殼聚糖的磺化位點及結(jié)構(gòu)對細胞增殖、分化行為的影響。另外,將磺化殼聚糖負載于殼聚糖膜片表面,制備了具有強抗菌且促細胞增殖的多功能生物材料,具體內(nèi)容如下:1.通過化學(xué)手段對殼聚糖加以磺化改性,獲得了多種不同磺化位點的定位磺化殼聚糖,并將磺化殼聚糖添加到培養(yǎng)基中對細胞進行培養(yǎng)。結(jié)果表明,磺化殼聚糖對普通細胞及胚胎干細胞均有一定的促增殖活性。2.磺化殼聚糖能影響干細胞的分化行為,我們將不同的定位磺化殼聚糖添加到培養(yǎng)基中對小鼠胚胎干細胞進行培養(yǎng),結(jié)果發(fā)現(xiàn),幾種磺化殼聚糖均能促進干細胞向神經(jīng)方向分化,其中6-O-磺化殼聚糖促進效果最為顯著,且磺化程度的提高有利于神經(jīng)方向的分化,表明磺化殼聚糖誘導(dǎo)干細胞神經(jīng)分化受到磺化位點及磺化程度的共同影響。3.通過正負離子的結(jié)合效應(yīng),結(jié)合戊二醛的輔助交聯(lián)作用將6-O-磺化殼聚糖負載于殼聚糖膜片的表面,該表面具有良好的生物相容性,在促進細胞的生長與增殖的同時還具有較強的抗菌效果。我們的研究表明,定位磺化殼聚糖具有促進細胞增殖、干細胞定向分化以及抗菌等多種生物活性,通過磺化殼聚糖改性的生物材料具有良好的促細胞增殖及抗菌效果,為今后制備多功能組織誘導(dǎo)型材料建立了很好的研究基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：磺化殼聚糖 細胞增殖 干細胞 神經(jīng)分化 抗菌
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R318.08;O636.1
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-12
• 第一章 緒論12-28
• 1.1 糖胺聚糖及其類似物12-16
• 1.1.1 糖胺聚糖12-13
• 1.1.2 糖胺聚糖類似物13-14
• 1.1.3 糖胺聚糖類似物的制備方法14-16
• 1.1.3.1 帶活性基團的單體聚合制備糖胺聚糖類似物14-15
• 1.1.3.2 化學(xué)處理法制備糖胺聚糖類似物15-16
• 1.1.3.3 等離子體處理法制備糖胺聚糖類似物16
• 1.2 糖胺聚糖及其類似物對細胞行為的影響16-24
• 1.2.1 糖胺聚糖對細胞行為的影響16-22
• 1.2.1.1 肝素/硫酸乙酰肝素對干細胞全能性的影響17-19
• 1.2.1.2 肝素/硫酸乙酰肝素對干細胞分化行為的影響19-22
• 1.2.2 肝素類似物對細胞行為的影響22-24
• 1.2.2.1 肝素類似物對干細胞行為的影響22
• 1.2.2.2 殼聚糖及其衍生物對干細胞行為的影響22-24
• 1.3 糖胺聚糖及其類似物抗菌性能的研究24-25
• 1.3.1 抗菌功能及抗菌劑24
• 1.3.2 糖胺聚糖的抗菌作用24
• 1.3.3 殼聚糖及其衍生物的抗菌功能24-25
• 1.4 課題提出25-28
• 1.4.1 研究的目的及意義25-26
• 1.4.2 研究的內(nèi)容及方案26-28
• 第二章 磺化殼聚糖的制備及其對細胞增殖行為的影響28-42
• 2.1 引言28-29
• 2.2 實驗部分29-38
• 2.2.1 材料及試劑29-31
• 2.2.2 實驗儀器31-32
• 2.2.3 定位磺化殼聚糖的合成32-33
• 2.2.3.1 2-N-磺化殼聚糖(2S)的合成32
• 2.2.3.2 6-O-磺化殼聚糖(6S)的合成32-33
• 2.2.3.3 2-N6O-磺化殼聚糖(26S)合成33
• 2.2.3.4 3,6-O-磺化殼聚糖(36S)的合成33
• 2.2.4 磺化殼聚糖的測試與表征33
• 2.2.5 細胞的培養(yǎng)33-37
• 2.2.5.1 培養(yǎng)液及溶液的配制33-35
• 2.2.5.2 普通細胞的培養(yǎng)35
• 2.2.5.3 小鼠胚胎干細胞的培養(yǎng)35-37
• 2.2.6 細胞增殖及毒性實驗37-38
• 2.3 結(jié)果與討論38-41
• 2.3.1 紅外光譜分析38
• 2.3.2 元素分析38-39
• 2.3.3 磺化殼聚糖對普通細胞增殖的影響39-41
• 2.4 本章小結(jié)41-42
• 第三章 定位磺化殼聚糖對胚胎干細胞神經(jīng)分化的影響42-58
• 3.1 引言42-43
• 3.2 實驗部分43-49
• 3.2.1 實驗原料及儀器43-44
• 3.2.2 磺化殼聚糖的合成44
• 3.2.3 磺化殼聚糖的測試與表征44
• 3.2.4 培養(yǎng)液及溶液的配制44-45
• 3.2.5 胚胎干細胞的分化實驗45
• 3.2.6 細胞免疫熒光染色45-46
• 3.2.7 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)46-49
• 3.2.7.1 普通PCR46-48
• 3.2.7.2 實時熒光定量PCR48-49
• 3.3 結(jié)果與討論49-57
• 3.3.1 元素分析49-50
• 3.3.2 不同定位的磺化殼聚糖對干細胞神經(jīng)分化的影響50-52
• 3.3.3 不同磺化度的 6-O-磺化殼聚糖對干細胞神經(jīng)分化的影響52-53
• 3.3.4 雙位點磺化的磺化殼聚糖對干細胞神經(jīng)分化的影響53-55
• 3.3.5 不同培養(yǎng)時間對干細胞神經(jīng)分化的影響55
• 3.3.6 培養(yǎng)液中不同濃度 6-O-磺化殼聚糖對干細胞神經(jīng)分化的影響55-57
• 3.4 本章小結(jié)57-58
• 第四章 6-O-磺化殼聚糖改性材料的抗菌性能的研究58-73
• 4.1 引言58-59
• 4.2 實驗部分59-66
• 4.2.1 材料與試劑59-60
• 4.2.2 磺化殼聚糖改性殼聚糖膜材料的制備60-61
• 4.2.2.1 殼聚糖膜的制備60
• 4.2.2.2 殼聚糖膜表面修飾磺化殼聚糖60-61
• 4.2.3 改性殼聚糖膜表面性質(zhì)的表征61-63
• 4.2.3.1 掃描電子顯微鏡(SEM)61
• 4.2.3.2 傅里葉紅外光譜分析(IR)61
• 4.2.3.3 X射線光電子能譜(XPS)61-62
• 4.2.3.4 甲苯胺藍染色法測表面 6S的接枝量62-63
• 4.2.3.5 生物相容性測試63
• 4.2.4 改性殼聚糖膜的抗菌性能的測試63-66
• 4.2.4.1 平板涂布法測定材料的抗菌性能64-65
• 4.2.4.2 MTT法測定材料的抗菌性能65-66
• 4.2.4.3 膜片表面細菌觀察66
• 4.2.4.4 材料抗菌穩(wěn)定性能測試66
• 4.3 結(jié)果與討論66-72
• 4.3.1 改性殼聚糖膜表面性質(zhì)分析66-68
• 4.3.2 改性殼聚糖膜表面磺化殼聚糖接枝量的測定68
• 4.3.3 生物相容性測試68-69
• 4.3.4 改性殼聚糖膜的抗菌活性69-71
• 4.3.5 改性殼聚糖膜抗菌效果穩(wěn)定性71-72
• 4.4 本章小結(jié)72-73
• 第五章 結(jié)論與展望73-74
• 參考文獻74-85
• 碩士論文工作期間主要科研成果85-86
• 致謝86-87

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Xueyuan Liu;ehua Li;Dong Jiang;Yan Fang;;Acetylcholine secretion by motor neuron-like cells from umbilical cord mesenchymal stem cells[J];Neural Regeneration Research;2013年22期

  本文關(guān)鍵詞：定位磺化殼聚糖生物活性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：414416